用酶解电泳图谱分析C—Ha—ras癌基因第12位密码子点突变  

THE DETECTION OF POINT MUTATION OF ONCOGENE c-Ha-ras AT CODON 12 WITH RESTRICTION ENZYME DIGESTION AND ELECTROPHRESIS

作　　者：史天良[1] 邓国仁 

机构地区：[1]山西省肿瘤研究所 [2]北京市肿瘤防治研究所生化室,北京100034

出　　处：《癌症》1991年第1期1-3,共3页Chinese Journal of Cancer

摘　　要：本实验以含正常细胞原癌基因c—Ha—ras 6.6Kb/Bam HI片段的重组质粒(简称J841)DNA和含人胃癌中克隆出的癌基因Ha—ras 6.6Kb/Bam HI片段的重组质粒(简称PGC6.6)DNA为材料,用限制性内切酶Nae I完全酶解,经1.2％琼脂糖凝胶电泳,发现两者的图谱有明显的差异。J841有0.86Kb和0.41Kb两条特征片段,而PGC6.6只有一条1.27Kb的特征片段。用放射性探针进行分子杂交,也显示出同样的结果。分析它们的DNA序列可知,PGC6.6第12密码子第2编码核苷酸由G突变为T,破坏了Nae I在此的切割位点,从而才出现这条1.27Kb的片段。本实验为c—Ha—ras癌基因第12密码子点突变的测定新方法。It was found that proto-oncogene c-Ha-ras generates a 0.86 Kb and a 0.41 Kb fragment, while oncogene Ha-ras isolated from human gastric carcinoma cell line EGC-823 generates a 1.27 KB fragment after digestion with Nae 1 followed by electrophoresis on 1.2% agarose gel and hybridization with 1.27 Kb Nae I fragmtnt as a probe. These results would give further support to the point mutation of c-Ha-ras oncogene at codon 12.

关 键 词：癌基因 酶解电泳 密码子 突变 

分 类 号：R730.231.3[医药卫生—肿瘤]