易错PCR

作品数：113被引量：249H指数：8
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通过原位易错PCR一步构建基因突变文库被引量：3
《微生物学通报》2014年第4期719-724,共6页王未未 张永昌 刘明杰 邵蔚蓝 
国家自然科学基金项目(No.31170027);江苏高校优势学科建设工程项目(PAPD)
主要介绍一种通过原位易错PCR构建随机突变文库的新技术。本实验室最近发表的一项国际专利中,利用来源于海栖热孢菌的极耐热性DNA连接酶,在传统PCR循环中加入一个连接步骤,即变性—退火—延伸—连接的四步循环法PCR,从而实现环状质粒的...
关键词：定向进化 随机突变文库 原位易错PCR 环状质粒扩增(PPCP) 
分段DNA shuffling:一种大分子海藻糖合酶有效的定向进化方法被引量：2
《微生物学通报》2013年第2期362-372,共11页刘艳超 王宇凡 钱柯帆 张峻 肖辰鹏 邢来君 李明春 
天津市应用基础及前沿技术研究计划(No.10JCYBJC09600;10JCYBJC05000);国家自然科学基金项目(No.21076162)
【目的】红色亚栖热菌(Meiothermus ruber)海藻糖合酶(Trehalose synthase,M-TreS)将麦芽糖转化生成海藻糖只需一步反应,且具有很好的热稳定性及pH耐受性,是潜在的工业生产海藻糖的酶源。为了提高该酶的性能,有必要对其进行定向进化。...
关键词：红色亚栖热菌 海藻糖合酶 定向进化 易错PCR 分段DNA SHUFFLING 
毛霉△^6-脂肪酸脱氢酶随机突变文库的构建与分析被引量：1
《微生物学通报》2011年第5期694-701,共8页宋芬芬 江贤章 陈清霞 黄建忠 
国家自然科学基金项目(No.30970047;30370028);福建省自然科学基金重大项目(No.2003F005);福建省自然科学基金项目(No.2008F3036);福建省教育厅资助项目(No.JB09035)
毛霉Mucor sp.EIM-10△6-脂肪酸脱氢酶是γ-亚麻酸合成途径的关键酶。为提高脂肪酸脱氢酶的活性以及研究该酶一级结构对酶活性的影响,利用易错PCR对毛霉△6-脂肪酸脱氢酶基因(mcd6)进行随机突变,将PCR产物与大肠杆菌-酿酒酵母穿梭表达载...
关键词：△6-脱氢酶 易错PCR 随机突变 毛霉 Γ-亚麻酸 
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