国家自然科学基金(20206014)

作品数：13被引量：44H指数：4
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相关作者：沈忠耀于慧敏史悦孙旭东罗晖更多>>
相关机构：清华大学北京科技大学北京化工大学更多>>
相关期刊：《膜科学与技术》《化工学报》《分析试验室》《清华大学学报（自然科学版）》更多>>
相关主题：丙烯酰胺腈水合酶重组大肠杆菌微生物转化丙烯腈更多>>
相关领域：化学工程生物学轻工技术与工程理学更多>>
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诺卡氏菌腈水合酶突变基因在重组大肠杆菌中的高活性表达被引量：2
《清华大学学报（自然科学版）》2007年第12期2176-2179,共4页史悦 于慧敏 罗晖 田卓玲 沈忠耀 
国家自然科学基金资助项目(20206014);全国优秀博士学位论文作者专项资金资助项目(200345)
为了提高腈水合酶基因的重组表达水平,提出了3种基因策略:在重组大肠杆菌中共表达激活子序列、在重组毕赤酵母中表达以及对α亚基的起始密码子进行定点突变。结果表明:对α亚基的起始密码子进行定点突变的基因策略为最佳方案,突变后的...
关键词：腈水合酶 重组大肠杆菌 重组毕赤酵母 定点突变 比酶活 
产腈水解酶菌株的诱变及培养优化被引量：4
《生物加工过程》2007年第1期41-44,共4页王铁钢 罗晖 于慧敏 杨慧芬 沈忠耀 
国家自然科学基金资助项目(20206014);全国优秀博士论文作者专项资助项目(200345)
对实验室保存的1株产腈水解酶的Rhodococcus rhodochrous菌株采用氯化锂进行诱变处理,筛选得到了1株产酶活力较高的菌株tg1-A6。经过优化得到培养基的配方为(g.L-1):葡萄糖10,谷氨酸钠10,酵母膏3,己内酰胺7,MgSO40.5,K2HPO40.75,KH2PO40...
关键词：腈水解酶 诱变 优化 
气相色谱法快速定量检测丙烯腈的生物催化产物被引量：7
《分析试验室》2007年第1期54-57,共4页王铁钢 罗晖 朱燕勤 于慧敏 杨慧芬 沈忠耀 
国家自然科学基金(20206014);全国优秀博士论文作者专项(200345)项目资助
利用微生物催化丙烯腈生产丙烯酰胺在工业上已经得到了广泛的应用。生产中反应液同时含有底物丙烯腈、产物丙烯酰胺以及副产物丙烯酸。为了控制产品质量,需快速定量检测反应液中各组分。采用毛细管柱PEG-20M(30 m×0.25 mm i.d.,2μm),...
关键词：气相色谱法 快速定量检测 丙烯腈 丙烯酸 丙烯酰胺 
六级连续化膜生物反应工艺在丙烯酰胺生产中的应用研究被引量：1
《现代化工》2006年第7期45-48,共4页孙旭东 于慧敏 罗晖 沈忠耀 
国家自然科学基金青年基金资助项目(20206014);全国百篇优秀博士学位论文作者专项(200345)资助
以自由细胞替代固定化细胞,成功设计了六级连续化中空纤维膜生物反应器新工艺,应用于丙烯酰胺的微生物转化过程,并对其操作工艺和可行性进行了研究。结果表明:在15℃下,该六级连续化过程稳定运行80 h时,丙烯腈的转化率达99.9%以上,丙烯...
关键词：自由细胞 丙烯酰胺 微生物连续转化 中空纤维膜生物反应器 
诺卡氏菌酰胺酶基因的分子克隆及在大肠杆菌中表达的初步研究被引量：1
《生物工程学报》2006年第4期682-685,共4页许幂 于慧敏 谭天伟 朱燕勤 沈忠耀 
国家自然科学基金资助项目(No.20206014)。~~
酰胺酶是一种重要的工业酶。利用生物信息学手段,在和已知酰胺酶基因序列分析比对的基础上,首次从Ncordiasp.YS-2002中成功地克隆得到酰胺酶基因ami,并对其基因序列及氨基酸序列的性质进行了分析。结果表明,所得酰胺酶基因ami片段大小共...
关键词：诺卡氏菌 酰胺酶基因 分子克隆 
折射法与定时进样气相色谱法快速测定丙烯酰胺和丙烯腈
《分析化学》2005年第12期1737-1739,共3页孙旭东 于慧敏 史悦 沈忠耀 
国家自然科学基金青年基金(20206014);全国优秀博士学位论文作者专项资金资助项目(200345)
为了满足游离细胞催化、多级膜生物反应器连续转化生产丙烯酰胺的新工艺对丙烯酰胺和丙烯腈浓度进行监控的需要,分别提出了采用阿贝折射仪快速分析丙烯酰胺和定时进样气相色谱外标法快速分析丙烯腈浓度的新方法。与传统的丙烯酰胺和丙...
关键词：丙烯酰胺 丙烯腈 折射法 定时进样气相色谱法 
产腈水合酶重组大肠杆菌的质粒稳定性研究被引量：12
《中国生物工程杂志》2005年第8期70-75,共6页史悦 于慧敏 田卓玲 沈忠耀 
国家自然科学基金青年基金资助项目(20206014);全国百篇优秀博士学位论文作者专项(200345)
成功构建了腈水合酶(nitrile hydratase,NHase)高表达的重组大肠杆菌E.coliBL21(DE3)/pETNHM(Kanr),研究了重组质粒pETNHM在重组菌株中的质粒稳定性。结果表明,pETNHM具有较好的结构稳定性,连续传代60代后质粒的基因序列没有明显缺失,...
关键词：腈水合酶 重组大肠杆茵 质粒稳定性 分离不稳定性 质粒拷贝数 重组大肠杆菌 稳定性研究 大肠杆菌E.coli 琼脂糖凝胶电泳 重组菌株 
诺卡氏菌腈水合酶基因在重组毕赤酵母中的表达被引量：1
《微生物学报》2005年第6期959-962,共4页于慧敏 史悦 田卓玲 温斐 沈忠耀 
国家自然科学基金青年基金项目(20206014);全国百篇优秀博士学位论文作者专项(200345)~~
为从基因水平上改造腈水合酶,进行了诺卡氏菌腈水合酶基因的外源表达研究。在重组大肠杆菌表达系统内,腈水合酶的α亚基几乎不能正常表达,在重组E.coliBL21(DE3)(pET32aNHBAX)中,腈水合酶活性仅为0.04Umg。构建重组毕赤酵母表达质粒pPIC...
关键词：诺卡氏菌 腈水合酶 外源表达 大肠杆菌 毕赤酵母 
腈水合酶基因克隆与调控表达的研究进展被引量：4
《中国生物工程杂志》2004年第7期34-39,共6页史悦 于慧敏 孙旭东 田卓玲 沈忠耀 
国家自然科学基金资助项目 (2 0 2 0 60 14 )
微生物腈水合酶作为新型生物催化剂得到日益广泛的应用 ,但野生菌株本身存在的酶稳定性差等问题制约了这一绿色工艺的发展 ,基因工程菌为解决这个难题开辟了新的思路。总结了各种菌株中腈水合酶的序列研究进展 ,虽然基因序列和蛋白序列...
关键词：丙烯酰胺 腈水合酶 克隆 表达 化工原料 基因工程菌 
生物信息学在工业生物催化研究中的应用被引量：2
《生物工程学报》2004年第3期325-331,共7页于慧敏 罗晖 史悦 孙旭东 沈忠耀 
国家自然科学基金面上项目 (No .2 0 2 0 60 14 ) ;全国优秀博士学位论文作者专项资金资助项目~~
随着石油等不可再生资源的日益减少以及环境污染问题的日益严重 ,应用工业生物催化技术改造或取代传统化工工艺已经成为新世纪化学工业可持续发展的研究热点。工业生物催化技术的研究对象是生物催化剂及其催化过程。近来 ,利用生物信息...
关键词：工业生物催化 生物催化剂 生物信息学 
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