“十五”国家科技攻关计划(2001BA70113)

作品数：22被引量：100H指数：6
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人乳头瘤病毒16E7DNA疫苗微针给药效果研究被引量：1
《中华预防医学杂志》2008年第9期663-666,共4页高慧 潘金春 陈兵 薛整风 李厚达 
“十五”国家科技攻关计划（2001BA70113）;江苏省自然科学基金（BK2004057）;2007年度扬州市一扬州大学科技合作资金计划项目（YZ2007047）
目的探讨DNA疫苗微针给药方法的有效性。方法构建pcDNA3．1-HPV16E7重组质粒，在体外透皮条件下，观察pcDNA—HPV16E7皮肤透过量，再利用微针给药方式免疫BALB／c小鼠，分三组（实验组、空载体对照组、阴性对照组），每组10只，每2周免...
关键词：疫苗 DNA 投药途径 评价研究 
脑部特异表达rtTA调控元件转基因小鼠的构建被引量：1
《扬州大学学报（农业与生命科学版）》2008年第1期16-19,共4页章蓉 孙强 徐桂芳 董娟 金宇娟 江楠 
国家"十五"科技攻关项目(2001BA70113)
为获得一种可调控基因表达系统,避免传统转基因在胚胎发育早期表达的毒性作用或致死作用以及基因过度表达而造成难于分析的复杂多表型,应用分子生物学方法将四环素反式激活子rtTA克隆到仅在脑部能被激活的钙调蛋白依赖性蛋白激酶CaM kin...
关键词：小鼠 转基因 RTTA CaM kinaseⅡ 
脑部特异表达SV40Tag转基因动物模型的建立被引量：3
《扬州大学学报（农业与生命科学版）》2007年第3期9-12,共4页冯洁 孙强 邢华 高诚 李厚达 
国家"十五"科技攻关项目(2001BA70113)
将猿猴病毒抗原蛋白(SV40Tag)片段克隆进脑部特异表达载体pMM279中,通过显微注射法制作转基因小鼠。采用PCR和Southern blotting检测目的基因整合,并通过RT-PCR检测目的基因的表达。结果表明:共出生29只仔鼠,经PCR检测出3只阳性,Souther...
关键词：脑肿瘤 猿猴病毒抗原蛋白 转基因 
HPV16L1抗原表达肿瘤模型的建立
《分子细胞生物学报》2006年第1期9-14,共6页高慧 黄正芳 刘进 薛整风 李厚达 
"十五"国家科技攻关计划(项目编号:2001BA70113)江苏省自然科学基金(项目编号:BK2004057)。
应用基因重组技术,构建pcDNA-L1真核表达载体,经限制性内切酶和序列分析,用脂质体转染技术将其转入B16细胞,G418稳定筛选后IFA法检测其表达,RT-PCR法检测HPV16L1 mRNA 的生成,并将转染细胞接种小鼠皮下,观察成瘤情况及RT-PCR法检测HPv16...
关键词：HPV16 L1 基因转染 肿瘤模型 
四环素调控SV40Tag转基因小鼠模型的建立被引量：1
《中国实验动物学报》2006年第1期8-11,共4页孙强 岳挺 刘英 冯洁 董娟 曹慧 章蓉 朱洪 刘全海 李厚达 
"十五"国家科技攻关计划资助项目(批准号:2001BA70113)
目的构建四环素调控的SV40T转基因小鼠模型。方法同时显微注射外源基因p205-rtTA-C3和pTRE-Tag至FVB小鼠原核,注射受精卵移植到同期发情的假孕受体出生个体,经PCR和Southern检测获得阳性转基因小鼠。结果经PCR结合Southern检测得到rtTA...
关键词：四环素 基因表达调控系统 转基因 模型 动物 
卵巢移植技术应用于胰腺癌转基因小鼠模型繁殖传代研究被引量：2
《中国实验动物学报》2006年第1期25-26,T0004,共3页刘英 孙强 王光凤 刘进 郑逸梅 董娟 曹慧 刘全海 李厚达 
"十五"国家科技攻关计划资助项目(批准号:2001BA70113)
目的研究卵巢移植在胰腺癌转基因小鼠模型保种传代中的应用。方法通过显微手术将SV40T阳性转基因小鼠的卵巢原位移植给相同背景品系去除卵巢的正常FVB雌鼠体内。移植后与正常FVB雄鼠配种,后代以PCR检测确定阳性,统计后代发病情况。并对...
关键词：小鼠 转基因 卵巢 移植 繁殖 连续传代 
地方株HPV16E7基因疫苗诱发的小鼠免疫反应被引量：1
《肿瘤》2006年第1期7-9,共3页高慧 孙强 黄正芳 陈兵 李厚达 
"十五"国家科技攻关计划(编号:2001BA70113);江苏省自然科学基金项目(编号:BK2004057)
目的评价地方株HPV16E7基因疫苗诱导的免疫反应。方法从先期构建的地方株HPV16E7基因重组质粒pGEM-T-E7经限制性核酸内切酶酶切,获得E7基因亚克隆到真核表达载体pcDNA3.1(-)中,构建地方株pcDNA-E7基因疫苗,转染CHO细胞,通过IFA试验验证E...
关键词：乳头状瘤病毒 人 基因 结构 病毒 基因 E7 疫苗 DNA 免疫测定 小鼠 近交BALB/c 
Tet-on系统诱导猿猴病毒40T在CHO细胞中的表达
《扬州大学学报（农业与生命科学版）》2005年第3期12-16,共5页朱洪 孙强 徐向明 孙怀昌 李厚达 
国家"十五"科技攻关项目(2001BA70113)
四环素诱导表达系统(T et-off/T et-on系统)是比较成熟的真核生物基因诱导表达系统之一,具有高效、无毒、严密开/关功能的特点。猿猴病毒40T(SV 40T)是一种病毒癌蛋白,其与肿瘤抑制蛋白p53和R b结合,并使之失活,从而消除它们抑制细胞生...
关键词：猿猴病毒40T 四环素诱导表达系统 强力霉素 
共刺激分子配体B7-H1基因真核表达载体和转基因细胞的构建被引量：2
《扬州大学学报（农业与生命科学版）》2005年第3期17-20,共4页冯洁 王光凤 孙强 邢华 李厚达 
国家"十五"科技攻关项目(2001BA70113)
以PHA刺激的小鼠外周血单核细胞中抽提的总RNA为模板,通过RT-PCR技术,扩增出B 7-H 1基因。按常规方法克隆进pEF 6V 5H is A载体,重组质粒经鉴定后采用脂质体法转染CHO细胞,48 h后进行间接免疫荧光试验,72 h后用B lastic id in进行筛选,...
关键词：肿瘤细胞 共刺激分子 B7-H1基因 真核表达 
两种含SV40T不同区段的基因构建及其转基因小鼠的建立被引量：1
《中国实验动物学报》2005年第1期27-32,共6页谢夏阳 滕勇 孙强 徐平 孙怀昌 李厚达 
"十五"国家科技攻关计划 (2 0 0 1BA70 113 )。
目的　为解决SV4 0T转基因小鼠高发瘤难保种的问题 ,构建了两种含有SV4 0T不同区段的外源基因 :Rb结合域点突变的SV4 0T基因 (SV4 0T DRb)和无p5 3结合域的SV4 0T基因 (SV4 0T Dp5 3)。方法　利用分子生物学的基因克隆手段 ,将改造的SV4...
关键词：转基因小鼠 SV40T基因 PCR 肿瘤模型 DNA肿瘤病毒 
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