双酶切

作品数：47被引量：106H指数：6
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单学时完成DNA酶切实验的探索
《实验教学与仪器》2023年第8期9-10,共2页杨柯金 王燕华 黄岩 吴雨静 
河南省教育厅2019年一流本科课程建设项目,编号:豫教〔2020〕13330;南阳师范学院一流课程建设项目,编号:2019-YLKC-100;河南省高等教育教学改革研究与实践项目,编号:2021SJGLX229Y。
DNA酶切实验是分子生物学和基因工程的常规实验,是完成DNA重组实验的第一步,然而常规实验方法十分耗时,无法满足教学需求。通过调整DNA酶切实验的反应体系,缩短酶切时间,提高电泳电压,边染色边电泳,实验用时可缩短至25min(不足1学时),可...
关键词：限制性内切酶 双酶切 酶切反应时间 DNA重组实验 
基于简化基因组测序的不同干形云南松遗传分析被引量：2
《云南农业大学学报（自然科学版）》2022年第2期285-293,共9页吴治洋 纵丹 甘沛华 刘子腾 朱梅彩 何承忠 
云南省专家工作站建设项目(202005AF150020);云南省产业技术领军人才培养项目(81210420);中央引导地方科技发展专项(YDZX201953000002845)。
【目的】研究直干形和扭干形云南松遗传差异,揭示其遗传变异特点。【方法】分别以胚乳和针叶为材料,采用简化基因组测序技术对直干形和扭干形云南松22份样本进行单核苷酸多态型(SNP)位点挖掘及遗传分析。【结果】样本间共获得772240个变...
关键词：云南松 干形变异 遗传基础 简化基因组测序 双酶切基因分型 单核苷酸多态性 
microRNA-185-5p真核表达载体构建及其对胰腺癌Panc-1细胞增殖的影响被引量：6
《陕西医学杂志》2021年第11期1323-1326,1332,共5页燕婧 冯芸 李丹 高艺 张静 
国家自然科学基金资助项目(81660492)。
目的:构建microR-185-5p(miR-185-5p)的过表达载体并研究miR-185-5p对人胰腺癌Panc-1细胞体外增殖的影响。方法:将人工合成的miR-185-5p寡聚核苷酸与经EcoR I和HindⅢ双酶切连接上纯化后的真核表达载体pcDNA TM 6.2-GW/EmGFP-miR,接着...
关键词：miR-185-5p 真核表达载体 胰腺癌 双酶切 PANC-1细胞 细胞增殖 
Annexin A2原核表达载体的构建及表达纯化
《中国实验诊断学》2019年第6期1067-1070,共4页王德利 杨华 汤海峰 王宇石 
在真核生物中,存在一类由钙离子介导的的膜磷脂结合蛋白——膜联蛋白Annexin家族,酵母和原核生物中未发现存在。Annexin最早是在劳什肉瘤病毒转化的鸡胚细胞中发现的。已发现的Annexin家族成员归为五类:A类为脊椎动物膜联蛋白;无脊椎动...
关键词：原核表达载体 目的基因 家族成员 ANNEXIN A2 质粒载体 大肠杆菌菌株 双酶切 膜联蛋白 重组子 GST 重组质粒 
基于双酶切级联信号放大的核酸检测方法被引量：1
《高等学校化学学报》2018年第7期1427-1433,共7页廉翔 吴望华 范宏亮 张勇 张涛 
国家自然科学基金(批准号:21275129);工业控制技术国家重点实验室自主课题(批准号:ICT1805);国家重大科学仪器设备开发专项(批准号:2013YQ470781);浙江省医药卫生科技计划项目(批准号:2015KYA061;2016KYB070)资助~~
利用茎环结构定位探针构建了一个基于双酶切反应的级联信号放大体系,并将其用于核酸的检测.在该体系中,茎环结构定位探针首先是内切酶Tth EndonucleaseⅣ的作用底物,被剪切后又作为定位探针介导切口酶Nt.Bst NBI对分子信标实施剪切,将这...
关键词：级联信号放大 分子信标 切口酶 定位探针 核酸检测 
烟草反义Mlo基因表达载体的构建
《成都大学学报（自然科学版）》2017年第4期333-337,共5页邬晓勇 时羽杰 李杰 罗倩 王跃华 唐媛 孙雁霞 
成都大学药食同源植物资源开发四川省高校重点实验室开放基金(10Y201409)资助项目
获得烟草反义Mlo基因的植物表达载体pBI 121-Mlo,为进行烟草遗传转化,获得该基因表达的缺陷型植株打下基础.从烟草叶片中提取总RNA,利用RT-PCR技术扩增得到Mlo基因的c DNA,以此为模板设计反义引物,通过PCR扩增出反义Mlo基因,将此反义Ml...
关键词：MLO基因 PBI 121Mlo RT-PCR 反义片段 双酶切 
BamHⅠ+XhoⅠ双酶切质粒电泳弥散原因初探
《山西医科大学学报》2017年第11期1114-1117,共4页金科华 张惠敏 杨志珅 金天颖 卢晓晓 
湖北科技学院校级科研基金资助项目(KY2014074)
目的探讨TaKaRa公司(中国大连)快速限制酶Bam HⅠ+XhoⅠ37℃双酶切质粒p ET-28a、p ET-28a-SDHA产生弥散的原因。方法比较4种条件下酶切对弥散的影响:(1)Bam HⅠ+XhoⅠ37℃双酶切Elution Buffer(EB)洗脱或水洗脱的质粒;(2)NdeⅠ+XhoⅠ3...
关键词：BamHⅠ 双酶切 弥散 星活性 
翘嘴鳜微卫星标记亲权鉴定技术的建立与应用被引量：8
《农业生物技术学报》2017年第6期976-984,共9页曾庆凯 孙成飞 董浚键 田园园 叶星 
现代农业产业技术体系建设专项资金(CARS-49);广东省海洋渔业科技推广专项(No.A201601A06);广东省科技计划项目(No.2015A020209034);广州市科技计划项目(No.2014J4100087)
翘嘴鳜(Siniperca chuatsi)是中国重要的淡水优质养殖鱼类。为鉴定翘嘴鳜选育群体系谱,比较双酶切限制性酶切位点关联DNA测序(double digest restriction-site associated DNA sequencing,ddRADseq)与微卫星标记两种方法的鉴定效果,并...
关键词：翘嘴鳜 亲权鉴定 微卫星 单核苷酸多态性(SNP) 双酶切限制性酶切位点关联DNA测序(ddRAD-seq) 
探究单酶切和双酶切对目的基因和运载体结合准确率的影响
《中文科技期刊数据库（引文版）教育科学》2017年第2期6-6,共1页崔玉超 
人教版高中生物选修3《基因工程》中关于目的基因和载体的结合这样介绍:用同一种限制酶分别处理含目的基因的片段和载体(如质粒),使目的基因的两端和载体质粒暴露出相同的黏性末端,相同的黏性末端能够按照碱基互补配对原则重新形成双链...
关键词：双酶 单酶 
双酶切和无缝克隆方法构建HCV CORE表达载体的比较被引量：8
《山西医药杂志》2017年第3期267-270,共4页王敏敏 赵婕 常亚磊 陈浩男 陈思思 宋静 魏建宏 
山西省大学生创新创业训练计划项目(2014052)
目的以PLVX-IRES-ZsGreen1为载体骨架,通过双酶切方法和无缝克隆方法构建HCV CORE真核表达载体,比较2种不同载体构建方法的优缺点,以期为合理选择载体构建方法提供依据。方法双酶切方法使用BamHⅠ和EcoRⅠ两种限制性内切酶分别酶切PLVX-...
关键词：遗传载体 克隆 分子 同源重组 
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