感染性克隆

作品数：253被引量：387H指数：9
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利用Gibson DNA组装技术构建人5型腺病毒感染性克隆被引量：4
《病毒学报》2018年第3期349-355,共7页邹小辉 夏百成 郭小娟 王敏 鲁茁壮 洪涛 
国家自然科学基金(项目号:31400156),题目:人腺病毒E1B55K与E4orf6蛋白相互作用的型特异性研究及应用;国家重点研发计划(项目号:2017YFC1200503),题目:畜禽四大症候群病原鉴定技术体系与应急响应机制研究~~
为了构建人5型腺病毒（HAdV-5）的感染性克隆,我们使用了Gibson DNA组装技术。设计1对引物用于扩增质粒骨架（包含卡那霉素抗性基因和质粒的复制起点,KAN-ORI）,在引物的5’端添加HAdV-5基因组末端序列（约30NT）和Pac I位点,以携带卡...
关键词：人5型腺病毒(HAdV-5) GIBSON DNA组装 感染性克隆 病毒拯救 透射电子显微镜 
人肠道病毒71型高致病性毒株及其体外适应株cDNA感染性克隆的构建被引量：2
《病毒学报》2014年第6期605-613,共9页张永欣 李晓宇 黄宇明 周永东 毕胜利 岑山 
十二五"新药创制"科技重大专项基金(2012ZX09301-002-004);十二五"艾滋病和病毒性肝炎等重大传染病防治"科技重大专项基金(2013ZX10004601-002);国家自然科学基金(81401675)
高致病性EV71毒株的感染易伴发神经系统症状,是导致手足口病死亡病例的主要原因,但目前临床上仍缺乏防治EV71感染的特效药物及安全有效的疫苗。为进一步明确EV71的致病机制,本项工作以高致病性的EV71-HP临床分离株及其经体外细胞培养适...
关键词：肠道病毒71型 感染性克隆 拯救病毒 增殖表型 温度敏感性 
乙型脑炎减毒活疫苗株全长感染性克隆的构建及表达外源基因的初步研究
《病毒学报》2014年第6期652-660,共9页胡兵 杨爽 方志正 
通过构建乙型脑炎病毒减毒株SA14-14-2的全长cDNA克隆,来初步探讨将其作为表达载体的可行性,为下一步利用乙型脑炎病毒作为载体构建嵌合病毒打下基础。利用长片段RT-PCR的方法分两段扩增出乙型脑炎病毒cDNA,通过片段两端的酶切位点,将c...
关键词：乙型脑炎病毒 反向遗传学 全长cDNA感染性克隆 表达载体 增强型绿色荧光蛋白 
鹅圆环病毒感染性克隆的构建及其转染试验被引量：4
《病毒学报》2012年第1期29-34,共6页徐雅萍 田敬 袁海霞 郭婧 孙红霞 栗文文 陈维虎 余旭平 
国家自然科学基金项目(307716080);浙江省重点科技项目(2007C22051;011102120);宁波市重大科技项目(2002D40015)
设计带BamHⅠ酶切标记位点的引物,PCR扩增鹅圆环病毒(Goose circovirus,GoCV)全长基因组,将2个基因组顺式连接插入到pGEM-T Easy载体中,获得GoCV全长基因组头尾串联二聚体感染性克隆质粒pGEMT-2GoCV。EcoRⅠ酶切线性化pGEMT-2GoCV,与脂...
关键词：鹅圆环病毒 全长基因组头尾串联二聚体 感染性克隆 转染 
猪伪狂犬病毒浙江株感染性细菌人工染色体克隆的构建被引量：9
《病毒学报》2010年第4期330-335,共6页尹文玲 尹龙勃 叶伟成 孙学强 姚火春 张淼涛 王一成 张存 
公益性行业(农业)科研专项(200803016);浙江省重大科技专项(优先主题)农业项目(2008C12049)
通过同源重组将携带细菌人工染色体(Bacterial Artificial Chromosome,BAC)载体和GFP表达框的pHA2质粒序列插入到PRV病毒的UL23(TK)基因内,获得了重组病毒rPRV-HA2;将该重组病毒的环状基因组电转化到感受态细胞EscherichiacoliDH10B,筛...
关键词：伪狂犬病毒 细菌人工染色体 感染性克隆 重组病毒 
中国株EIAV S2基因逆向突变感染性克隆的构建及体外感染性评价被引量：2
《病毒学报》2009年第4期309-315,共7页高旭 姜成刚 韩秀娥 赵立平 沈荣显 相文华 周建华 
国家自然科学基金(30771994);黑龙江省发展高新技术产业专项资金(FW05B007);哈尔滨市科技攻关计划项目(2006AA3AS040)
以中国株EIAV的驴强毒株EIAVDV115与疫苗株EIAVFDDV15的S2基因变化规律为依据,利用反向遗传技术对EIAV弱毒疫苗株全基因组感染性克隆pFDDV3-8的S2基因区进行逆向突变,构建了含有强毒株EIAVDV115S2基因区内4个稳定点突变的克隆质粒pFDDVS...
关键词：马传染性贫血病毒 S2基因 逆向突变 感染性克隆 
乙脑/登革2型嵌合病毒的构建
《病毒学报》2009年第3期185-189,共5页韦艳 陆鹏 于建石 李建东 刘琴芝 张全福 李川 苗芳 张硕 杭小同 李德新 
国家自然科学基金(30770087)
在乙脑病毒SA14-14-2株复制子载体pPartial△prM/E中克隆入DV2(Dengue virus serotype 2)的prM/E基因,构建乙脑/登革2型嵌合体克隆。将嵌合体克隆线性化后体外转录,获得的RNA转染BHK-21细胞,5～7d可观察到CPE。收获病毒上清液分别感染BH...
关键词：乙脑 登革 嵌合病毒 感染性克隆 
流行性乙型脑炎病毒(JEV)全长感染性克隆的制备及恢复病毒的获得被引量：20
《病毒学报》2003年第4期313-319,共7页黄莺 贾丽丽 孙志伟 王志伟 俞炜源 俞永新 
根据JEV病毒减毒株SA14-14-2基因组序列,设计覆盖全长的4对重叠引物,以提取的活疫苗病毒RNA为模板,RT-PCR扩增出4个片段,并克隆到质粒载体中,进一步构建两个半端分子克隆,然后将全长cDNA序列克隆到一个新改造的低拷贝质粒载体pBR-kpn中...
关键词：流行性乙型脑炎病毒 感染性克隆 恢复病毒 质粒载体 
感染性马传染性贫血病毒嵌合克隆的构建被引量：10
《病毒学报》2003年第2期128-132,共5页何翔 邵一鸣 薛飞 范秀娟 贾斌 赵全壁 沈荣显 
基础研究重大项目前期研究专项(2001CCA00600);国家攀登计划特别项目
在已有的全长感染性克隆pFD3的基础上,构建了新的低拷贝的全长克隆pLGFD3-8。按照疫苗制备过程中env基因的变化情况,采用基因替换和定点突变的方法,构建了一系列具有马传染性贫血病毒(EIAV)强毒株env基因及其主要突变特征的嵌合克隆。...
关键词：感染性马传染性贫血病毒 嵌合克隆 基因替换 定点突变 感染性克隆 
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