北京市自然科学基金(7112101)

作品数：7被引量：12H指数：2
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相关作者：张浩程龙叶棋浓徐小洁李玮妮更多>>
相关机构：军事医学科学院中国人民解放军总医院安徽医科大学中国人民解放军总医院第一附属医院更多>>
相关期刊：《生物化学与生物物理进展》《生物技术通讯》《南方医科大学学报》《军事医学》更多>>
相关主题：泛素化修饰反向PCR基因突变体慢病毒介导更多>>
相关领域：生物学医药卫生更多>>
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慢病毒介导雌激素受体β在乳腺癌细胞中的高表达抑制上皮细胞间质转化相关基因的表达被引量：1
《生物技术通讯》2013年第5期624-627,共4页李玮妮 陈立涵 程龙 付洁 林亚红 刘婕 张浩 叶棋浓 
国家重点基础研究发展计划(2011CB504200);北京市自然科学基金(7112101)
目的:建立稳定高表达雌激素受体β(ERβ)蛋白表达的乳腺癌ZR75-1细胞株,检测其对上皮细胞间质转化(EMT)相关基因的影响。方法:将编码人ERβ的cDNA序列插入慢病毒表达载体pCDH-EF1-MCS-T2A-Puro,将其与慢病毒包装辅助质粒共转染293T细胞...
关键词：上皮细胞间质转化 雌激素受体 乳腺癌 
一种快速构建基因多个点突变体方法的建立被引量：1
《生物化学与生物物理进展》2013年第7期678-685,共8页陈立涵 李玮妮 张浩 程龙 叶棋浓 
北京市自然科学基金(7112101);国家重点基础研究发展计划(973)(2011CB504200)资助项目~~
蛋白质内部多个位点的翻译后修饰在基因的功能调节过程中发挥重要作用,基因的点突变体在其结构和功能研究中发挥非常关键的作用,因此,高效、快速构建基因的多个点突变体在基因的功能研究中意义重大.本研究在建立了对目的基因进行高效准...
关键词：反向PCR SRrp53 多位点突变 
组蛋白酵母双杂交诱饵载体的构建及其自激活作用检测
《生物技术通讯》2013年第2期165-168,共4页李玮妮 李法曾 张浩 陈立涵 程龙 徐小洁 刘婕 叶棋浓 
国家重点基础研究发展计划(2011CB504200);北京市自然科学基金(7112101)
目的:构建组蛋白H2A、H2B、H3、H4的酵母双杂交诱饵载体,检测其在酵母细胞中的表达和自激活活性,为应用酵母双杂交系统筛选与组蛋白相互作用的蛋白奠定基础。方法:扩增H2A、H2B、H3、H4蛋白基因编码区cDNA序列,克隆至酵母表达载体pGBK-T...
关键词：组蛋白 酵母双杂交 表观遗传 
慢病毒介导的敲低UBC9表达抑制ERβ类泛素化修饰水平被引量：3
《军事医学》2013年第3期187-190,共4页李玮妮 陈立涵 程龙 徐小洁 付洁 关鑫 刘婕 张浩 叶棋浓 
北京市自然科学基金资助项目(7112101);国家973计划资助项目(2011CB504200)
目的建立稳定敲低UBC9蛋白表达的293T细胞株,检测其对雌激素受体β(ERβ)类泛素化修饰水平的调节作用。方法构建4条针对人UBC9基因的慢病毒短发夹RNA(shRNA)的干扰载体,将其与慢病毒包装辅助质粒共转染293T细胞后,收集病毒上清,感染293...
关键词：慢病毒属 UBC9 ERΒ 类泛素化修饰 RNA干扰 
带绿色荧光蛋白标签的人细胞分裂周期蛋白25同源蛋白的真核表达及其生物学功能研究被引量：2
《生物技术通讯》2012年第2期162-165,共4页吕锦晶 范忠义 徐小洁 张浩 丁丽华 程龙 蒋凯 杜楠 宋良文 徐天昊 叶棋浓 
国家自然科学基金(30870499);北京市自然科学基金(7112101)
目的:构建带增强型绿色荧光蛋白(EGFP)标签的人细胞分裂周期蛋白25同源蛋白C(cdc25c)基因的真核表达载体pEGFP-cdc25c,并检测其在人胚肾293T细胞中的表达定位情况及生物学功能。方法:采用PCR技术从实验室已有质粒中扩增人cdc25c基因,并...
关键词：人细胞分裂周期蛋白25同源蛋白C 真核表达 显性负性作用 细胞周期 
SUMO-2/3与孕激素受体的共价结合及其对该受体转录活性的调节被引量：2
《南方医科大学学报》2011年第9期1493-1497,共5页韩白玉 李法曾 程龙 徐小洁 蒋凯 付洁 韩永健 吕朝晖 窦京涛 张浩 叶棋浓 
国家自然科学基金(30670439);北京市自然科学基金(7112101)~~
目的研究B型孕激素受体(progesterone receptor B type;PRB)是否能被SUMO-2、SUMO-3类泛素化修饰,并探讨这种修饰对孕激素受体转录活性的影响。方法以人的MCF-7 cDNA为模板进行PCR反应,扩增出SUMO-2、SUMO-3的cDNA,构建真核表达载体pcDN...
关键词：SUMO-2 SUMO-3 PRB 转录活性 类泛素化修饰 
运用新型的反向PCR策略高效构建基因的点突变体被引量：3
《生物化学与生物物理进展》2011年第4期378-382,共5页程龙 韩白玉 侯莎 韩永健 徐小洁 蒋凯 李法曾 杨智洪 窦京涛 吕朝晖 张浩 叶棋浓 
国家自然科学基金(30800205);军队医药卫生杰出人才基金(06J021);"重大新药创制"科技重大专项(2009ZX09301-002);北京市自然科学基金(7112101)资助项目~~
基因的点突变体在其结构和功能研究中发挥非常关键的作用,如何高效、经济地构建基因点突变体是许多分子生物学研究遇到的棘手问题.以PIAS3点突变体的构建为对象,设计了新型的以反向PCR为基础的点突变构建流程,获得的点突变体质粒经测序...
关键词：反向PCR PIAS3 点突变 
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