山东省自然科学基金(Y2005D14)

作品数：12被引量：29H指数：1
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蛋白反式剪接的人/猪嵌合体BDD-FVIII及其分泌的改善
《药学学报》2010年第10期1232-1238,共7页朱甫祥 杨树德 刘泽隆 缪静 屈慧鸽 迟晓艳 
山东省自然科学基金资助项目(Y2005D14);烟台市科技计划项目(2008152);教育部留学回国人员科研启动基金项目(2007[1108]);鲁东大学科研基金项目(LZ20083305)
本研究采用具有促分泌作用的猪FVIII分子的A1和A3区,替换人FVIII分子的相应结构,构建人/猪嵌合体BDD-FVIII(BDD-hpFVIII),利用Ssp DnaB intein的蛋白质反式剪接功能,双载体培养的COS-7细胞瞬时共转嵌合体BDD-hpFVIII基因。免疫印迹法观...
关键词：嵌合体BDD—FVHI 分泌 内含肽 蛋白质反式剪接 
糖基化修饰促进内含肽剪接的凝血因子Ⅷ的分泌和活性被引量：3
《中华医学杂志》2010年第36期2570-2574,共5页朱甫祥 刘泽隆 缪静 屈慧鸽 迟晓艳 
基金项目：教育部留学回国人员科研启动基金（20071108）;山东省自然科学基金（Y2005D14）;烟台市科技发展计划基金（2008152）
目的 观察糖基化修饰对内含肽剪接的B区缺失型凝血因子Ⅷ（BDD-FⅧ）分泌的影响.方法 将含有6个潜在的天冬酰胺糖基化位点（N6）的FⅧ的B区226个氨基酸引入BDD-FⅧ重链,用双载体转融合内含肽的此重链和轻链基因（N6HCIntN和IntCLC）至...
关键词：因子Ⅷ 糖基化 蛋白质剪接 内含肽 
vWF-△Pro改善基于蛋白质剪接的双载体BDD-FⅧ基因转移被引量：6
《中国生物化学与分子生物学报》2010年第8期720-726,共7页朱甫祥 杨树德 刘泽隆 屈慧鸽 迟晓艳 
山东省自然科学基金(NoY2005D14);教育部留学回国人员科研启动基金(No2007[1108]);烟台市科技计划项目(No2008152);鲁东大学学科建设经费资助项目~~
多聚体von Willebrand因子(vWF)的功能之一是保护凝血Ⅷ因子(FⅧ)免受蛋白水解引起的快速清除.前肽缺失突变体vWF(vWF-ΔPro)不能形成多聚体,但可以结合FⅧ蛋白.为探讨vWF-ΔPro对基于蛋白质反式剪接作用介导的双载体转FⅧ基因后连接的...
关键词：von WILLEBRAND因子 BDD-FⅧ 转基因 内含肽 蛋白质反式剪接 
vWF促进intein剪接的BDD-FVⅢ的分泌和活性被引量：3
《药学学报》2010年第5期595-600,共6页朱甫祥 杨树德 刘泽隆 缪静 屈慧鸽 迟晓艳 
山东省自然科学基金资助项目(Y2005D14);烟台市科技计划项目(2008152);教育部留学回国人员科研启动基金项目(20071108);鲁东大学学科建设经费资助项目
vWF是由巨核细胞和血管内皮细胞合成的糖蛋白,其主要功能之一为凝血VIII因子(FVIII)的载体,防止后者被血浆酶降解。作者最近的工作证明intein可应用于双载体转移B结构域缺失型FVIII(BDD-FVIII)基因,通过翻译后的蛋白质反式剪接形成完整...
关键词：von WILLEBRAND因子 凝血VIII因子 共转染 分泌 INTEIN 蛋白质反式剪接作用 
基于蛋白质剪接的BHK细胞Ser^(660)前断裂的CFTR基因转移
《中国生物化学与分子生物学报》2010年第5期429-435,共7页朱甫祥 刘泽隆 缪静 屈慧鸽 迟晓艳 
山东省自然科学基金(No.Y2005D14);烟台市科技发展计划(No.2008152);教育部留学回国人员科研启动基金(No.20071108);鲁东大学学科建设经费资助项目~~
利用内含肽(intein)的蛋白质反式剪接技术,研究双载体真核细胞转囊性纤维化跨膜电导调节体(CFTR)基因,通过翻译后连接成为完整的功能性CFTR蛋白.应用基因重组技术,将人CFTRcDNA于剪接反应所需保守残基Ser660前断裂为N端和C端两部分,分别...
关键词：蛋白质反式剪接 囊性纤维化跨膜电导调节体 基因转移 膜片钳 
L303E/F309S突变促进细胞分泌内含肽连接的B区缺失型凝血VIII因子被引量：2
《中国细胞生物学学报》2010年第4期575-582,共8页朱甫祥 杨树德 刘泽隆 缪静 屈慧鸽 迟晓艳 
山东省自然科学基金(No.Y2005D14);烟台市科技计划项目(No.2008152);教育部留学回国人员科研启动基金(No.20071 108);鲁东大学学科建设项目资助项目~~
凝血VⅢ因子(FVⅢ)尽管与凝血V因子具有相似的结构,但其分泌的低效性不仅限制了重组产品在甲型血友病患者中的广泛应用,也困扰基于转FVⅢ基因的基因治疗。为了提高FVⅢ的分泌效率,在我们以前用内含肽(intein)的蛋白质剪接功能介导的双...
关键词：B区缺失型FVⅢ 突变重链 分泌 内含肽 蛋白质剪接 
双Intein介导3片段vWF的反式剪接被引量：3
《中国生物化学与分子生物学报》2010年第2期157-163,共7页朱甫祥 郭猛 刘泽隆 屈慧鸽 迟晓艳 
山东省自然科学基金(No.Y2005D14);教育部留学回国人员科研启动基金(No.2007-1108);烟台市科技计划项目(No.2008152);鲁东大学学科建设经费资助项目~~
von Willebrand因子(vWF)基因突变导致血管性血友病(VWD),由于其基因过大在基因治疗研究中难以为多数病毒载体携带.利用双内含肽(intein)的蛋白质反式剪接功能研究断裂成3段的vWF基因分别表达后在蛋白水平的连接,旨在为vWF基因的3载体...
关键词：内含肽 蛋白质反式剪接 von WILLEBRAND因子 
双载体断裂CFTR基因转移及翻译后的连接和功能被引量：3
《药学学报》2010年第1期60-65,共6页朱甫祥 刘泽隆 屈慧鸽 迟晓艳 
山东省自然科学基金资助项目(Y2005D14);烟台市科技计划项目(2008152);教育部留学回国人员科研启动基金项目;鲁东大学学科建设经费资助项目
囊性纤维化跨膜电导调节体(CFTR)基因突变导致一种常染色体隐性遗传病囊性纤维化(CF),利用腺辅助病毒(AAV)载体转运CFTR基因的基因疗法受到AAV载体容量的限制。本文采用intein的蛋白质反式剪接技术,以双载体转运CFTR基因,研究了于其调...
关键词：蛋白质反式剪接 囊性纤维化跨膜电导调节体基因 氯离子通道 双载体系统 
基于蛋白质反式剪接的双载体凝血Ⅷ因子基因转移被引量：5
《中国科学（C辑）》2009年第8期746-754,共9页朱甫祥 刘泽隆 迟晓艳 屈慧鸽 刘相钦 
山东省自然科学基金(批准号:Y2005D14);烟台市科技计划(批准号:2008152);教育部留学回国人员科研启动基金;鲁东大学科研启动经费资助项目
以intein的蛋白反式剪接为工具,研究了运用双载体的真核细胞凝血Ⅷ因子（FⅧ）基因转移,通过翻译后剪接得到完整的功能性FⅧ蛋白.将B结构域大部分缺失（Δ761~1639）的人功能性FⅧ（BDD-FⅧ）cDNA于剪接所需保守残基Ser1657前断裂为重...
关键词：INTEIN 蛋白质反式剪接 凝血Ⅷ因子 双载体基因转移 
大肠杆菌BL21(DE3)中DnaE intein介导ABCA1蛋白的连接
《微生物学报》2009年第12期1601-1606,共6页朱甫祥 缪静 屈慧鸽 迟晓艳 
山东省自然科学基金(Y2005D14);烟台市科技计划项目(2008152);教育部留学回国人员科研启动基金(20071108);鲁东大学学科建设经费~~
【目的】利用SspDnaEintein的蛋白质反式剪接技术研究在大肠杆菌中对ABCA1基因表达产物的连接作用。【方法】将ABCA1的cDNA于满足剪接所需的保守性氨基酸Cys978密码子前断裂为N端和C端两部分,分别与天然存在的反式作用SspDnaEintein的12...
关键词：DnaE INTEIN 蛋白质反式剪接 ABCA1 连接 
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