国家杰出青年科学基金(30228026)

作品数：10被引量：93H指数：4
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相关作者：黄爱龙张秉强唐霓闫歌向明确更多>>
相关机构：重庆医科大学附属第二医院重庆医科大学重庆医科大学附属第一医院重庆市第九人民医院更多>>
相关期刊：《重庆医科大学学报》《生物技术通报》《中国肿瘤临床》《中华传染病杂志》更多>>
相关主题：RNA干扰RNA干扰技术SURVIVIN基因肝癌细胞肝癌细胞株更多>>
相关领域：医药卫生生物学更多>>
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RNA干扰技术抑制血管内皮生长因子表达被引量：4
《中国肿瘤临床》2007年第7期366-369,373,共5页李铁军 康楷 宋建宁 胡瓒斓 何通川 张秉强 张才全 
国家杰出青年基金(编号:30228026);国家青年科学基金资助(编号:30300298)
目的:应用RNA干扰技术抑制血管内皮生长因子(VEGF)表达。方法:将VEGF基因作为RNA干扰的靶区,通过E-RNAi网上提供的服务,设计两个特异的RNA干扰序列,将其装入含U6启动子的载体上,构建成抗VEGF基因的小发夹样RNA(shRNA)表达载体,再转染人...
关键词：RNA干扰 血管内皮生长因子 肿瘤细胞 NORTHERN杂交 
抑制Dicer基因对shRNA功能发挥的影响
《中国病毒学》2006年第6期604-608,共5页张秉强 陈维贤 黄英 何茂锐 吴莹 张君 Tong-Chuan He 黄爱龙 
国家杰出青年基金(30228026);国家青年科学基金(30300298)
本文将Dicer基因的RNA酶III结构域作为靶区,设计并构建了两个抗Dicer基因的小发夹样RNA(shRNA)表达载体,将其转染2215、结肠癌TC细胞和基因组中整合有绿色荧光蛋白基因(GFP)的HepG2A9细胞,通过RT-PCR评价RNA干扰抑制Dicer基因表达的效率...
关键词：RNA干扰 DICER 小发夹样RNA(shRNA) 
应用干扰RNA体外抑制严重急性呼吸综合征冠状病毒N基因的表达
《中华传染病杂志》2005年第3期166-169,共4页陶鹏  张君  张秉强  王超  Tong-Chuan He  黄爱龙  
国家杰出青年基金资助(30228026);国家"十五"863计划资助(2001AA217121)
目的构建绿色荧光蛋白(GFP)与严重急性呼吸综合征(SARS)冠状病毒N蛋白的融合表达载体pEGFP-C1-N以及针对SARS冠状病毒N基因的小发卡型shRNA表达载体pshRNAN,观察shRNA对SARS冠状病毒N基因复制和表达的影响。方法将构建成功的pEGFPC1N与p...
关键词：RNA干扰 SARS病毒 基因疗法 基因表达 严重急性呼吸综合征(SARS) SARS冠状病毒 shRNA N基因 体外抑制 干扰 
向下转膜法在乙肝病毒Southern杂交中的应用被引量：3
《生物技术通报》2005年第2期26-28,共3页张秉强 吴莹 唐霓 郭进军 黄英 汤华 黄爱龙 
国家杰出青年基金(30228026);国家青年科学基金(30300298)资助
目的评价向下转膜法在乙肝病毒(HBV)Southern杂交中的应用效果。方法用带有1.3倍HBV基因的真核表达载体转染HepG2细胞,使其产生瞬时HBV表达,72小时收集细胞并提取细胞总DNA,琼脂糖凝胶电泳后,以向上和向下两种方式转移在尼龙膜上;用化...
关键词：SOUTHERN杂交 乙肝病毒 膜法 HepG2细胞 琼脂糖凝胶电泳 真核表达载体 总DNA 化学发光标记 DNA量 HBV 检测试剂盒 基因片段 推广应用 尼龙膜 灵敏度 条带 转染 探针 
RNA干扰技术对肝癌细胞内源survivin基因表达的影响被引量：16
《生物化学与生物物理进展》2004年第9期829-833,共5页闫歌  蒲丹  唐霓  高小玲  宋文鑫  卢年芳  吴刚  Tong-Chuan He  黄爱龙  
国家自然科学基金资助项目(3 0 3 715 99);国家杰出青年基金资助(B类)(3 0 2 2 80 2 6)~~
应用RNA干扰技术(RNAi)研究针对凋亡抑制因子survivin的siRNA抑制肝癌细胞株内源survivin基因的表达.转染重组质粒pshRNA survivin至肝癌细胞株SMMC 772 1,通过免疫荧光、蛋白质印迹和半定量RT PCR检测survivin蛋白表达及mRNA转录水平...
关键词：RNA干扰 肝癌细胞株 SURVIVIN基因 
凋亡抑制因子survivin基因的克隆及在真核细胞中的表达
《重庆医科大学学报》2004年第3期266-268,共3页闫歌 蒲丹 唐霓 张秉强 高小玲 宋文鑫 何通川 黄爱龙 
国家自然基金资助 ( 3 0 3 715 99);国家杰出青年基金 (B类 )资助( 3 0 2 2 80 2 6)
目的 :克隆Survivin编码序列并在真核细胞中表达。方法 :RT -PCR扩增Survivin编码序列 ,建立与绿色荧光蛋白(GFP)共表达的融合重组质粒 ,转染哺乳动物细胞 ,利用GFP绿色荧光和WesternBlot检测Survivin蛋白的表达。结果 :RT -PCR扩增出 4...
关键词：SURVIVIN 绿色荧光蛋白 真核细胞 表达 
短发夹状RNA抑制survivin基因在肝癌细胞中的表达被引量：14
《中华肝脏病杂志》2003年第12期712-715,共4页闫歌 黄爱龙 唐霓 张秉强 蒲丹 向明确 兰英华 吴刚 
国家自然科学基金(30371599);国家杰出青年基金(B类)(30228026)
目的 构建抗凋亡因子survivin的短发夹状RNA(shRNA),观察其在肝癌细胞株HepG2、SMMC—7721中对survivin基因表达的抑制作用。方法 设计、合成两对survivin编码基因的反向重复序列,中间分别间隔4和8个nt,分别定向克隆至载体pTZU6+1的U6...
关键词：短发夹状RNA SURVIVIN基因 肝癌 癌细胞 细胞凋亡 基因治疗 
1.3倍乙型肝炎病毒全基因真核表达载体的构建及在HepG2细胞中的表达被引量：22
《中华肝脏病杂志》2003年第8期464-466,共3页唐霓 黄爱龙 张秉强 闫歌 向明确 蒲丹 郭晖 
国家杰出青年科学基金(B类)课题(30228026)
目的 构建1.3倍全基因乙型肝炎病毒(HBV)真核细胞表达载体,观察其在HepG2细胞中的表达。方法 从pGEM—HBV载体上将约4.1kb的1.3倍HBV全基因克隆至真核表达载体pCDNA3.1的Hind Ⅲ位点,将构建的pHBV经Lipofectamine2000导入肝癌细胞系HepG...
关键词：乙型肝炎病毒 全基因真核 表达载体 构建 HEPG2细胞 
shRNA抑制外源绿色荧光蛋白在肝癌细胞株中的表达被引量：2
《重庆医科大学学报》2003年第6期681-684,共4页闫歌 黄爱龙 唐霓 张秉强 向明确 蒲丹 
国家杰出青年基金 (B类 )资助 (3 0 2 2 80 2 6);国家自然科学基金 (3 0 3 715 99)
目的 :构建绿色荧光蛋白 (GFP)的短发夹状RNA(shRNA) ,观察其在哺乳动物细胞中抑制外源GFP的表达。方法 :设计、合成含GFP编码基因片段 ,中间被 4个bp间隔的反向重复序列 ,与转录载体 pTZU6 +1连接 ,构建pshRNA—GFP重组质粒 ,与pEGFP ...
关键词：RNA干扰 绿色荧光蛋白 短发夹状RNA 
应用RNA干扰技术抑制乙型肝炎病毒抗原表达的实验研究被引量：43
《中华医学杂志》2003年第15期1309-1312,共4页唐霓 黄爱龙 张秉强 闫歌 Tong-Chuan He 
国家杰出青年基金资助项目 (3 0 2 2 80 2 6)
目的　构建针对乙型肝炎病毒 (HBV)核心区的siRNA表达载体pSIHBV/C ,观察其对HBV复制和表达的影响。方法　将构建成功的 pSIHBV/C与 1 3倍HBV真核表达质粒pHBV1 3共转染HepG2细胞 ,转染后 2 4、4 8、72h ,用Abbott试剂检测细胞上清中HB...
关键词：RNA干扰技术 抑制 乙型肝炎病毒抗原 表达 实验研究 慢性乙型肝炎 
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