王未未

作品数:4被引量:14H指数:2
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供职机构:南京师范大学生命科学学院更多>>
发文主题:易错PCR海栖热袍菌大肠杆菌高效表达载体PPCP更多>>
发文领域:生物学农业科学更多>>
发文期刊:《安徽农业科学》《微生物学通报》《江苏农业科学》更多>>
所获基金:国家自然科学基金江苏高校优势学科建设工程项目国家重点基础研究发展计划更多>>
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通过原位易错PCR一步构建基因突变文库被引量:3
《微生物学通报》2014年第4期719-724,共6页王未未 张永昌 刘明杰 邵蔚蓝 
国家自然科学基金项目(No.31170027);江苏高校优势学科建设工程项目(PAPD)
主要介绍一种通过原位易错PCR构建随机突变文库的新技术。本实验室最近发表的一项国际专利中,利用来源于海栖热孢菌的极耐热性DNA连接酶,在传统PCR循环中加入一个连接步骤,即变性—退火—延伸—连接的四步循环法PCR,从而实现环状质粒的...
关键词:定向进化 随机突变文库 原位易错PCR 环状质粒扩增(PPCP) 
极耐热性β-葡萄糖苷酶基因克隆、超量表达及其在天然蓝色素工业化生产中的应用被引量:2
《江苏农业科学》2013年第7期19-22,共4页张慧 邱日永 刘明杰 王未未 邵蔚蓝 
从嗜热菌属的海栖热袍菌(Thermotoga maritima MSB8 ATCC43589)中扩增出编码极耐热性β-葡萄糖苷酶基因A,连接到新型热激载体pHsh上,得到重组质粒pHsh-bglA-WT和pHsh-bglA-M,并在大肠杆菌中实现了高水平可溶性表达,比酶活分别为25.7 U/m...
关键词:Β-葡萄糖苷酶 可溶性表达 栀子苷 初级氨基酸 天然蓝色素 色价 
新型大肠杆菌高效表达载体pHsh的构建与应用被引量:9
《微生物学通报》2012年第3期394-400,共7页蒋钰瑶 何嘉荣 王未未 梅艳珍 
在现代生物学和生物技术研究中,通过基因的重组表达获得目标蛋白是一种应用最广泛的方法。因其培养简单、操作方便、遗传背景清楚、克隆表达系统成熟完善,大肠杆菌表达系统通常是人们表达重组蛋白的首选,而表达载体在重组蛋白的生产中...
关键词:大肠杆菌 表达系统 pHsh载体 pHsh-ex载体 热激诱导 
海栖热袍菌电转化技术的研究
《安徽农业科学》2011年第29期17764-17766,17777,共4页彭静静 蒋钰瑶 周庆 王未未 邵蔚蓝 
973子课题(2004CB719600);国家自然科学基金(30170511)资助项目
[目的]对海栖热袍菌电转化技术进行研究。[方法]采用不同参数即不同的方型电脉冲参数、指数衰退型电脉冲参数和高电压电击参数对海栖热袍菌感受态细胞进行电转化,得到的转化子进行PCR验证。[结果]试验中发现以150 V的低压方形电脉冲,室...
关键词:海栖热袍菌 整合质粒 电转化 方型电脉冲 
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