国家重点基础研究发展计划(2009CB118704)

作品数：17被引量：51H指数：5
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相关作者：简纪常吴灶和闫秀英谢吉国鲁义善更多>>
相关机构：广东海洋大学仲恺农业工程学院广东省水产经济动物病原生物学及流行病学重点实验室中国科学院更多>>
相关期刊：《Science China(Life Sciences)》《安徽农业科学》《水产学报》《海洋与湖沼》更多>>
相关主题：草鱼草鱼呼肠孤病毒IGM原核表达酵母双杂交更多>>
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草鱼NCCRP-1和IL-10的表达、抗体制备及组织病理变化被引量：2
《广东海洋大学学报》2021年第5期10-18,共9页陈静妮 代礼平 雷燕 胡海浩 黄鉴涛 简纪常 闫秀英 
国家自然科学基金(31602199);973项目(2009CB118704)。
【目的】制备草鱼(Ctenopharyngodon idella)非特异性细胞毒性细胞受体蛋白-1(NCCRP-1)和白细胞介素-10(IL-10)的抗血清,探讨重组NCCRP-1和IL-10免疫在草鱼抗病毒感染过程中肾脏和肠病理学变化及对NCCRP-1和IL-10表达的影响。【方法】应...
关键词：草鱼 非特异性细胞毒性细胞受体-1 白细胞介素-10 表达 多克隆抗体 组织病理学 
草鱼呼肠孤病毒096 vp4基因生物信息学分析及其在肾细胞中的表达被引量：1
《广东海洋大学学报》2015年第4期56-62,共7页闫秀英 郭定利 郑树城 王雅 谢吉国 简纪常 吴灶和 
国家973计划项目(2009CB118704)
克隆得一株新分离病毒草鱼呼肠孤病毒(GCRV)096的长为1 981 bp的vp4基因,分析该基因的生物信息及其编码蛋白的特性。生物信息学分析表明,同一基因型GCRV分离株vp4基因间的差异不大,但不同基因型GCRV分离株vp4基因间却存在很大的差异。GC...
关键词：草鱼呼肠孤病毒 VP4基因 生物信息学 真核表达 
草鱼呼肠孤病毒096 vp7基因生物信息学分析及其酵母表达载体的构建被引量：3
《广东海洋大学学报》2014年第6期31-37,共7页郑树城 谢吉国 王雅 蔡双虎 简纪常 吴灶和 闫秀英 
国家973计划项目(2009CB118704)
草鱼呼肠孤病毒(Grass carp reovirus,GCRV)是草鱼出血病的病原。从患病草鱼体内分离到一株草鱼呼肠孤病毒GCRV 096,经反转录PCR,克隆得GCRV 096长度为855 bp的vp7基因,并分析该基因编码蛋白的特性。结果表明,同一基因型分离株VP7蛋白...
关键词：草鱼呼肠孤病毒 VP7基因 生物信息学 酵母表达载体 
草鱼(Ctenopharyngodon idellus)呼肠孤病毒(GCRV)VP6相互作用蛋白的筛选被引量：2
《海洋与湖沼》2014年第6期1295-1299,共5页丁燏 李杰 闫秀英 简纪常 吴灶和 
国家重点基础研究发展计划"水生动物呼肠孤病毒的致病机理与保护性抗原研究";2009CB118704号
为筛选与草鱼呼肠孤病毒GCRV096 VP6发生相互作用的宿主蛋白,先将VP6基因的PCR扩增产物,克隆至酵母表达载体p GBKT7以构建其诱饵质粒(p GBKT7-VP6);再将酵母菌Y2HGold(含p GBKT7-VP6)与酵母菌Y187[含草鱼肾脏细胞(CIK)c DNA文库质粒]进...
关键词：酵母双杂交 GCRV096 VP6 蛋白质相互作用 
草鱼细胞系CIK酵母双杂交cDNA文库的构建及初步应用
《生物技术通报》2014年第6期128-133,共6页闫秀英 谢吉国 李杰 丁燏 吴灶和 鲁义善 简纪常 
国家“973”计划项目(2009CB118704)
旨在探索草鱼呼肠孤病毒与宿主细胞蛋白质间的相互作用,运用SMART技术构建了草鱼肾组织细胞系CIK(Ctenopharyngodon idellus kidney)的酵母双杂交cDNA文库。提取CIK细胞总RNA后,分离纯化mRNA,然后以mRNA为模板,反转录合成cDNA第一链,再...
关键词：草鱼肾组织细胞系 酵母双杂交 CDNA文库 蛋白质互作 
利用噬菌体展示技术淘选草鱼呼肠孤病毒的单链抗体被引量：3
《水生生物学报》2014年第3期430-437,共8页张凤 李周全 闫利明 罗绍祥 钟利桥 张晓华 袁丽 方勤 戴和平 
国家重点基础研究发展计划(批准号:2009CB118704)资助
草鱼呼肠孤病毒(GCRV)是引起我国大面积草鱼幼鱼出血病暴发的主要病原,其外衣壳蛋白VP5和VP7在病毒入侵宿主细胞过程中起着至关重要的作用。研究以原核表达的VP7、全长VP5、VP5的N端片段及C端片段为靶蛋白,利用已构建的噬菌体展示单链...
关键词：草鱼呼肠孤病毒 VP5 VP7 噬菌体展示 单链抗体 
罗非鱼无乳链球菌DNA疫苗的构建及免疫效果研究被引量：5
《中国海洋大学学报（自然科学版）》2013年第12期30-35,共6页王蓓 简纪常 蔡双虎 黄郁葱 汤菊芬 吴灶和 
国家重点基础研究发展计划项目(2009CB118704);国家重点基础研究发展计划前期项目(2011CB111600);广东省科技计划项目(2010B020309009)资助
为研究罗非鱼源无乳链球菌重组DNA疫苗对鱼体的免疫保护作用,将Sip基因克隆至真核表达载体pcDNA3.1(+)构建重组质粒pcDNA-Sip,并以肌肉注射方式免疫吉富罗非鱼(Oreochromis niloticus)。免疫后第7、28天取样,采用PCR及RT-PCR方法检测pcD...
关键词：无乳链球菌 免疫 罗非鱼 重组DNA疫苗 
草鱼(Ctenopharyngodon idellus)NCCRP-1基因的克隆和原核表达被引量：2
《生物技术通报》2013年第11期105-111,共7页蔡佳 代礼平 王蓓 汤菊芬 黄郁葱 鲁义善 吴灶和 简纪常 
国家"973"计划项目(2009CB118704)
应用RACE PCR克隆了草鱼NCCRP-1基因。结果表明,NCCRP-1cDNA全长900 bp,开放阅读框为714 bp,编码237个氨基酸残基,预测分子量为27.3 kD,理论等电点为5.63。草鱼NCCRP-1具有NCCRP-1蛋白家族保守的功能区域,与鲤鱼该基因(Cyprinus carpio...
关键词：草鱼 NCCRP-1 克隆 原核表达 
草鱼NEDD4结合蛋白基因1原核表达条件的优化及纯化被引量：4
《广东海洋大学学报》2013年第4期38-42,共5页杨林 蔡佳 简纪常 颜鹏 鲁义善 吴灶和 
国家973计划(2009CB118704)
通过PCR方法克隆草鱼(Ctenopharyngodon idellus)NEDD4结合蛋白基因1(简称CiN4BP1)的开放阅读框(ORF)序列,将扩增产物与pET-32a(+)表达载体相连接,构建原核表达载体pET-N4BP1,对重组质粒进行酶切和测序鉴定,然后将其导入大肠杆菌BL21(DE...
关键词：草鱼 N4BP1 原核表达 表达条件 优化 纯化 WESTERN BLOT分析 
草鱼白细胞介素6基因克隆与表达分析被引量：1
《广东海洋大学学报》2013年第3期46-51,共6页颜鹏 简纪常 吴灶和 
973计划"水生动物呼肠孤病毒的致病机理与保护性抗原研究"(2009CB118704)
白细胞介素6(IL-6)是一个多效的细胞因子,在机体免疫应答、急性期反应以及造血调控等过程中发挥着重要作用。以草鱼(Ctenopharyngodon idella)为研究对象,采用RT-PCR和Smart RACE技术克隆获得草鱼IL-6(CiIL-6)cDNA序列,CiIL-6的cDNA全长...
关键词：草鱼 白细胞介素6 基因克隆 基因表达 RACE 
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