原核载体

作品数:23被引量:43H指数:3
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相关机构:第四军医大学中国药科大学中国动物疫病预防控制中心洛阳现代生物技术研究院有限公司更多>>
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重金属镉抗性基因czcA原核载体构建与鉴定
《陕西农业科学》2023年第7期8-10,22,共4页窦敏娜 
首先,将含有强抗镉czcA基因的重组质粒pGM-T载体进行PCR扩增和鉴定,其次,将带有双酶切位点的czcA基因与pGEX-4T-2载体构建,转化于E.coli BL21 DE3中,最后,经PCR鉴定和测序检测均表明试验成功,为下一步czcA基因片段进行诱导融合蛋白的表...
关键词: czcA pGEX-4T-2 构建 
小反刍兽疫病毒核衣壳蛋白抗原性与特异性的比较被引量:3
《畜牧与兽医》2020年第5期59-63,共5页孙雨 宋晓晖 肖颖 李秀梅 王睿男 吕园园 蒋菲 辛盛鹏 杨林 王传彬 
国家重点计划研发项目(2016YFD0500901);现代农业人才支撑计划(2130106-024)。
为筛选建立小反刍兽疫病毒N蛋白双抗原夹心ELISA抗体检测方法的抗原原料,本研究通过优化大肠杆菌密码子、优化蛋白表达与纯化条件等方法,分别在pET-30a与pET-32a两个不同原核表达载体中成功获得了可溶性的小反刍兽疫核衣壳蛋白(N)。分...
关键词:小反刍兽疫 不同原核载体 核衣壳蛋白 抗原性 特异性 
原核载体表达的小反刍兽疫病毒N蛋白的保存期与相关抗原性、特异性研究被引量:1
《中国草食动物科学》2020年第1期27-32,共6页孙雨 宋晓晖 肖颖 李秀梅 王睿男 吕园园 蒋菲 李晓霞 任雪建 王传彬 
国家重点计划研发项目(2016YFD0500901);现代农业人才支撑计划(2130106-024)
为明确使用原核表达载体pET-32a表达纯化的小反刍兽疫病毒核衣壳蛋白(N)的最佳保存期,检测其相关抗原性与特异性,通过优化N抗原序列的密码子和蛋白表达纯化条件,在大肠杆菌表达系统中成功获得了3批次高效表达的小反刍兽疫病毒可溶性重组...
关键词:原核载体 小反刍兽疫病毒 N蛋白 保存期 抗原性 特异性 
腺苷脱氨酶三种原核表达载体的构建及蛋白表达
《国际检验医学杂志》2019年第3期281-284,289,共5页韩丽乔 张露 林海标 黄小亭 吴新忠 黄宪章 庄俊华 
国家自然科学青年基金(81601861);中国博士后科学基金(2016M602452);广东省中医院院内专项(2016KT1435)
目的利用分子克隆技术表达腺苷脱氨酶蛋白。方法从人白细胞中提取总RNA,逆转录为cDNA,再以其为模板,采用聚合酶链式反应(PCR)技术扩增腺苷脱氨酶基因,然后将目的基因连接到3种原核质粒pET-28b、pET-32a(+)和pHSIE中,再将测序完全正确的...
关键词:腺苷脱氨酶 ADA 原核载体 pET-28b pET-32a pHSIE 蛋白表达 
粪肠球菌信息素CPD克隆、原核载体构建及表达
《世界最新医学信息文摘》2019年第13期111-111,202,共2页谭强来 曾臻 
厦门市科技计划项目(3502Z20154077);福建省中青年教师教育科研项目(JAT160585);厦门医学院自然科学研究项目(K2015-07;K2015-09)
目的克隆并原核表达粪肠球菌信息素CPD,为特异性抗体制备及致病机制探索奠定基础。方法 CPD基因克隆,经EcoRⅠ和XhoⅠ双酶切连接至pGEX-4T-1载体,测序验证,转化至E. coli BL21诱导表达,SDS-PAGE分析。结果成功克隆并构建CPD-pGEX-4T-1...
关键词:粪肠球菌 心内膜炎抗原 克隆 原核表达 
生长分化因子15基因的克隆及重组原核表达载体的构建
《安徽农学通报》2018年第11期13-15,共3页董艳敏 刘满宇 张文慧 张林波 
吉林省教育厅"十三五"科学技术项(2016-177)
为克隆人生长分化因子15基因,构建h GDF15基因的重组原核表达载体,为研究该基因的功能奠定实验基础,利用PCR技术克隆其基因序列,将其分别连接至p ET28a和p Cold I载体,构建重组p ET28a-h GDF15和p Cold I-h GDF15原核表达载体,并进行质...
关键词:人生长分化因子15 原核载体 
叶酸受体α原核载体的构建及表达被引量:3
《药物生物技术》2016年第1期26-29,共4页张梅 邱郑 邢黎军 强旭 张娟 王旻 
国家自然科学基金(No.81301902);江苏高校优势学科建设工程资助项目
PCR法扩增叶酸受体α基因片段,经NcoⅠ和EcoRⅠ双酶切后克隆到原核表达载体pet22b,并进行双酶切和测序鉴定;将测序正确的重组质粒通过Ca Cl2法转入BL21(DE3)表达菌株,IPTG诱导蛋白表达,镍柱亲和纯化,通过SDS-PAGE,Western blot和ELISA...
关键词:叶酸受体Α 构建 原核表达 蛋白鉴定 亲和力 构象 
人血管内皮生长因子A(VEGFA)的原核载体构建、蛋白表达及鉴定被引量:2
《昆明医科大学学报》2015年第6期31-34,共4页赵瑜 胡月新 卢敏南 焦扬 赵洪波 刘建军 
云南省应用基础研究基金资助项目(2012FB152)
目的克隆人VEGFA基因,与原核载体融合表达、纯化及其鉴定,并将其应用于肿瘤血管生长研究过程中.方法采用PCR方法扩增人VEGFA序列,将其克隆入p GEX-KG原核载体,获得p GEX-KG-h VEGFA重组质粒.将该质粒转化入E.coli菌株BL21(DE3),经IPTG...
关键词:VEGFA 原核载体 融合蛋白 亲和纯化 
毛冠鹿AIF-1原核载体的构建及表达
《南京师大学报(自然科学版)》2014年第2期85-90,95,共7页周楠楠 杨振 罗丽芸 宋菲 白敏 曹祥荣 
国家自然科学基金(30771172);国家基础科学人才培养基金(J1103507;J1210025)
从毛冠鹿睾丸cDNA文库中筛选出毛冠鹿AIF-1基因,对其进行生物信息学分析,设计引物克隆毛冠鹿AIF-1 cDNA,连入pMD19-T载体,测序正确后酶切,与表达载体pET-28a(+)连接,转化E.coli BL21(DE3),IPTG诱导表达,将诱导表达重组蛋白的菌体超声破...
关键词:毛冠鹿 AIF-1 原核表达 
E.coli O157:H7鞭毛蛋白H7抗原的表达纯化及抗血清的制备
《药物生物技术》2014年第3期199-203,共5页蔡冉 周洁 许桂丽 徐悦玥 潘英 李素芹 李越希 
国家传染病重大专项(No.2013ZX10004804-003);全军十二五重大项目(No.AWS11C001)
应用生物信息学分析工具对E.coli O157∶H7鞭毛蛋白H7抗原(flic基因)表位进行分析,筛选抗原表位较富集的片段;优化基因序列,使其适合在原核载体中表达并化学合成序列。构建重组质粒pGEX-4T-2-flic和pET28a(+)-flic,转化E.coli BL21(DE3)...
关键词:E.COLI O157∶H7 鞭毛蛋白H7抗原 原核载体 E.COLI BL21(DE3) Flic 
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