重组酶Cre在体外对LoxP标记的基因组进行重组的初步研究  

Recombination LoxP-floxed gene by Cre recombinase expressed by retrovirus system in vitro

作　　者：陆群[1] 吴补领[1] 张洪伟[2] 王冀姝[3] 韩骅[3] 余擎[1] 苏凌云[1] 

机构地区：[1]第四军医大学口腔医学院,陕西西安710032 [2]第四军医大学西京医院胃肠外科,陕西西安710032 [3]第四军医大学基础部医学遗传学与发育生物学教研室,陕西西安710032

出　　处：《牙体牙髓牙周病学杂志》2002年第3期124-126,共3页Chinese Journal of Conservative Dentistry

基　　金：全军"十五"计划基金重点课题 ( 0 12 0 89)

摘　　要：目的 :研究逆转录病毒体系转导的重组酶Cre在体外对LoxP标记的基因组进行重组的能力。方法 :用逆转录病毒表达Cre ,体外感染条件性基因剔除 (即LoxP标记的基因 )小鼠来源的原代培养的牙乳头间充质细胞。从被感染的牙乳头间充质细胞中提取基因组DNA ,用PCR的方法显示LoxP标记的基因组长度的变化 ,从而反映Cre在体外的重组能力。结果 :被表达Cre的逆转录病毒感染的牙乳头间充质细胞 ,其标记的基因组长度发生了预期的变化 ,被标记的部分发生缺失。结论 :用逆转录病毒体系转导重组酶Cre能够有效地对LoxP标记的基因组进行重组。为用这一方法在体外研究特异基因对细胞生物学行为的影响奠定基础。AIM: To study recombination LoxP-floxed gene by Cre recombinase expressed by retrovirus system in vitro . METHODS: Expressed Cre recombinase by retrovirus system, infected the dental papilla mesenchymal cells from conditional gene knock-out mice which containing LoxP-floxed gene. Extracted genome DNA from dental papilla mesenchymal cells infected by retrovirus, observed the change of the LoxP-floxed gene length by PCR. RESULTS: LoxP-floxed gene of the cells infected by retrovirus was deleted. CONCLUSION: Cre expressed by retrovirus system has effective recombinase activity in vitro . This system will be helpful in studying the function of specific gene.

关 键 词：CRE 条件性基因剔除 逆转录病毒 LoxP标记 基因组 重组 

分 类 号：R780.2[医药卫生—口腔医学]