长江学者和创新团队发展计划(IRT0555-9)

作品数：10被引量：48H指数：4
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相关机构：四川农业大学重庆三峡学院中国兽医药品监察所更多>>
相关期刊：《中国兽医学报》《畜牧兽医学报》《农业生物技术学报》《中国预防兽医学报》更多>>
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胸膜肺炎放线杆菌apxIIC^-/kan^(r+)基因缺失减毒株的构建被引量：1
《中国兽药杂志》2012年第3期5-9,共5页李建 曹三杰 文心田 黄小波 都启晶 张明 余慧 
教育部长江学者和创新团队发展计划资助项目(IRT0555-9)
重组转移载体pBSKA通过电转化导入亲本菌胸膜肺炎放线杆菌血清7型(APP-7)WF83株,电转化后的产物涂布于TSB/Kan平板,2 d获得突变株。卡那霉素抗性实验证实突变株有卡那霉素抗性;NAD依赖性实验证实突变株依赖NAD生长;PCR鉴定证实了卡那霉...
关键词：胸膜肺炎放线杆菌 重组转移载体 电转化 突变株 基因工程弱毒活疫苗 
猪粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(pGM-CSF)基因的克隆与原核表达被引量：4
《农业生物技术学报》2009年第2期206-211,共6页杨恒 文心田 曹三杰 黄小波 
教育部长江学者和创新团队发展计划项目(No.IRT0555-9);四川省重点公益项目(No.2007NGY007)资助
通过RT-PCR方法,从经ConA刺激的猪外周血淋巴细胞中扩增出猪粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(pGM-CSF)编码区的cDNA并将其克隆至pMD-19T载体,序列测定表明pGM-CSF基因的长度为435bp,编码144个氨基酸。通过PCR方法获得缺失其N端17个氨基酸...
关键词：猪粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子 基因克隆 原核表达 生物活性测定 
猪传染性胃肠炎病毒检测基因芯片的构建被引量：14
《中国兽医学报》2009年第2期121-124,共4页曹三杰 黄小波 文心田 肖国生 
教育部长江学者和创新团队发展计划资助项目(IRT0555-9)
采用PCR扩增制备TGEV的靶基因并进行纯化，对基因芯片的最佳靶基因点样质量浓度、探针质量浓度、杂交温度、杂交时间进行筛选，选择构建检测芯片的最适靶基因，进行基因芯片探针最佳标记方法试验。结果表明，质粒PCR扩增和采用异丙醇沉...
关键词：猪传染性胃肠炎病毒 检测 基因芯片 构建 
携带TGEV DNA疫苗减毒沙门氏菌的构建及安全性与免疫性分析被引量：9
《微生物学报》2009年第1期72-77,共6页杨恒 刘佳文 曹三杰 黄小波 文心田 
教育部长江学者和创新团队发展计划资助项目(IRT0555-9);四川省教育厅资助科研项目~~
【目的】探讨以减毒沙门氏菌为载体,进行TGEV DNA疫苗口服免疫可行性。【方法】通过RT-PCR扩增TGEV四川株(SC-H)S基因5’端约2.1 kb的主要抗原位点片段,将其插入真核表达载体pVAX1,构建重组质粒pVAX-S,体外转染COS-7细胞,间接免疫荧光检...
关键词：猪传染性胃肠炎病毒 S基因 减毒沙门氏菌 DNA疫苗 安全性 免疫原性 
猪胸膜肺炎放线杆菌ArcA基因在低氧环境下的转录变化
《畜牧兽医学报》2008年第10期1388-1394,共7页段丽丽 文心田 曹三杰 黄小波 
教育部长江学者和创新团队发展计划项目(NoIRT0555-9)
为研究低氧条件对猪胸膜肺炎放线杆菌(Actinobacillus pleuropneumoniae,APP)血清1型ArcA基因表达的影响,并探讨ArcA在低氧环境中的作用机制,作者建立了体外培养模型,在低氧环境中培养APP,采用半定量RT-PCR方法,以看家基因recF为内参,检...
关键词：半定量RT-PCR 猪胸膜肺炎放线杆菌 ArcA基因 缺氧 
真核双顺反子表达载体pcDNA3.1AB的构建与表达被引量：4
《农业生物技术学报》2008年第6期920-925,共6页曹三杰 邓飞 杨恒 黄小波 文心田 
教育部长江学者和创新团队发展计划资助项目(No.IRT0555-9)资助
为了构建由双CMV启动子调控的真核双顺反子表达载体pcDNA3.1AB,首先在pcDNA3.1(+)的基础上,构建出pcDNA3.1A和pcDNA3.1B,然后通过PCR方法扩增pcDNA3.1A上含PCMV-MCS-BGHpolyA表达单元的片段,再定向克隆入pcDNA3.1B,最后得到载体pcDNA3....
关键词：双顺反子 载体构建 红色荧光蛋白 绿色荧光蛋白 
猪传染性胃肠炎病毒N基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达被引量：2
《中国兽医学报》2008年第5期489-492,共4页黄小波 曹三杰 文心田 肖国生 肖驰 
四川省重点科技攻关资助项目(01NG018-01);教育部长江学者和创新团队发展计划资助项目(IRT0555-9)
应用RT-PCR扩增猪传染性胃肠炎病毒SC-H株N基因,将扩增的N基因克隆到pMD18-T载体中,进行BamHⅠ和SalⅠ双酶切鉴定,将获得的N基因片段以pET32a(+)载体进行亚克隆,构建了pET32-N重组表达质粒并进行鉴定。将pET32-N重组质粒转化BL21(DE3)...
关键词：猪传染性胃肠炎病毒 N基因 克隆 表达 纯化 
猪肺炎支原体检测芯片的研制及初步应用被引量：10
《中国预防兽医学报》2008年第1期57-63,共7页肖国生 曹三杰 黄小波 文心田 
教育部长江学者和创新团队发展计划基金资助项目(IRT0555-9);四川省生物技术重点项目(01NG018-01);重庆三峡学院引进人才科研资助项目资助(2006-SXXYRC-09)
本研究探索建立一种新的基因芯片方法检测和鉴定猪肺炎支原体。在猪肺炎支原体的16SrRNA、P36和P463个基因内设计3个靶基因片段,用PCR标记Cy3探针,建立了用于检测和鉴定猪肺炎支原体的检测芯片。试验结果显示,猪肺炎支原体与检测芯片的...
关键词：猪肺炎支原体 基因芯片 鉴定 
胸膜肺炎放线杆菌荚膜多糖输出基因部分序列的克隆鉴定、序列拼接和分析应用被引量：1
《中国兽医学报》2007年第3期325-329,共5页肖国生 曹三杰 段丽丽 文心田 肖驰 马晓平 杨利 
教育部长江学者和创新团队发展计划资助项目(IRT0555-9)
用设计的引物对胸膜肺炎放线杆菌1、3、6、9型标准株的荚膜多糖输出部分基因序列进行了扩增，克隆，测序，分别获得4个型的部分cpxDC基因序列和3型的部分cpxD基因序列。对克隆序列和GenBank中已知序列进行序列拼接，分别拼接出1、3、6...
关键词：胸膜肺炎放线杆茵 荚膜多糖输出基因 克隆鉴定 序列拼接 PCR 
猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)诊断DNA微阵列的构建被引量：4
《中国兽医学报》2007年第1期6-12,共7页肖驰 曹三杰 文心田 
教育部长江学者和创新团队发展计划资助项目(IRT0555-9)
为构建猪繁殖与呼吸综合征（PRRS）诊断DNA微阵列，应用RT—PCR从猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）C14—2分离株和欧洲型弱毒疫苗株VP046扩增并克隆获得戋洲型重组质粒C14P9（基因号：AY775132）、PRRS—PS9（基因号：AY775134）、Ulb...
关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒 DNA微阵列 克隆 
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