云南高校图书馆联盟文献共享服务平台- 秦培兰

秦培兰: 作品数：10被引量：16H指数：2; 导出分析报告; 供职机构：中国农业科学院上海兽医研究所更多>>; 发文主题：微小隐孢子虫克隆原核表达隐孢子虫重叠延伸PCR更多>>; 发文领域：农业科学生物学医药卫生更多>>; 发文期刊：《动物医学进展》《安徽农业科学》《中国兽医科学》《中国动物传染病学报》更多>>; 所获基金：上海市科技兴农重点攻关项目中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金项目国家科技支撑计划国家科技重大专项更多>>

小附红细胞体mpg1基因的克隆及序列分析被引量：1: 《中国兽医科学》2014年第1期7-13,共7页曹薇周鹏米荣升黄燕秦培兰杨晓娇王向佩王晓娟石凯陈兆国; 公益性行业(农业)科研专项项目(200903036-05); 根据猪附红细胞体3-磷酸甘油醛脱氢酶样蛋白1基因（msgl）序列设计引物，对上海地区分离的小附红细胞体阳性猪全血DNA进行PCR扩增，获得小附红细胞体3-磷酸甘油醛脱氢酶样蛋白1基因（mpgl）并进行测序和分析，研究其遗传变异特点。结果...; 关键词：小附红细胞体 mpg1基因克隆序列分析

猪附红细胞体MSG1基因的克隆及序列分析被引量：2: 《动物医学进展》2013年第7期44-48,共5页曹薇周鹏米荣升黄燕秦培兰杨晓娇王向佩王晓娟石凯陈兆国; 公益性行业(农业)科研专项项目(200903036-05); 为研究猪附红细胞体MSG1基因的遗传变异特点,从上海地区3个屠宰场采集自然感染附红细胞体的猪血液,提取基因组DNA,根据GenBank已经发表的猪附红细胞体MSG1基因序列(登录号AM407404.1),设计引物进行PCR扩增,将扩增产物连接到pMD18-T载体...; 关键词：猪附红细胞体 MSG1基因克隆序列分析

Construction and Preliminary Identification of Eukaryotic Expression Vector of Cryptosporidium parvum miR-2980: 《Agricultural Science & Technology》2012年第5期1093-1096,共4页呼高伟程天印米荣升秦培兰黄燕周鹏曹薇陈兆国; Supported by National Major Special Science and Technology Project of China(2012ZX10004220-008);Basic Scientific Research Operational Fund for Central-level Public-interest Research Institutes (2010JB12,2012JB16);Key Project of Science and Technology to Develop Agriculture in Shanghai (2005 No. 3-4)~~; [Objective] This study aimed to construct and preliminarily identify the eu- karyotic expression vector of Cryptosporidium parvum miR-2980. [Method] The cp-miR- 2980 precursor was amplified from C. parvum genomic DNA ...; 关键词：cp-miR-2980 PRECURSOR Eukaryotic expression vector RT-PCR

微小隐孢子虫CP15-P23-CP15/60基因的融合表达及抗血清的制备: 《动物医学进展》2012年第7期54-59,共6页秦培兰米荣升黄燕周鹏张国恩苏庆美呼高伟曹薇陈兆国; 国家科技重大专项项目(2012ZX10004220-008);中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金项目(2012JB16);国家“十一五”科技支撑计划项目(2007BAD40B05);上海市科技兴农重点攻关项目[沪农科攻字(2005)第3-4号]; 以微小隐孢子虫基因组DNA为模板,PCR扩增获得子孢子表面抗原CP15、P23和CP15/60基因。利用重叠延伸PCR(SOE PCR)将该3段基因片段串联在一起,各基因片段之间引入柔性氨基酸接头(GGGGS)编码基因。将串联基因克隆到原核表达载体pET-28a(+)...; 关键词：微小隐孢子虫 CP15-P23-CP15/60融合基因原核表达重叠延伸PCR

微小隐孢子虫miR-2980真核表达载体的构建及初步鉴定被引量：1: 《安徽农业科学》2012年第13期7739-7741,7803,共4页呼高伟程天印米荣升秦培兰黄燕周鹏曹薇陈兆国; 国家科技重大专项项目(2012ZX10004220-008);中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金项目(2010JB12;2012JB16);上海市科技兴农重点攻关项目[沪农科攻字(2005)第3-4号]; [目的]构建微小隐孢子虫的miR-2980真核表达载体,并进行鉴定。[方法]从微小隐孢子虫(Cryptosporidium parvum)基因组DNA扩增cp-miR-2980前体,克隆到pMD18-T载体上,经测序鉴定正确后亚克隆到pVAXⅠ载体上,转染HCT-8细胞,提取细胞总RNA,RT...; 关键词：cp-miR-2980 前体真核表达载体 RT-PCR

微小隐孢子虫三个基因主要抗原表位区的串联表达及其抗原性分析被引量：4: 《中国动物传染病学报》2012年第3期36-43,共8页秦培兰李艳米荣升呼高伟黄燕周鹏张国恩苏庆美曹薇陈兆国; 国家科技重大专项项目(2012ZX10004220-008);中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金项目(2012JB16);国家"十一五"科技支撑计划项目(2007BAD40B05);上海市科技兴农重点攻关项目[沪农科攻字(2005)第3-4号]; 应用多个抗原表位预测软件对微小隐孢子虫CP15、P23和CP15/60三个子孢子表面抗原的氨基酸序列进行T细胞表位预测及分析,从中选取了三个抗原表位富集的基因片段,利用重叠延伸PCR(gene splicing by overlapping extension PCR,SOE PCR)将...; 关键词：微小隐孢子虫抗原表位重叠延伸PCR 原核表达抗原性

微小隐孢子虫感染HCT-8细胞模型的建立及不同阶段虫体形态的观察: 《中国兽医科学》2012年第2期111-118,共8页张国恩米荣升周鹏黄燕秦培兰呼高伟曹薇陈兆国; 国家科技重大专项(2012ZX10004220-008);国家"十一五"科技支撑计划项目(2007BAD40B05);上海市科技兴农重点攻关项目(沪农科攻字[2005]第3-4号);中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金项目(2010JB12;2012JB16); 利用人回盲肠癌(HCT-8)细胞作为感染细胞,采用不同的接种细胞浓度和培养血清浓度进行培养,观察细胞的生长状况;在培养细胞中加入1×105个经活力检测的微小隐孢子虫卵囊,培养72h后用荧光标记的隐孢子虫卵囊、子孢子染色试剂盒Crypt-a-Glo...; 关键词：微小隐孢子虫体外感染 HCT-8细胞培养形态

隐孢子虫鼠基因型CP15基因真核表达质粒的构建及在Hela细胞中的表达被引量：2: 《中国兽医科学》2011年第5期519-525,共7页苏庆美何生虎米荣升张国恩黄燕周鹏秦培兰呼高伟陈兆国; 国家"十一五"高技术研究发展计划(863)项目(2006AA10A207);国家"十一五"科技支撑计划项目(2007BAD40B05);上海市科技兴农重点攻关项目[沪农科攻字(2005)第3-4号];中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金项目(2010JB12); 为了构建隐孢子虫鼠基因型CP15基因的重组真核表达质粒,检测其重组质粒在Hela细胞中的表达。采用PCR方法,从pMD18-T-CP15菌液中扩增了CP15及含寡聚脱氧核苷酸(CpG-ODN)的CP15基因,酶切测序鉴定;将该基因亚克隆至pVAX1载体中,用脂质体介...; 关键词：隐孢子虫鼠基因型 CP15 真核表达质粒 HELA细胞表达

隐孢子虫P23基因的原核表达及间接ELISA检测方法的建立被引量：1: 《中国动物传染病学报》2011年第2期43-50,共8页张国恩米荣升苏庆美黄燕周鹏胡义彬秦培兰呼高伟陈兆国; 国家"十一五"高技术研究发展计划(863)项目(2006AA10A207);国家"十一五"科技支撑计划项目(2007BAD40B05);上海市科技兴农重点攻关项目(沪农科攻字[2005]第3-4号);中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金项目(2010JB12); 将隐孢子虫鼠基因型(Cryptosporidium mouse genotype)P23基因亚克隆到pGEX-4T-1载体中,并用大肠杆菌BL21(DE3)为宿主菌诱导表达。以纯化的rP23为诊断抗原,建立隐孢子虫间接ELISA检测方法,观察其敏感性、特异性和重复性,并对临床血清样...; 关键词：隐孢子虫鼠基因型 P23基因原核表达间接ELISA

不同DNA提取方法对隐孢子虫卵囊PCR检测的影响被引量：5: 《中国动物传染病学报》2011年第1期57-61,共5页陈兆国米荣升周鹏黄燕张国恩苏庆美秦培兰呼高伟林矫矫; 上海市科技兴农重点攻关项目[沪农科攻字(2005)第3-4号];国家"十一五"高技术研究发展计划863项目(2006AA10A207);国家"十一五"科技支撑计划项目(2007BAD40B05); 为了提高隐孢子虫PCR检测的敏感性和效率,采用10种基因组DNA提取方法,对隐孢子虫卵囊DNA进行提取,对提取的DNA进行nested PCR扩增。经过3次重复试验,结果显示,Chelex 100法、FTA试纸法和Wizard DNAClean-Up System试剂盒法敏感性最高,...; 关键词：隐孢子虫 DNA 提取

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