国家高技术研究发展计划(2001AA215361)

作品数:6被引量:19H指数:3
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相关机构:第四军医大学西京医院中国人民解放军海军总医院广州军区广州总医院更多>>
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大容量人源噬菌体抗体库的构建被引量:9
《中国免疫学杂志》2006年第5期463-466,共4页陈宇萍 张国民 乔媛媛 王刚 刘玉峰 化冰 王琰 
国家863计划(2001AA215361);博士后基金(2004)资助
目的:构建大容量易于改造成Diabody的噬菌体单链抗体库,筛选人源性抗体。方法:从正常成人外周血和新生儿脐血中分离淋巴细胞提取RNA,经RT-PCR扩增轻重链可变区基因(VL和VH),通过重叠PCR(over-lapPCR)将VL和VH拼接成单链抗体(ScFv)基因(...
关键词:噬菌体展示 抗体库 Cre重组 单链抗体 
实验室条件下人角质形成细胞的培养技术(英文)被引量:4
《中国临床康复》2006年第1期180-182,共3页卢宁 朱平 刘玉峰 王刚 张海龙 赵小东 
国家高技术研究发展计划(2001AA215361)~~
背景:随着角质形成细胞体外培养技术的建立和发展,皮肤不再被认为是单纯的生理屏障,其在机体免疫和内分泌等方面尤为重要。目的:探讨实验室条件下人体角质形成细胞的培养技术,为角质形成细胞的多方面应用提供可靠的细胞来源。设计:开放...
关键词:角质形成细胞 细胞培养 连续传代培养 实验室 
人源性抗角蛋白单链抗体在巴氏毕赤酵母的分泌表达被引量:2
《中国免疫学杂志》2005年第9期659-662,共4页樊建勇 王刚 夏汝山 陈宇萍 高天文 刘玉峰 
国家863计划(2001AA215361);国家自然科学基金(30371650)资助项目
目的:用巴氏毕赤酵母表达人源性抗角蛋白单链抗体。方法:从已构建好的质粒p3MHScFv中亚克隆目的片段ScFv并插入酵母表达载体pPIC9K,构建成重组质粒pPIC9KScFv,并测序鉴定。通过电转将重组质粒pPIC9KScFv整合到巴氏毕赤酵母菌GS115的染...
关键词:单链抗体 角蛋白 毕赤酵母 分泌表达 
对一株基因工程人抗角蛋白抗体的免疫学鉴定被引量:1
《中华皮肤科杂志》2005年第4期211-213,共3页卢宁 王刚 刘玉峰 李承新 李巍 张海龙 赵小东 
国家863计划(2001AA215361);国家自然科学基金(30371650)
目的对1株基因工程人抗角蛋白抗体识别抗原的特性进行鉴定。方法利用从噬菌体抗体库中筛选到的特异表达抗角蛋白的Fab片段的质粒转化大肠杆菌,IPTG诱导表达出Fab片段,用ELISA鉴定抗原结合活性和特异性,用蛋白免疫印迹和竞争抑制性ELISA...
关键词:抗角蛋白抗体 基因工程 免疫学鉴定 ELISA检测 FAB片段 噬菌体抗体库 抗原结合活性 蛋白免疫印迹 相对分子质量 临床应用前景 免疫学特性 生物学活性 特异性 大肠杆菌 质粒转化 特异表达 识别抗原 诱导表达 蛋白组分 抑制性 
基因工程人抗角蛋白抗体在角质形成细胞内的反应定位
《中国麻风皮肤病杂志》2005年第4期249-251,共3页卢宁 王刚 刘玉峰 李承新 李巍 张海龙 赵小东 
国家863计划(No.2001AA215361);国家自然科学基金(No.30371650)
目的:探索一株基因工程人源性抗角蛋白Fab抗体在培养的角质形成细胞内的反应定位。方法:利用从噬菌体抗体库中筛选到的特异表达抗角蛋白Fab片段的质粒转化大肠杆菌,IPTG诱导表达出Fab抗体,纯化鉴定后将该抗体作用于培养的人角质形成细胞...
关键词:基因工程 反应定位 细胞内 抗角蛋白抗体 FAB抗体 人角质形成细胞 噬菌体抗体库 抗HBSAG Fab片段 细胞染色法 其临床应用 人源性 大肠杆菌 质粒转化 特异表达 定位方法 诱导表达 纯化鉴定 微镜观察 免疫荧光 作用时间 不同浓度 
高亲和力抗角蛋白人抗体的基因工程制备被引量:3
《中华皮肤科杂志》2003年第10期559-561,共3页王刚 王琰 刘玉峰 
国家863计划项目(2001AA215361);全军医学科研"十五"基金课题(01Q029)
目的 制备亲和力高、性能良好的人源性抗角蛋白抗体。方法 以人表皮角蛋白为抗原从噬菌体抗体库中克隆特异性抗角蛋白抗体,采用基因随机点突变和链替换(chain-shuffing)技术对所获抗体进行亲和力成熟,并对其生物学性能进行一系列鉴定。...
关键词:亲和力 抗角蛋白人抗体 基因工程 制备方法 
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