重叠PCR

作品数:96被引量:156H指数:5
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陆地棉GhMYB4基因沉默载体构建及转基因棉花的鉴定被引量:2
《分子植物育种》2021年第13期4386-4391,共6页王怡 于月华 刘晨 万会娜 王萍 唐洁 倪志勇 
国家自然科学基金项目(U1703115);自治区天山创新团队计划(2020D14002);新疆维吾尔自治区自然科学基金面上项目(2018D01A10);自治区天山青年计划(2018Q002;2018Q18)共同资助。
MYB转录因子是植物中最大的转录家族之一,广泛参与植物逆境胁迫应答、生长发育及细胞形态的建成等生理活动。为了研究GhMYB4基因在棉花中的生物学功能,本研究利用重叠PCR方法替换拟南芥At-MIR319的成熟链和互补链序列,构建含有amiRMYB4...
关键词:陆地棉(Gossypium hirsutum) 重叠PCR 棉花转化 
采用重叠PCR构建高灵敏度酵母细胞传感器评估遗传毒性化合物
《中国药科大学学报》2021年第2期236-244,共9页何颖 夏星雅 魏嘉利 郑枫 
国家自然科学基金资助项目(No.82073815)。
采用重叠PCR(overlap PCR)方法构建了pdr5与snq2基因敲除组件,研究了pdr5、snq2基因突变对酵母细胞传感器评估遗传毒性的影响。考察了野生型、pdr5单基因突变、snq2单基因突变与pdr5、snq2双基因突变酵母细胞传感器暴露于系列浓度甲磺...
关键词:重叠PCR 酵母细胞传感器 RNR2启动子 遗传毒性 
新型冠状病毒SARS-CoV-2特异性可检测靶点的确认与重叠PCR合成
《中南医学科学杂志》2020年第6期641-646,共6页肖正午 肖莉 传军 李亚梅 彭壮 林丽美 李凯 戴爱国 庹勤慧 廖端芳 
湖南省中医药防治新冠肺炎科研攻关课题(KYGG06,湘中医药〔2020〕5号).
高敏感的检测试剂盒的基因检测,是防控新冠疫情的关键手段之一。鉴于目前国内外新型冠状病毒(SARS-CoV-2)检测试剂盒在敏感性方面存在的不足,我们认为与其所检测靶点数量的局限性有关。本研究结合生物信息学分析和采用重叠PCR合成策略,...
关键词:SARS-CoV-2 检测靶点 PCR 
小鼠Zbtb38基因慢病毒过表达质粒的构建与鉴定
《中国畜牧兽医》2020年第10期3088-3094,共7页李洁 陈静 杨帆 李君 蔡亚非 
安徽省自然科学基金项目(1908085MC83);国家自然科学基金面上项目(31970413);青海省海南州科技计划项目(2020-HZ04-B)。
本研究旨在构建Zbtb38(zinc finger and BTB domain containing 38)基因慢病毒过表达质粒载体。以小鼠脊髓组织为材料,采用重叠延伸PCR方法扩增小鼠Zbtb38基因的CDS序列,分别设计Zbtb38 CDS序列前段扩增引物1和后段扩增引物2,再以上述...
关键词:Zbtb38基因 重叠PCR pGM-T质粒 慢病毒载体 
高通量表达系统在EV71单链抗体表达中的应用被引量:1
《中华实验和临床病毒学杂志》2019年第6期641-645,共5页余秋凡 陶焱炀 李靖欣 王圆媛 张黎 朱凤才 
江苏省疾病预防控制中心科教强业项目(JKRC2016020)。
目的 建立从PCR产物直接表达ScFv抗体的方法,将该方法用于噬菌体抗体库淘选后ScFv抗体的高通量表达。方法 PCR扩增CMV启动子、ScFv和BGH Poly A尾基因片段,使用重叠PCR(overlapping PCR)将上述3个片段依次连接成1个线性的抗体表达盒。...
关键词:ScFv抗体 抗体表达盒 重叠PCR 高通量表达 
调控民猪ZBED6基因转录元件的筛选与分析被引量:1
《中国畜牧杂志》2019年第7期76-81,共6页张冬杰 刘洋 汪亮 李忠秋 刘娣 
黑龙江省科技攻关项目(GC12B311);黑龙江省科研机构创新能力提升专项(YC2016D001);国家生猪产业技术体系(CARS-37)
ZBED6是锌指蛋白家族的一员,在胎盘哺乳动物中极其保守,可通过对IGF2的调控参与骨骼肌生长。为进一步探究ZBED6基因自身的表达调控机制,本研究以民猪基因组DNA为模板,通过常规PCR扩增ZBED6基因启动子区系列截短片段,构建克隆质粒,通过...
关键词:ZBED6基因 启动子 荧光素酶活性 重叠PCR 民猪 
克隆、原核表达和鉴定牛重组SHH蛋白
《畜牧与兽医》2019年第5期6-10,共5页魏金销 谭旭信 滑留帅 安小鹏 张晓建 白跃宇 
国家高层次人才特殊支持计划"万人计划"(2069999)
Sonic Hedgehog(SHH)是Hedgehog家族的一员,其不仅参与胚胎发育的基本过程,同时也参与脂肪生成和肌肉生成。SHH在动物肌肉和脂肪沉积上的双向作用提示它是调控肌内脂肪含量(IMF)的重要候选基因。本研究中,使用重叠PCR法克隆了去除信号...
关键词:SHH蛋白 克隆 重叠PCR 原核表达 功能鉴定 
利用重叠PCR法克隆里氏木霉β-葡萄糖苷酶基因cel1a被引量:1
《江苏农业科学》2018年第21期42-45,共4页汪伟 孙春娃 杨爱文 金皓 姚萍 袁维维 徐建明 周玉珍 
江苏省自然科学基金面上项目(编号:BK20131213);淮安市科技计划(编号:HG201307);江苏省生物质与酶技术重点实验室项目(编号:JSBEET1303)
在利用里氏木霉降解纤维素为葡萄糖继而发酵生产液体燃料和大宗化学品的工业生产过程中,降解纤维素为葡萄糖是关键的一步。β-葡萄糖苷酶在调控纤维素酶的活性及其表达时起到至关重要的双重作用。为了研究β-葡萄糖苷酶Cel1a在里氏木霉R...
关键词:重叠PCR β-葡萄糖苷酶cel1a 里氏木霉 
青色荧光蛋白标记的禾谷镰孢转化子的构建被引量:2
《微生物学通报》2018年第10期2191-2199,共9页许苗苗 苏前富 李丽娜 渠清 贾娇 曹志艳 董金皋 
国家现代农业(玉米)产业技术体系(CARS-02)~~
【背景】近年来玉米茎腐病在我国大部分玉米产区普遍重度发生,其中镰孢菌茎腐病不仅造成了重大的经济损失,而且镰孢菌产生的毒素给人体和动物的健康也带来严重威胁。【目的】玉米茎腐病的病原组成复杂,禾谷镰孢是其中的主要病原之一,该...
关键词:青色荧光蛋白 重叠PCR 禾谷镰孢 侵染 
EGFR基因G719S和T790M突变载体的构建及临床应用研究被引量:1
《临床检验杂志》2018年第5期380-383,共4页周晶 向花花 肖正午 彭华 张宏全 郭紫芬 
湖南省自然科学基金(2018JJ2350)
目的构建与宫颈癌组织表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)基因G719S和T790M位点突变型重组载体,利用其建立分子开关平台检测宫颈癌EGFR基因突变。方法以野生型重组质粒为模板,利用重叠PCR技术,得到突变型融合目的...
关键词:宫颈癌 表皮生长因子受体基因 定点突变 重叠PCR 
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