国家自然科学基金(30100157)

作品数:9被引量:29H指数:4
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乙型肝炎病毒靶向核糖核酸酶及其突变体的原核表达和活性分析
《生物技术通讯》2008年第2期194-196,共3页李英辉 黄豫晓 赵亚 刘军 薛采芳 
国家自然科学基金项目(30100157);全军医药卫生科研基金项目(01MA184);第四军医大学创新工程(CX99005)
目的:研究原核表达的乙型肝炎病毒(HBV)靶向核糖核酸酶(RNase)及其突变体(点突变失去RNase活性)的活性。方法:将构建的靶向核糖核酸酶及其突变体基因克隆入原核表达载体pET32a(+),转化大肠杆菌BL21(DE3),以IPTG诱导融合蛋白(HBV核心蛋...
关键词:靶向核糖核酸酶 原核表达 RNase活性 乙型肝炎病毒 
HBV靶向核糖核酸酶基因的原核表达和纯化及多克隆抗体的制备被引量:8
《医学研究生学报》2005年第4期295-297,301,共4页李英辉 刘军 赵亚 薛采芳 丁劲 黄豫晓 
国家自然科学基金资助项目(批准号:30100157)
目的:旨在获得HBV靶向核糖核酸酶,并制备其兔的多克隆抗体。方法:将构建好的HBV靶向核糖核酸酶基因克隆入原核表达载体pET32a(+),转化入大肠杆菌BL21(DE3),以IPTG诱导6×His融合蛋白的表达并经Ni2+亲和层析纯化。通过SDS PAGE和Westernb...
关键词:HBV靶向核糖核酸酶 原核表达 多克隆抗体 
带有蛋白转导域的靶向核糖核酸酶对乙型肝炎病毒复制的影响被引量:1
《中华肝脏病杂志》2004年第6期377-377,共1页刘军 丁劲 薛采芳 李英辉 宫卫东 赵亚 黄豫晓 
国家自然科学基金(30100157);军队医药卫生基金(01MA184);第四军医大学创新工程(CX99001)
究表达并纯化了带有蛋白转导域HIV-TAT的靶向核糖核酸酶,将其加入到2.2.15细胞的培养上清液中,观察其对乙型肝炎病毒(HBV)复制的影响及对细胞有无毒性,以便为靶向核糖核酸酶用于临床治疗HBV感染奠定基础.
关键词:蛋白转导 靶向核糖核酸酶 乙型肝炎 病毒复制 重组蛋白 
重组腺病毒介导的HBV核心蛋白和hEDN融合蛋白基因在小鼠肝脏的表达被引量:6
《第四军医大学学报》2004年第12期1073-1076,共4页赵亚 刘军 宫卫东 李英辉 丁劲 薛采芳 
国家自然科学基金资助项目 (30 1 0 0 1 57) ;全军医药卫生科研基金资助项目 (0 1MA1 84)
目的 :使HBc hEDN基因重组腺病毒载体 (AdHBc hEDN)及其对照载体AdhEDN在小鼠肝脏获得表达 .方法 :将体外扩增获得的高滴度AdHBc hEDN和AdhEDN经尾静脉注射感染小鼠 ,并用免疫组化的方法检测AdHBc hEDN和Ad hEDN在小鼠肝脏中的表达 .结...
关键词:肝炎病毒 乙型 重组融合蛋白质类 腺病毒科 重组 遗传 免疫组织化学 
靶向核糖核酸酶对乙型肝炎病毒复制的作用
《中华肝脏病杂志》2004年第3期179-179,共1页刘军 李英辉 薛采芳 丁劲 宫卫东 赵亚 黄豫晓 
国家自然科学基金(30100157);军队医药卫生基金(01MA184)
通过定量检测上清液中的乙型肝炎e抗原(HBeAg)和乙型肝炎病毒脱氧核糖核酸(HBV DNA),进一步研究靶向核糖核酸酶对HBV复制的影响.
关键词:靶向核糖核酸酶 病毒复制 检测 乙型肝炎病毒 聚合酶链反应 
HBV-TR重组腺病毒载体的构建被引量:5
《第四军医大学学报》2004年第4期321-324,共4页赵亚 宫卫东 刘军 李英辉 丁劲 薛采芳 
国家自然科学基金项目 (30 1 0 0 1 57) ;全军医药卫生科研基金项目 (0 1MA1 84) ;陕西省自然科学基金项目 (2 0 0 2C2 2 8)
目的 :构建乙肝病毒靶向核糖核酸酶 (HBVtargetedribonuclease,TR)基因的重组腺病毒载体 .方法 :将HBV TR基因及其对照组基因分别克隆入质粒载体pDC31 6得到pDC31 6 /TR等穿梭质粒 ,然后将所得的穿梭质粒和辅助质粒pBHGlox(delta)E1 ,3...
关键词:肝炎病毒 乙型 靶向核糖核酸酶 腺病毒载体 
有linker插入的靶向核糖核酸酶抑制乙肝病毒复制被引量:2
《第四军医大学学报》2003年第21期1956-1959,共4页宫卫东 刘军 丁劲 赵亚 李英辉 薛采芳 
国家自然科学基金 (30 1 0 0 1 57)
目的 :构建人嗜酸性粒细胞来源的神经毒素(hEDN )与乙肝病毒核心蛋白 (HBVc)之间插入有linker(Gly4Ser) 3 的融合真核表达载体 (该融合蛋白即为靶向核糖核酸酶 ) ,以优化分子折叠 ,并将其应用于抑制HBV复制的体外研究 .方法 :以第四军...
关键词:乙肝病毒 LINKER 核衣壳导向的病毒灭活 靶向核糖核酸酶 抑制效应 
靶向核糖核酸酶在体外抑制乙型肝炎病毒复制的研究被引量:3
《中华微生物学和免疫学杂志》2003年第6期484-488,共5页李英辉 刘军 薛采芳 丁劲 宫卫东 赵亚 
国家自然科学基金资助项目 ( 3 0 10 0 15 7);全军医药卫生科研基金 ( 0 1MA184);第四军医大学创新工程项目 (CX990 0 5 )
目的 观察HBV靶向核糖核酸酶 (targetedribonuclease,TR)的体外抗病毒作用。方法 将包含HBV核心蛋白 (HBVc)和人类嗜酸性粒细胞来源的神经毒素 (hEDN)编码基因克隆入pcDNA3.1(- ) ,构建HBVTR重组真核表达载体p TR。构建包含HBV核心蛋...
关键词:乙型肝炎病毒 靶向核糖核酸酶 体外抗病毒作用 基因转染 
TAT-乙肝病毒靶向核糖核酸酶融合蛋白原核载体的构建及表达被引量:13
《细胞与分子免疫学杂志》2003年第1期49-51,共3页丁劲 刘军 薛采芳 李英辉 宫卫东 
国家自然科学基金资助(No.30100157);全军医药卫生科研基金资助(No.01MA184);第四军医大学创新工程资助(No.CX99005)
目的:构建蛋白质转导结构域(protein transduction domain,PTD)TAT和乙肝病毒靶向核糖核酸酶(targeted ribonuclease,TR)融合蛋白的原核表达载体,并在大肠杆菌中表达。方法:将已构建的乙肝病毒靶向核糖核酸酶基因、乙肝病毒核心蛋白(HBV...
关键词:TAT-乙肝病毒 靶向核糖核酸酶 融合蛋白 原核载体 构建 
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