余飞

作品数:15被引量:46H指数:4
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供职机构:扬州大学动物科学与技术学院更多>>
发文主题:精原干细胞鸡胚增强型绿色荧光蛋白体外培养红三叶更多>>
发文领域:农业科学生物学医药卫生更多>>
发文期刊:《细胞与分子免疫学杂志》《解剖学杂志》《草业科学》《中国家禽》更多>>
所获基金:国家自然科学基金国家教育部博士点基金国家高技术研究发展计划江苏省自然科学基金更多>>
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鸡胚精原干细胞转染EGFP获得转基因精子的研究被引量:1
《细胞与分子免疫学杂志》2009年第10期938-941,共4页陈昊 孙敏 高元丰 余飞 孙国波 田智泉 杨海燕 任丽伟 李碧春 
国家自然科学基金资助项目(30671509;30871791);江苏省自然科学基金(BK2007077);高等学校博士学科点专项科研基金(20061117004)
目的:通过精原干细胞体外转染外源基因获得转基因精子。方法:孵化16d的鸡胚睾丸,酶消化获取精原干细胞(SSCs),纯化后体外培养和传代扩增,碱性磷酸酶(AKP)活性和胚胎阶段特异性抗原(SSEA-1)免疫荧光鉴定。电穿孔介导EGFP转染SSCs,G418筛...
关键词: 胚胎精原干细胞 电转染 精子发生 
“睡美人”转座子系统介导EGFP转染鸡SSCs条件优化的研究被引量:3
《中国家禽》2009年第1期10-14,共5页李碧春 陈强 高波 田智泉 余飞 何先红 宋成义 常国斌 王克华 
国家自然科学基金(30671509,30871791);高等学校博士学科点专项科研基金资助项目(20061117004);国家高新技术863项目(2007AA100504);江苏省自然科学基金(BK2007077);江苏省高校自然科学重大基础研究(08KJA230001)
利用"睡美人"转座子系统介导增强型绿色荧光蛋白(Enhanced Green Fluorescent Protein,EGFP)报告基因,比较和优化了电穿孔转染条件和精原干细胞(spermatogonial stem cells,SSCs)对G418的耐受能力。结果表明,在SB与PT-EGFP的比为1∶10,...
关键词:转座子 电穿孔 精原干细胞 增强型绿色荧光蛋白 
体内外精原干细胞介导大群生产转基因鸡被引量:6
《中国科学(C辑)》2008年第7期626-634,共9页李碧春 孙国波 孙怀昌 徐琪 高波 周冠月 赵文明 吴信生 包文斌 余飞 陈国宏 
国家自然科学基金(批准号:30671509);高等学校博士学科点专项科研基金(批准号:20061117004)资助项目
本研究以重组的绿色荧光蛋白基因为标记,采用公鸡睾丸内转染精原干细胞(spermatogonial stem cells,SSCs)和体外转染SSCs再移植的方法,探索家禽转基因新方法.同时比较了公鸡接受不同剂量外源基因的转基因效率.结果显示:(i)接...
关键词:鸡(Gallus gallus)精原干细胞 绿色荧光蛋白基因 生物反应器 
鸡精原干细胞定向诱导分化特性的研究被引量:3
《畜牧兽医学报》2008年第10期1336-1342,共7页李碧春 魏彩霞 余飞 何先红 倪黎纲 陈强 王宵燕 肖小君 徐琪 刘铁铮 
国家自然科学基金(30371031);高等学校博士学科点专项科研基金(20061117004);国家高新技术“863”项目(2007AA100504)
取孵化18~20d的鸡胚睾丸,分离精原干细胞(SSCs),培养传代3次后,用特异性化学物质定向诱导分化,以研究鸡培养传代后SSCs保持多向分化的潜能。①用特异的化学物质地塞米松、β-磷酸甘油钠、维生素C诱导鸡SSCs向成骨细胞分化,用Von...
关键词:精原干细胞 成骨细胞 神经元样细胞 脂肪细胞 诱导 分化 
不同培养方法对鸡精原干细胞体外培养效果的影响被引量:1
《畜牧兽医学报》2008年第9期1196-1203,共8页吴信生 孙思宇 吴洪 魏彩霞 孙国波 余飞 赵文明 徐琪 陈国宏 李碧春 
国家自然科学基金资助(30671509);国家高新技术"863"项目(2007AA100504)
本研究从孵化至16 d的鸡胚睾丸中分离获取精原干细胞(Spermatogonial stem cells,SSCs),比较3种培养液、2种处理(有无饲养层)对SSCs生长的影响,并对SSCs保持特性进行鉴定。结果表明:在无饲养层细胞存在的条件下,DMEM、TCM199和RPMI1640...
关键词: 精原干细胞(SSCs) 体外培养 传代 
鸡抗病毒Mx蛋白修饰及其真核表达载体的构建被引量:8
《畜牧兽医学报》2008年第7期891-894,共4页倪黎纲 何先红 余飞 李碧春 高波 谢飞 程旭梅 吴晓伟 
国家自然科学基金资助项目(30671509);高等学校博士学科点专项科研基金资助项目(20061117004)
利用高保真RT-PCR的方法从Poly(I).Poly(C)诱导的鸡成纤维细胞总RNA中扩增出鸡全长MxcD-NA,扩增产物克隆到pMD19-T Simple载体上,利用PCR突变技术将其第2 032位的碱基由G突变为A,经克隆测序证实突变成功后,将已突变的Mx基因插入真核表...
关键词:MX蛋白 PCR突变 真核表达载体 
鸡精原干细胞分离培养的影响因素
《解剖学杂志》2008年第3期310-315,共6页陈昊 余飞 赵文明 吴信生 徐琪 李碧春 
国家自然科学基金(30371031);高等学校博士学科点专项科研基金(20061117004)
目的:比较不同分离方法和培养体系对鸡精原干细胞(SSCs)生长的影响。方法:采用3种分离方法、6种培养体系对SSCs进行分离培养。结果:胶原酶+胰蛋白酶组合消化睾丸后获得的平均活细胞率显著地高于其余两种方法。在有和无饲养层细胞存在的...
关键词: 精原干细胞 分离 体外培养 
鸡胚胎干细胞单细胞克隆制备方法的比较
《扬州大学学报(农业与生命科学版)》2008年第2期35-38,共4页何先红 倪黎纲 余飞 李碧春 
国家自然科学基金资助项目(30671509);高等学校博士学科点专项科研基金资助项目(20061117004)
提取鸡X期胚盘细胞,体外培养传至第3代,采用口吸管法、细胞稀释法及克隆环法将细胞集落分离成单个细胞,并将其接种至96孔板上,每孔1个细胞,采用细胞化学法和免疫荧光法检测细胞表面标志物,探讨鸡胚胎干细胞单细胞克隆制备的实际操作的...
关键词: 胚胎干细胞 单细胞克隆 
鸡胚精原干细胞定向诱导分化为脂肪细胞被引量:2
《农业生物技术学报》2008年第3期450-455,共6页余飞 葛剑辉 倪黎纲 何先红 徐琪 李碧春 
国家自然科学基金(No.30671509);高等学校博士学科点专项科研基金项目资助
研究体外定向诱导鸡胚精原干细胞(spermatogonial stem cells,SSCs)向脂肪细胞分化的能力。取孵化16d的鸡(Gallus gallus)胚睾丸,提取SSCs,体外培养和传代。采用不同的诱导程序和不同组合的诱导剂(地塞米松、胰岛素和3-异丁基-1-甲基黄...
关键词: 精原干细胞 脂肪细胞 诱导分化 
鸡胚精原细胞体外转染EGFP方法的比较
《畜牧兽医学报》2008年第2期164-169,共6页余飞 孙国波 孙鹏翔 何先红 倪黎纲 李碧春 
国家自然科学基金(30371031)
以增强型绿色荧光蛋白(Enhanced green fluorescent protein,EGFP)为报告基因体外转染鸡胚胎精原细胞(Chicken embryonic spermatogonial cells,CESCs),比较磷酸钙、脂质体(梭华-Sofast)、电穿孔3种方法转染EGFP的效率,以获得高效的体...
关键词: 精原细胞 增强型绿色荧光蛋白 体外转染 
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