融合PCR

作品数:42被引量:132H指数:6
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木糖代谢造纸污泥菌株构建研究
《中国高新科技》2022年第19期84-87,共4页高新磊 朱元鑫 赵晓龙 原韬 
目的:传统的发酵菌株酵母菌(Saccharomyces cerevisiae)无法利用木质纤维水解产物中的木糖(约占水解单糖的30%)作为底物进行发酵,针对菌株的这一特点及酵母的葡萄糖阻遏效应,进行菌株改造构建。方法:应用全融合PCR法,将酵母SC18株SNF1...
关键词:造纸污泥 酵母 木糖乙醇 融合PCR 
山羊痘病毒SS株5个ANK基因缺失的重组病毒构建被引量:2
《现代畜牧兽医》2021年第1期58-62,共5页杨勇飞 张成 张雪萍 童剑军 高娜 李有文 
国家自然科学基金项目(31760741、31360616)。
为研究锚定蛋白基因(Ankyrin,ANK)对山羊痘病毒的影响,试验采用融合PCR和Overlap PCR技术扩增山羊痘病毒SS株5个ANK基因(ANK010、ANK138、ANK140、ANK141.2和ANK145)两端侧翼序列和绿色荧光蛋白(GFP)基因,并将其产物连接Trans1-T 1载体...
关键词:羊痘病毒 GFP 基因缺失 融合PCR 重组病毒 Overlap PCR 
鸡传染性法氏囊病病毒VP2蛋白与幽门螺杆菌铁蛋白基因融合PCR扩增及其真核表达载体的构建被引量:2
《中国畜牧兽医》2019年第10期2860-2866,共7页朱艳平 何勇 刘佳 邢瑞林 常乐凯 李润芷 岳锋 吴玉苹 李鹏 孙国鹏 张艳芳 王选年 
河南省科技攻关项目(182102110221);新乡学院青年骨干教师资助计划项目(GGJS2016-06);新乡学院科技创新团队项目(XXUTD20170106);河南省教育厅自然科学重点研究项目(19A230009)
为获得高活性的鸡传染性法氏囊病病毒(infectious bursal disease virus,IBDV)VP2蛋白的重组蛋白,本试验对IBDV VP2蛋白基因与能进行自我组装的幽门螺杆菌(Hp)铁蛋白基因进行融合PCR扩增,获得其融合基因。根据成熟VP2蛋白基因cDNA序列...
关键词:传染性法氏囊病病毒(IBDV) VP 2基因 幽门螺杆菌 铁蛋白 融合PCR 
共表达基因Ⅱ型新城疫病毒F、HN蛋白mcDNA载体的构建
《黑龙江畜牧兽医》2018年第23期1-5,263,共6页王成宇 姚心茹 刘晶 胡译文 赵维静 姜延龙 王春凤 
国家自然科学基金项目(31602092;31272552;31272541);国家重点研发计划项目(2017YFD0501000);“863”国家高技术研究发展计划项目(2013AA102806);吉林省教育厅“十三五”科学技术研究项目(JJKH20170316KJ);吉林省科技发展计划项目(20111816)
为了构建共表达基因Ⅱ型新城疫病毒(NDV)F、HN蛋白的mcDNA载体,试验采用融合PCR技术将合成的Ⅱ型NDV的F基因片段与HN基因片段融合并携带Flag标签,构建pUC-F-HN-Flag基因片段,然后与mcDNA载体MN512A连接构建重组质粒MN512A-pUC-F-HN-opt-...
关键词:新城疫病毒 融合PCR mcDNA F、HN蛋白 共表达 转染 
EGFRvⅢ蛋白的生物信息学分析及其在HEK293T细胞中的表达被引量:1
《中国生物制品学杂志》2018年第11期1210-1214,共5页曲涛 陈小梅 刘瑶 高萌 徐向红 
国家自然科学基金(81360344);甘肃省人民医院院内科研基金项目(16GSSY4-4)
目的对表皮生长因子受体Ⅲ(epithelial growth factor receptor variantⅢ,EGFRvⅢ)突变蛋白进行生物信息学分析,并构建表达该突变蛋白的HEK293T细胞系。方法根据NCBI公布的EGFR外显子序列,拼接成EGFRvⅢ编码基因,运用Protparam、ProtSc...
关键词:表皮生长因子受体 EGFRvⅢ突变 生物信息学分析 融合PCR HEK293T细胞 真核表达 
EML4-ALK-G1202R点突变质粒及其体外稳转细胞系构建被引量:2
《沈阳药科大学学报》2018年第9期776-780,共5页宋惠玲 勾文峰 马玉花 翟鑫 吴英良 左代英 
国家自然科学基金资助项目(81673308);沈阳药科大学中青年教师事业发展支持计划资助项目(ZQN2015003);沈阳药科大学大学生创新创业训练计划资助项目(201710163000221)
目的融合PCR法构建棘皮动物微管相关蛋白样4-间变性淋巴瘤激酶(echinoderm microtubule associated protein like 4-anaplastic lymphoma kinase,EM L4-ALK)G1202R点突变载体,并构建体外克唑替尼耐药细胞模型。方法利用RT-PCR从H2228细...
关键词:EML4-ALK-G1202R 非小细胞肺癌 融合PCR 
大肠杆菌hfq和rne-710基因的双质粒无痕敲除技术被引量:1
《生物工程学报》2018年第4期602-612,共11页王净 吕瑞辰 韩延平 杨瑞馥 
国家重点基础研究发展计划(973计划)(No.2014CB744405);河北省科技计划项目(No.16236605D-1(2017))资助~~
基因敲除技术是了解基因功能的重要技术手段。以大肠杆菌K-12 MG1655基因组hfq(309 bp)和rne-710(1056 bp)基因为模型,首先构建Δhfq∷Spe和Δrne-710∷Spe菌株,通过融合PCR方法分别构建缺失hfq(309 bp)和rne-710(1056 bp)的融合片段并...
关键词:大肠杆菌 HFQ rne-710 双质粒无痕敲除 融合PCR Ⅰ-Sce Ⅰ内切酶 
pcDNA3.1-CD74-ROS1重组质粒构建与表达对肺癌细胞增殖及迁移的影响
《肿瘤防治研究》2018年第4期199-204,共6页吴亚州 李佳 张蕾 
辽宁省科技厅联合基金项目(2015020351)
目的构建C-ros致癌基因1(ROS1)融合基因CD74-ROS1重组质粒,并转染A549细胞株,检测其对肺癌细胞迁移能力的影响。方法通过PCR技术获得CD74和ROS1基因片段,利用融合PCR法构建CD74-ROS1融合基因,构建pc DNA3.1-CD74-ROS1重组质粒,通过脂质...
关键词:CD74-ROS1 融合PCR 非小细胞肺癌 迁移 增殖 
苹果腐烂病菌VmHMG基因敲除突变体获得及表型分析被引量:7
《核农学报》2018年第3期448-454,共7页贾晓曼 王怡霖 孙庚午 何邦令 葛顺峰 王玉涛 刘会香 
国家重点研发计划(2016YFD0201100);国家自然基金项目(31770684)
苹果腐烂病菌是引起我国苹果腐烂病的主要病原真菌,对苹果产业造成了严重的经济损失。为有效控制病害的发生,本试验研究了VmHMG对苹果腐烂病菌的生长发育及致病性的影响。本研究通过融合PCR技术将苹果腐烂病菌HMG-box基因上下游片段与...
关键词:苹果腐烂病菌 VmHMG 同源重组 融合PCR 致病性 
利用多重PCR技术构建与PRDC相关的4种病毒病的快速检测方法
《畜牧兽医科学(电子版)》2018年第2期4-5,共2页李世震 盛金良 
利用多重PCR技术(multiplex polymerase chain reaction,mPCR)多对引物,同一反应体系,能够同时扩增出各条基因片段的特性,参考相关文献资料,设计合成CSFV、PRRSV、PCV2、PRV的特异性引物,构建可以同时检测以上4种PRDC相关病毒病的多重...
关键词:PRDC 融合PCR 重组片段 诊断 
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