国家自然科学基金(30270992)

作品数:13被引量:38H指数:5
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相关作者:罗建勋殷宏高金亮关贵全任巧云更多>>
相关机构:中国农业科学院兰州兽医研究所甘肃农业大学西南民族大学鄂尔多斯市疾病预防控制中心更多>>
相关期刊:《畜牧兽医学报》《中国兽医科学》《中国兽医学报》《甘肃农业大学学报》更多>>
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不同抗体对青海血蜱唾液腺蛋白组分的识别差异
《中国兽医科学》2010年第12期1211-1213,共3页姜晓杰 高金亮 罗建勋 关贵全 殷宏 
国家自然科学基金资助项目(30270992)
通过利用青海血蜱唾液腺蛋白皮下注射绵羊和将蜱在绵羊体直接饲喂2种免疫途径制备了2种阳性血清。利用这2种阳性血清分别与青海血蜱唾液腺天然蛋白进行免疫学反应,结果显示青海血蜱唾液腺中分子质量为22 ku和37 ku的2种天然蛋白能被利...
关键词:青海血蜱 皮下注射 饲喂 免疫途径 
Construction of Larval cDNA Expression Library and Immunological Identification of Positive Clones in Tick Haemaphysalis qinghaiensis
《Agricultural Sciences in China》2010年第6期896-902,共7页ZHAO Hai-ping YIN Hong LI Chun-yi GAO Jin-liang LI You-quan GUAN Gui-quan LIU Zhi-jie LIU Jun-long YANG Fu-he XING Xiu-mei LUO Jian-xun 
supported by the Na- tional High-Tech R&D Program (2006AA10A207);the National Key Technology R&D Program (2007- BAD40B06);the Natural Resource Platform Project (2005DKA21104);the National Natural Science Foundation of China (30270992) as well
A primary cDNA expression library with a titer of 5.0 × 105 PFU mL-1 was constructed from mRNA extracted from larval Haemaphysalis qinghaiensis ticks in order to identify certain genes,which would then be used as can...
关键词:larval tick Haemaphysalis qinghaiensis cDNA expression library IMMUNOSCREENING immunologicalidentification 
青海血蜱成蜱cDNA表达文库的免疫学筛选及阳性克隆分析被引量:1
《中国兽医科学》2008年第9期743-746,共4页李金杰 李有全 刘军龙 赵海平 高金亮 殷宏 罗建勋 
国家"十一五"高技术研究发展计划(863)项目(2006AA10A207);国家自然科学基金项目(30270992)
采用兔抗青海血蜱幼蜱阳性血清,对青海血蜱成蜱cDNA表达文库进行免疫学筛选,并对获得的阳性克隆进行序列测定及同源性分析。结果显示,共获得9个新cDNA序列,其中3个新基因序列已被GenBank接受,并获得序列接受号。表明,从青海血蜱成蜱cDN...
关键词:青海血蜱 CDNA表达文库 免疫学筛选 
青海血蜱幼蜱cDNA表达文库的构建及其保护性抗原基因的免疫学筛选被引量:7
《中国兽医科学》2007年第6期461-464,共4页赵海平 高金亮 李有全 樊瑞泉 李金杰 赵金国 刘军龙 殷宏 罗建勋 
国家高技术研究发展计划(863)项目(2006AA10A207);国家自然科学基金项目(30270992)
采用常规方法构建了青海血蜱幼蜱cDNA表达文库,初级文库的库容量为5.0×105PFU/mL,扩增后的库容量为8×109PFU/mL;用兔抗青海血蜱幼蜱阳性血清对该文库进行了免疫学筛选,对阳性噬菌体进行了亚克隆,提取质粒后转化宿主菌JM109,最终共得...
关键词:青海血蜱 幼蜱 CDNA表达文库 免疫学筛选 
微小牛蜱Bm86基因的克隆与原核表达被引量:7
《甘肃农业大学学报》2007年第1期15-19,共5页樊瑞泉 罗建勋 杨孝朴 殷宏 高金亮 关贵全 刘志杰 党志胜 马米玲 任巧云 刘爱红 
国家高新技术研究发展计划(863)项目(2006AA10A207);国家自然科学基金资助项目(30270992)
根据已发表的Bm86基因序列,设计表达型引物,利用RT-PCR技术,从微小牛蜱饥饿幼蜱的研磨物中扩增Bm86基因,将PCR产物连入pGEM-T Easy载体,构建重组克隆载体pGEM-T easy-Bm86.测序分析表明:克隆的微小牛蜱Bm86基因序列与GenBank上登录的Bm8...
关键词:微小牛蜱 Bm86基因 克隆 表达 
鸡γ-干扰素基因的克隆及原核表达被引量:6
《中国兽药杂志》2006年第7期12-16,共5页史耀旭 关贵全 高金亮 党志胜 刘志杰 刘爱红 马米玲 任巧云 罗建勋 殷宏 曾巧英 
国家高技术研究发展计划(863)项目(2003AA241110);国家自然科学基金资助项目(30270992)
参照Digby发表的鸡γ-干扰素的核苷酸序列,设计一对引物,应用RT-PCR技术,从ConA诱导过的鸡脾淋巴细胞中特异性地扩增出大小约为500bp的基因片段。将该扩增基因进行克隆测序,结果表明其序列与Digby报道的CHIFN-γ基因序列的同源性达100%...
关键词:Γ-干扰素  克隆 表达 
青海血蜱cDNA表达文库的免疫学筛选和阳性克隆的鉴定被引量:5
《中国兽医学报》2006年第6期631-633,共3页高金亮 罗建勋 樊瑞泉 魏永红 李文卉 任巧云 关贵全 殷宏 
国家自然科学基金资助项目(30270992);国家"863"计划资助项目(2003AA241110)
为获得抗青海血蜱免疫原基因,用兔抗青海血蜱差异蛋白阳性血清和兔抗青海血蜱唾液蛋白阳性血清对青海血蜱cDNA表达文库进行了免疫学筛选,经过初筛和复筛共获得58个阳性信号。用所得阳性噬菌体转染宿主菌BM25.8使之自动亚克隆为重组质粒...
关键词:青海血蜱 CDNA表达文库 免疫学筛选 
微小牛蜱幼蜱cDNA表达文库的构建被引量:2
《中国兽医科技》2005年第12期994-996,共3页李文卉 罗建勋 殷宏 高金亮 关贵全 刘志杰 党志胜 马米玲 刘爱红 任巧云 
国家高技术研究发展计划(863)项目(2003AA241110);国家自然科学基金与JSPS国际合作项目(30270992)
为了研究微小牛蜱功能性抗原基因,从微小牛蜱(Boophilus microplus)幼蜱中提取总RNA并分离纯化mRNA。采用Oligo(dT)引物合成双链cDNA,在其两端加EcoRⅠ、HindⅢ定向接头,用Mini Column Fractionation凝胶过滤柱纯化后定向克隆到λSCREE...
关键词:微小牛蜱 CDNA表达文库 抗原基因 
青海血蜱cDNA表达文库的构建被引量:4
《畜牧兽医学报》2005年第11期1187-1191,共5页高金亮 关贵全 马米玲 刘志杰 党志胜 刘爱红 李文卉 任巧云 罗建勋 殷宏 
国家自然科学基金(30270992);国家高技术研究发展计划(863计划)(2001AA249081)
在无RNA酶污染的环境下摘取半饱血青海血蜱唾液腺、马氏管和卵巢等器官,从中提取RNA,进而纯化mRNA,采用oligo(dT)引物合成双链cDNA,并在其两端加EcoRⅠ/HindⅢ定向接头。将所产生的cDNA分子定向克隆到具有EcoRⅠ/HindⅢ黏性末端的λSCR...
关键词:青海血蜱 CDNA表达文库 构建 
微小牛蜱Bm86基因的真核表达被引量:4
《中国兽医科技》2005年第9期718-722,共5页李文卉 罗建勋 殷宏 关贵全 马米玲 刘志杰 刘爱红 党志胜 高金亮 任巧云 
国家高技术研究发展计划(863)项目(2003AA241110);国家自然科学基金与JSPS国际合作项目(30270992)
采用RT-PCR技术从微小牛蜱饥饿幼蜱破解物中扩增到Bm86基因,将其与巴斯德毕赤酵母分泌型表达载体pPIC9K重组构建了重组表达载体pPIC9K-Bm86,测序正确后将其用SacⅠ内切酶线性化后采用电穿孔法转化巴斯德毕赤酵母菌GS115,经G418抗性筛选...
关键词:微小牛蜱 Bm86基因 毕赤酵母 真核表达 
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