出血性大肠杆菌

作品数:560被引量:1072H指数:15
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大肠杆菌O157:H7候选效应蛋白Z1370的原核表达、纯化及多抗制备被引量:4
《中国兽医学报》2015年第12期1959-1964,共6页王豪举 闫青 毛旭虎 丁红雷 
国家自然科学基金青年基金资助项目(31100308);重庆市自然科学基金重点基金资助项目(cstc2012jj B0046);中央高校基本科研业务费专项资金资助项目(2362014XK18)
为鉴定肠出血性大肠杆菌O157:H7的效应蛋白,本研究利用生物信息学方法预测了1个新的大肠杆菌O157:H7分泌蛋白Z1370,并以EDL 933菌株为模板,扩增Z1370基因。将该基因克隆至原核表达载体p GEX-6P-2,转化大肠杆菌XL-1 Blue,IPTG诱导目的蛋...
关键词:肠出血性大肠杆菌O157:H7 Z1370 分泌蛋白 多克隆抗体 原核表达 
霍乱弧菌及肠出血性大肠杆菌多重PCR检测方法的建立被引量:1
《中国兽医学报》2012年第10期1507-1510,1525,共5页刘彦晶 吴大成 孟福强 袁洁 孙洋 冯书章 
广东省科技计划基金资助项目(2009B030803046)
针对霍乱弧菌肠毒素和肠出血性大肠杆菌志贺毒素基因(ctx、stx1和stx2)设计引物,扩增大小不同的特异性片段,优化反应条件,建立多重PCR方法,对人工污染的水样品进行模拟检测。结果显示,多重PCR扩增系统针对目的菌具有高度的特异性。敏感...
关键词:霍乱弧菌 肠出血性大肠杆菌 多重PCR 检测 
牛源大肠杆菌O157:H7的分离及毒力基因鉴定被引量:13
《中国兽医学报》2012年第8期1148-1153,共6页叶青 张雪寒 何孔旺 费荣梅 赵攀登 栾晓婷 
国家科技支撑计划资助项目(2012BAK08B07);江苏省农业支撑计划-社会发展资助项目(BE2011771);江苏省自然科学基金资助项目(BK2010068)
从2个牛场采集新鲜粪便,增菌后,免疫磁珠富集,涂布筛选性培养基,挑取可疑菌落用rfbE/fliC二重PCR和血清学方法鉴定。设计毒力基因stx1、stx2、eae、hlyA和tccp相应引物,针对O157:H7对分离株进行PCR鉴定。口服攻毒链霉素处理的BALB/c小...
关键词: 肠出血性大肠杆菌O157:H7 毒力基因 致病性 
λ-Red重组系统敲除肠出血性大肠杆菌O157:H7细胞毒素stx2基因被引量:2
《中国兽医学报》2010年第7期926-930,935,共6页刘变芳 殷先华 吕欣 魏新元 郭蔼光 
西北农林科技大学青年启动基金资助项目(08080230)
采用PCR法合成了stx2基因上游和下游的2个同源臂序列分别为1635,1655bp。2个同源臂序列被克隆到载体pCR2.1-TOPO上,两臂中间插入庆大霉素抗性基因Gm(855bp),构建了stx2基因敲除盒子pCR2.1-B-Gm-A。将含2个同源臂和Gm抗性基因片段的扩增...
关键词:λ-Red重组系统 肠出血性大肠杆菌 stx2毒素基因 基因敲除 
出血性大肠杆菌O157:H7的Tir与Hly融合基因的构建和表达
《中国兽医学报》2010年第5期647-650,共4页张雪寒 何孔旺 卢维彩 李丽 茅爱华 周萍 
国家支撑计划基金资助项目(2007BAD40B01)
构建表达Tir和Hly的融合基因,将Tir基因的C端414个氨基酸残基(Tir414)基因部分与Hly基因的C端300个氨基酸残基(Hly300)基因部分串联构建pET28a-Tir414-Hly300重组质粒,将其转化于BL21(DE3),用IPTG进行诱导表达,经SDS-PAGE电泳检测,该融...
关键词:EHECO157:H7 转位紧密素受体 溶血素 融合基因 
肠出血性大肠杆菌O157ler基因缺失突变株的构建及其特性被引量:2
《中国兽医学报》2008年第11期1269-1272,共4页孙洋 刘军 郭学军 张勇 祝令伟 周博 冯书章 
国家自然科学基金资助项目(30270985)
以肠出血性大肠杆菌O157∶H786~24为始发菌株,利用自杀性载体pCVD442,根据同源重组的原理敲除了染色体上的ler基因,构建了O157∶H7 ler基因缺失突变菌株,并对其生物学特性进行了初步研究。荧光定量PCR试验结果表明,始发菌株对HEp-2细...
关键词:肠出血性大肠杆菌O157:H7 ler基因 缺失突变 
出血性大肠杆菌O157 Eae-Stx1/2B融合蛋白的免疫学特性
《中国兽医学报》2007年第6期838-841,共4页陈萍 冯书章 孙洋 郭学军 周博 尹铁勇 
为了研究重构融合蛋白Eae-Stx1/2B免疫特性及对出血性大肠杆菌感染的免疫保护作用,进行了细胞粘附抑制试验和免疫保护试验。结果证明Eae-Stx1/2B融合蛋白免疫血清在体外能降低出血性大肠杆菌对HEp-2细胞的粘附作用,这一特性在出血性大...
关键词:出血性大肠杆菌 Eae—Stx1/2B融合蛋白 免疫学特性 
肠出血性大肠杆菌O157∶H7主要保护性抗原单克隆抗体的研制及特性分析被引量:5
《中国兽医学报》2006年第3期275-277,共3页祝令伟 冯书章 刘军 陈萍 
国家自然科学基金资助项目(30270985)
以基因重组技术构建工程菌株表达肠出血性大肠杆菌(EHEC)O157∶H7主要保护性抗原紧密素和志贺毒素的融合蛋白。融合蛋白采用凝胶分离电洗脱法回收纯化,用纯化的蛋白抗原免疫BALB/c小鼠,细胞融合后获得的3株杂交瘤细胞株1G2、3C6、1B10,...
关键词:肠出血性大肠杆菌O157:H7 单克隆抗体 紧密素 志贺毒素 
EHECO157∶H7stx基因缺失突变株的构建及其特性被引量:1
《中国兽医学报》2005年第2期166-169,共4页孙洋 刘军 郭学军 常国权 尹铁勇 冯书章 
国家自然科学基金资助项目(30270985)
针对肠出血性大肠杆菌 (EHEC) O1 5 7∶H7的 stx基因 ,通过 PCR扩增出缺失了 1 83bp的 stx基因片段 ,将其克隆到自杀性载体 p CVD4 4 2中 ,然后通过接合性转导将重组自杀性质粒 p CVD4 4 2∷Δstx从大肠杆菌 SM1 0转到 O1 5 7∶ H7中 ,...
关键词:肠出血性大肠杆菌 stx基因 基因缺失突变 致病性 自杀载体技术 表型 
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