国家自然科学基金(31172304)

作品数：17被引量：36H指数：5
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相关作者：高凤山杨杰李子彬韩勇高花更多>>
相关机构：大连大学吉林农业大学内蒙古农业大学中国疾病预防控制中心更多>>
相关期刊：《生物技术通报》《微生物学通报》《动物医学进展》《Science Bulletin》更多>>
相关主题：原核表达载体SLA-2荷包猪四聚体A-1更多>>
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托佩克猪SLA-1-632-TPK基因的矫正及重组质粒SLA-1-TPK/pMD19-T的构建
《中国畜牧兽医》2017年第6期1645-1651,共7页翟晓鑫 高花 韩勇 高凤山 
国家自然科学基金项目:猪源病毒CTL多肽表位与SLA-Ⅰ结晶研究(31172304);国家自然科学基金项目:CRISPR/Cas9技术构建ST2细胞系筛选猪源病毒SLA-Ⅰ限制性CTL表位的研究(31672525);辽宁省教育厅重点实验室项目(LZ2015003)
猪白细胞抗原(swine leukocyte antigen,SLA)在猪免疫系统中起递呈抗原作用,对其展开研究可为猪相关传染病的预防提供依据。研究发现,托佩克猪SLA-1-632-TPK基因编码序列发生碱基缺失(距离SLA-1-632-TPK基因5′端632bp处丢失1个碱基"C")...
关键词：托佩克猪 SLA-1基因 基因矫正 剪切重叠延伸PCR(SOE-PCR) 
大肠杆菌表达SLA-3蛋白与口蹄疫病毒多肽的复性研究被引量：4
《微生物学通报》2017年第2期394-401,共8页杨杰 韩勇 高花 许崇波 刘军 高凤山 
国家自然科学基金项目(No.31172304);辽宁省教育厅重点实验室项目(No.LZ2015003)~~
【目的】研究大约克猪SLA-3(SLA-3-YDY)蛋白在体外与口蹄疫病毒多肽的复性。【方法】设计SLA-3-YDY胞外区引物,PCR扩增目的基因,并将此片段克隆至p MD19-T Simple Vector上,双酶切筛选出阳性克隆并测序,测序正确的片段连接至表达载体p E...
关键词：大约克猪 SLA-3 原核表达载体 构建 纯化 
新型多肽表位技术研究进展被引量：1
《中国畜牧兽医》2017年第1期44-52,共9页韩勇 高花 翟晓鑫 高凤山 
国家自然科学基金项目:猪源病毒CTL多肽表位与SLA-Ⅰ结晶研究(31172304)
多肽表位作为抗原的重要组成成分,可以被宿主免疫系统B细胞产生的抗体(Ig)和T细胞受体(TCR)识别,从而诱导机体产生免疫保护作用。传统的研究方法如交叠肽合成等费时费力,极大地限制了多肽表位的研究。随着生物信息学、高通量测序、CRISP...
关键词：多肽 表位 筛选 CRISPR/Cas9技术 TAP非依赖性表位 
大约克猪SLA-1原核表达载体的构建及表达被引量：2
《中国畜牧兽医》2016年第12期3121-3126,共6页张秀娟 杨杰 孙永强 高凤山 
国家自然科学基金项目:猪源病毒CTL多肽表位与SLA-Ⅰ结晶研究(31172304);2015年辽宁省大学生创新创业训练计划项目:育-大约克猪SLA-1原核表达载体的构建及表达研究(20150086);2014年大连大学大学生创新创业训练计划项目重点项目:育-大约克猪SLA-1原核表达载体的构建及表达研究(2014066)
为构建大约克猪 SLA-1胞外区的原核表达载体及表达目的蛋白,试验设计1对引物,经 PCR 扩增获得大约克猪 SLA-1胞外区基因（命名为 SLA-1-DYKe）,将此片段克隆至 pMD 19-T Simple Vector,转化大肠杆菌TOP10感受态细胞,经 Nde Ⅰ和 Xho Ⅰ...
关键词：大约克猪 SLA-1 基因 原核表达载体 
荷包猪SLA-DRB基因cDNA的克隆及分子进化特征分析被引量：2
《生物技术通报》2015年第12期150-157,共8页姜平 额尔敦木图 高凤山 
国家自然科学基金项目(31172304);辽宁省博士启动基金项目(20081078)
旨在研究荷包猪SLA-DRB基因的分子特征,设计引物用RT-PCR扩增3头荷包猪DRB基因c DNA,并克隆至p MD18-T Vector,阳性克隆测序并做序列分析,分别进行同源性、分子进化及主要氨基酸变异位点分析。结果表明,成功从3头荷包猪中扩增得到SLA-DR...
关键词：荷包猪 SLA-DRB 分子进化 多态性 
新型基因组编辑技术研究进展被引量：3
《动物医学进展》2015年第10期100-105,共6页韩勇 杨杰 李子彬 董宋鹏 高凤山 
国家自然科学基金项目(31172304)
基因组编辑技术是一种能精确靶向修饰生物基因组,实现对基因定点敲除和外源基因定点整合的技术。新出现的锌指核酸酶(ZFN)、转录激活子样效应因子核酸酶(TALEN)和规律性重复短回文序列簇与Cas9蛋白(CRISPRs/Cas9)系统3种新型的基因组编...
关键词：锌指核酸酶 转录激活子样效应因子核酸酶 规律性重复短回文序列簇 
大肠杆菌表达托佩克猪SLA-1胞外区的研究被引量：1
《生物技术通报》2015年第3期135-139,共5页翟晓鑫 张秀娟 杨杰 高凤山 
国家自然科学基金项目(31172304);大连大学本科生创新项目(2013249)
为构建托佩克猪SLA-1重链基因原核重组表达载体并研究其在pET-21a(+)中的表达,设计引物,PCR扩增托佩克猪SLA-1基因胞外区(命名为SLA-1-TPKe),并克隆至pMD19-T Simple Vector,经酶切鉴定后将SLA-1-TPKe基因与表达系统pET-21a(+)连接,转化...
关键词：托佩克猪 SLA-1 重链基因 表达 包涵体 
荷包猪SLA-DRa基因的克隆及序列分析被引量：3
《中国畜牧兽医》2015年第2期264-269,共6页姜平 高凤山 额尔敦木图 
国家自然科学基金(31172304)
为研究中国特色品系荷包猪SLA-DRa基因(又称SLA-DRa-HB),本试验设计引物,RT-PCR扩增3个个体荷包猪SLA-DRa全基因编码区,并克隆至pMD18-T载体,转化大肠杆菌JM109感受态细胞,经酶切鉴定后筛选阳性克隆测序,比较分析与其他SLA-DRa等位基因...
关键词：荷包猪 SLA-DRa基因 克隆 序列分析 
中国2个地方品系猪SLA-3原核表达载体构建及表达被引量：5
《中国畜牧兽医》2015年第2期298-302,共5页苟东洲 戴琳 杨杰 高凤山 
国家自然科学基金项目(31172304);2014年辽宁省大学生创新创业训练计划项目(201411258068);2013年大连大学大学生创新创业训练计划项目(2013071)
为构建中国地方品系荷包猪及莱芜黑猪SLA-3(命名为SLA-3-HB和SLA-3-LW)原核表达载体及表达目的蛋白,试验通过PCR扩增获得SLA-3胞外区基因,并克隆至pMD19-T Simple载体,转化大肠杆菌Top10感受态细胞,酶切及测序筛选阳性重组质粒;重组质...
关键词：荷包猪 莱芜黑猪 SLA-3 表达 
MHCI类分子四聚体技术的应用研究进展被引量：1
《生命科学》2015年第2期228-233,共6页董宋鹏 李子彬 杨杰 高凤山 
国家自然科学基金项目(31172304)
主要组织相容性复合体(major histocompatibility complex,MHC)I类分子四聚体(tetramer)技术可直接对抗原特异性细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxic T lymphocytes,CTL)进行标记,以检测能够识别特定抗原肽-MHC I的CTL,用于临床检测、疾病诊断...
关键词：MHC I 四聚体 抗原肽 细胞毒性T淋巴细胞 
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