国家高技术研究发展计划(2006AA02Z447)

作品数:6被引量:13H指数:2
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相关作者:金宁一李昌金洪涛李霄丛艳昭更多>>
相关机构:军事医学科学院延边大学吉林大学通化市人民医院更多>>
相关期刊:《中国生物制品学杂志》《黑龙江畜牧兽医》《中国兽医学报》《中国生物工程杂志》更多>>
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反转录病毒载体介导的EGFP基因在SP2/0小鼠骨髓瘤细胞中的表达被引量:1
《黑龙江畜牧兽医》2011年第3期40-42,共3页王婧 李昌 李林溪 胡博 丛艳昭 任大勇 王卓越 杜寿文 金宁一 
国家自然科学基金项目(81001342);"863"国家高技术研究计划项目(2006AA02Z447);军内"十一五"科技攻关项目(06G127);长春市科技局重点项目(2007KZ19)
为了构建携带报告基因增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因的反转录病毒载体,并观察EGFP基因在SP2/0小鼠骨髓瘤细胞中的表达情况。试验将增强型绿色免疫荧光基因片段定向插入反转录病毒载体pFB-neo,获得重组反转录病毒质粒pFB-NE,利用三质粒...
关键词:反转录病毒载体 增强型绿色荧光蛋白(EGFP) SP2/0小鼠骨髓瘤细胞 
金黄色葡萄球菌肠毒素A在枯草芽孢杆菌中的表达及其活性分析
《中国兽医学报》2010年第3期327-331,共5页韩佳丽 李昌 沈国顺 胡博 李霄 田明尧 孙珊珊 叶明 金宁一 
科技部863计划(2006AA02Z447);军内十一五科技攻关项目(06G127);长春市科技局重点项目(2007KZ19)
利用优化后的SEA基因片段与带有枯草芽孢杆菌启动子的表达载体pBC38c,成功构建了含有SEA基因的重组表达质粒pBC38c-SEA。通过电转化的方法,将重组质粒pBC38c-SEA转入枯草芽孢杆菌1A751中。对目的蛋白进行表达,采用硫酸铵沉淀法浓缩上清...
关键词:金黄色葡萄球菌肠毒素A 枯草芽孢杆菌 分泌表达 
治疗用质粒DNA的纯化工艺被引量:5
《中国生物制品学杂志》2008年第10期899-902,共4页丛艳昭 鲁承 金宁一 申镇维 梁晓枫 金洪涛 白靓 牟伟锋 于长勇 常巧呈 齐楷 金明杰 
"863"重大项目(2006AA02Z447).
目的探索适合大规模生产治疗用质粒DNA的纯化工艺。方法采用中空纤维柱收菌、碱裂解,再应用中空纤维柱浓缩质粒,经分子筛、亲和、离子交换等层析分离纯化质粒DNA,并应用凝胶电泳、PCR、核酸蛋白检测仪、BCA蛋白检测试剂盒和内毒素检测...
关键词:质粒DNA 纯化 中空纤维柱 层析 
表达中国流行株HIV-1 gp120外膜蛋白靶细胞模型的建立被引量:3
《中国生物工程杂志》2008年第4期12-16,共5页李昌 金宁一 胡宁宁 刘玉生 佟敬山 李霄 金洪涛 于芳 
吉林省科技厅项目(20060570);国家“863”计划(2006AA02Z447);长春市科技局项目(2007KZ19)资助项目
利用pDispaly真核表达载体构建了用于表达中国流行株HIV-1gp120的真核表达质粒pD-120,通过脂质体转染法将其导入人宫颈癌细胞(HeLa),经G418反复加压筛选,直到细胞不再死亡为止,8代后获得稳定表达中国流行株HIV-1gp120蛋白的靶细胞复制模...
关键词:HIV.1 GP120 HeLa细胞模型建立 
二硫键稳定的抗HIV-1 gp41单链抗体的构建及原核表达被引量:2
《中国生物制品学杂志》2008年第3期169-173,共5页佟敬山 李昌 金宁一 于源华 刘玉生 于芳 胡宁宁 李霄 张钰 
吉林省应用基础项目(20060570);863计划项目(2006AA02Z447)
目的构建二硫键稳定的抗HIV-1 gp41单链抗体(dsFv)基因原核表达载体,并进行表达和鉴定。方法采用PCR定点突变的方法,构建含二硫键稳定的抗HIV-1 gp41单链抗体突变基因质粒pUC57-d41,BamHⅠ和HindⅢ双酶切后,定向插入pET-28a(+),转化大...
关键词:人免疫缺陷病毒 GP41 单链抗体 原核表达 稳定性 
DNA表达载体构建及HIV多表位核酸疫苗的设计与表达被引量:2
《中国生物制品学杂志》2007年第4期237-239,共3页付延军 金宁一 金洪涛 李臻 辛苏文 李萍 韩贞珍 李太元 
军队科技攻关重点项目(06G127);"863"项目(2006AA02Z447)资助
目的利用塞姆利基森林病毒(SFV)复制子构建新型真核表达载体,并对含HIV-1中国流行株B亚型核心蛋白p24及多表位MEG嵌合基因的核酸疫苗进行表达与鉴定。方法将含SFV复制子的元件从pSFV-MCS中切下,连入含CMV启动子及增强子的pIRESneo载体中...
关键词:人免疫缺陷病毒 塞姆利基森林病毒 复制子 核酸疫苗 
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