基因敲入

作品数：97被引量：164H指数：6
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水熊虫损伤抑制基因Dsup的CRISPR/Cas9基因敲入系统构建及其对HEK 293T细胞增殖能力的影响
《军事医学》2024年第8期586-593,共8页高雨婷 张彪 贾雅丽 王海洋 范韬 习佳飞 岳文 曾泉 周军年 
国家自然科学基金面上项目(82273569)。
目的 构建融合表达绿色荧光蛋白copGFP及水熊虫Dsup蛋白的HEK 293T细胞,研究Dsup蛋白对HEK293T细胞增殖能力的影响。方法 构建CRISPR/Cas9基因敲入系统,使用PCR技术扩增Dsup、copGFP、EF1α、puro目的基因片段,并将其插入pAAVS1-SFFV中...
关键词：水熊虫 辐射耐受 损伤抑制蛋白 CRISPR/Cas9 细胞增殖 
基于CRISPR/Cas9技术的哺乳动物细胞基因敲入的策略优化与效率提升
《生命的化学》2024年第8期1433-1441,共9页邹爽 孟德豪 李贺年 张艳芬 马宁 
黑龙江省省级领军人才梯队后备带头人项目(2018);哈尔滨医科大学少帅揭榜项目(HMUMIF-21025);黑龙江省教育厅教改课题重点委托项目(SJGZ20200109);哈尔滨医科大学附属第二医院中青年创新科学研究基金项目(2020)。
CRISPR基因编辑系统自问世以来,极大推动了疾病治疗、药物研发、疾病模型构建等领域的研究进展。基于该系统的基因敲入(knock-in,KI)策略已成为基因工程生物制备与基因治疗等应用的常用策略。但外源DNA的敲入,尤其是较大DNA片段的敲入...
关键词：CRISPR/Cas9 基因敲入 同源重组修复 非同源末端连接 
CRISPR/Cas9技术在构建荧光标记柔嫩艾美耳球虫β-微管蛋白敲入虫株上的应用
《中国兽医科学》2024年第6期742-748,共7页肖琴 曲自刚 李文卉 张念章 孙晓林 付宝权 
宁夏农业农村领域重点研发计划项目(2022BBF02019);国家自然科学基金项目(32160843)。
为评价弓形虫CRISPR/Cas9质粒在柔嫩艾美耳球虫基因敲入中的应用,以柔嫩艾美耳球虫Etβ-tubulin为目标基因,根据Etβ-tubulin基因序列设计向导RNA(g RNA),构建含g RNA的基因编辑质粒及含有目标基因和m Cherry基因的同源重组质粒;将含g ...
关键词：柔嫩艾美耳球虫 CRISPR/Cas9 基因敲入 Β-TUBULIN 
不同CRISPR/Cas9供体适配基因编辑系统的比较及优化研究
《遗传》2024年第6期466-477,共12页马宝霞 杨森 吕明 王昱人 常立业 韩艺帆 王建刚 郭杨 徐坤 
科技创新2030−农业生物育种重大项目(编号:2023ZD04074,2023ZD04051)资助。
在哺乳动物细胞中进行基因敲入通常采用同源定向修复(homology-directed repair,HDR)机制将外源DNA模板整合到目标基因组靶点中。然而HDR效率往往较低,其中外源DNA模板与目标基因组靶点的共定位是关键限制因素之一。为提高CRISPR/Cas9...
关键词：基因编辑 基因敲入 CRISPR/Cas9 供体适配 同源定向修复 
神经退行性疾病大动物模型建立、治疗及分子机制研究——粤港澳中枢神经再生研究院闫森研究员
《科技成果管理与研究》2024年第2期F0002-F0002,I0001,共2页赵洋 
疾病动物模型是研究疾病的致病机制及治疗方案不可或缺的重要工具。粤港澳中枢神经再生研究院闫森研究员主要从事神经退行性疾病动物(小鼠、猪、猴)模型的建立、胚胎发育基因修饰、分子机制的研究,携团队利用CRISPR/Cas9基因编辑技术和...
关键词：疾病动物模型 神经退行性疾病 动物模型建立 免疫缺陷 中枢神经再生 转基因猪 基因敲入 猪模型 
基于CRISPR/Cas9构建血管平滑肌细胞特异性Mrjp 1基因敲入小鼠
《中国畜牧兽医》2023年第11期4392-4402,共11页沙芳芳 范沛 杨培长 张璐 李建科 
国家自然科学基金资助项目(32070742);农业农村部授粉昆虫生物学重点实验室开放基金资助项目(2018MFNZS02)。
【目的】探究蜂王浆中含量最高的活性分子——蜂王浆主蛋白1(MRJP1)基因敲入血管平滑肌细胞后,在体内水平上是否具有调节小鼠血压的功能。【方法】利用CRISPR/Cas9技术,将可识别小鼠Hipp11位点的gRNA、Cas9和包含Sm22α启动子+Mrjp 1 c...
关键词：CRISPR/Cas9 小鼠 基因敲入 蜂王浆主蛋白1 血压调节 
基于CRISPR/Cas9系统构建绵羊VASA基因敲入载体及验证被引量：3
《生物工程学报》2023年第10期4219-4233,共15页杨花 刘孜斐 吕文莉 王锋 张艳丽 
国家自然科学基金(31872359)。
本研究旨在探索VASA基因在绵羊睾丸发育中的表达变化,并通过构建VASA基因敲入载体,为下一步进行绵羊生殖细胞体外诱导分化研究提供基础。采集性成熟前后即3月龄(3-month-old,3M)和9月龄(9-month-old,9M)绵羊睾丸组织,利用实时荧光定量PC...
关键词：VASA CRISPR/Cas9 CRISPR/dCas9 敲入 绵羊 
利用CRISPER/Cas9技术构建肝脏特异性敲入Lcat基因小鼠被引量：1
《南京医科大学学报（自然科学版）》2023年第10期1366-1371,共6页张芙蓉 苟黎明 李妍 王泽勇 杨斐 吴菁 覃健 薛斌 
国家自然科学基金(32271187,32071142);江苏省青蓝工程(KY520R202025);省部共建协同创新中心(JZ21449020210617);南京市卫生科技发展专项资金项目(YKK21256)。
目的:通过CRISPR/Cas9介导的基因编辑技术构建卵磷脂胆固醇脂酰转移酶(lecithin⁃cholesterol acyltransferase,LCAT)基因敲入C57BL/6小鼠并与肝脏特异性表达Cre的转基因小鼠配繁得到肝脏特异性敲入Lcat基因C57BL/6小鼠模型。为Lcat基因...
关键词：CRISPR/Cas9 LCAT 肝脏特异性 基因敲入 
停不下的舞步——亨廷顿舞蹈病
《家庭用药》2023年第7期63-63,共1页朱晓蕾 
2018年3月,国际权威学术期刊《细胞》(Cell)运动障碍的治疗在线发表了一项重大研究成果,以广东科学家领衔的国际研究团队历时4年,首次成功培育出世界首例亨廷顿舞蹈病基因敲入猪,精准地模拟出人类神经退行性疾病,为未来的研究和治疗提...
关键词：亨廷顿舞蹈病 权威学术期刊 神经退行性疾病 运动障碍 重大研究成果 基因敲入 研究团队 
体外定点突变体或CRISPR/Cas9介导的敲入突变体快速筛选方法的建立
《精准医学杂志》2023年第3期254-258,263,共6页宋春林 张雨晴 翟玉静 张刚 王颖 
国家自然科学基金面上项目(31970666)。
目的 探讨建立一种体外定点突变体或CRISPR/cas9介导的敲入突变体的快速筛选方法,以提高突变体筛选效率,降低实验成本。方法 针对构建的体外定点突变体或CRISPR/Cas9介导的敲入突变体,采用3′端第1、2和3个核苷酸分别与突变序列相匹配...
关键词：聚合酶链反应 诱变 定点 突变 CRISPR/Cas9 基因敲入技术 诱变力试验 
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