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作 者:周海岩[1,2] 刘龙[2] 堵国成[2,3] 陈坚[2,3]
机构地区:[1]浙江工业大学生物工程研究所,浙江杭州310014 [2]江南大学生物工程学院,江苏无锡214122 [3]江南大学食品科学与技术国家重点实验室,江苏无锡214122
出 处:《食品与发酵工业》2013年第7期88-93,共6页Food and Fermentation Industries
摘 要:为了解决噬菌体污染问题,提高L-苯丙氨酸(L-Phe)的生产稳定性,首先从L-Phe生产菌大肠杆菌WSH-Z06(pAP-B03)的异常发酵液中分离到1种噬菌体,将其命名为BP-1;再经WSH-Z06的亚硝基胍(NTG)诱变、抗性初筛、质粒pAP-B03的转化和摇瓶发酵复筛等过程,获得了1株对噬菌体BP-1不敏感的L-Phe高产菌株BR-42(pAP-B03)。在添加噬菌体的条件下的发酵中,该菌株的生长和L-Phe合成均不受影响,说明BR-42(pAP-B03)是1株可以抗噬菌体BP-1并能高产L-Phe的优良菌株,具有较大的工业生产应用价值。To cope with the bacteriophage problem for improvement of L-Phe production, we isolated bacteriophage BP-1 from the contaminated fermentation broth of E. coli WSH-Z06 (pAP-B03) producing L-phenylalanine (L- Phe). Through the treatment of WSH-Z06 with N-methyL-N' -nitro-N-nitrosoguanidine (NTG) , selection for resistance to BP-1, transformation with plasmid pAP-B03, and examination for the capacity of L-Phe production, we obtained one mutant strain E. coli BR-42 (pAP-B03). In the presence of BP-I, E. coli BR-42 (pAP-B03) exhibited a satisfactory performance in cell growth and L- Phe production. It was confirmed that E. coli BR-42 (pAP-B03) was a potential L-Phe over-producer against bacteriophage BP-1. It could be an excellent substitute for its parent strain WSH-Z06 (pAP-B03) in L-Phe industry production.
关 键 词:L-苯丙氨酸 大肠杆菌 噬菌体 NTG诱变 筛选
分 类 号:TQ922[轻工技术与工程—发酵工程]
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