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检 索 范 例 :范例一: (K=图书馆学 OR K=情报学) AND A=范并思 范例二:J=计算机应用与软件 AND (U=C++ OR U=Basic) NOT M=Visual
作 者:索娜[1] 刘佳[1] 刘梅[1] 王雪强[1] 王於建[1] 肖红梅[1] 周光宏[1]
机构地区:[1]国家肉品质量安全质量控制工程技术研究中心,南京农业大学食品科技学院,江苏南京210095
出 处:《食品科学》2013年第12期217-222,共6页Food Science
基 金:中央高校基本科研业务费专项(KYZ201156);江苏省大学生实践创新计划项目(JSS1125);南京农业大学SRT计划项目(1118A09)
摘 要:建立米饭和米酒中Bt基因环介导等温扩增技术(LAMP)检测方法。以抗虫Bt基因(GeneBank登录号Y09787)为研究对象,利用LAMP技术,针对Bt基因的6个区域设计4条特异性引物,并对镁离子浓度、Bst DNA聚合酶添加量、反应温度、反应时间等扩增条件及体系的特异性、检测灵敏度进行探索。结果表明:成功建立了米饭和米酒的LAMP定性检测方法。所建立的方法能够简便、快速、有效的检测米饭和米酒中的Bt基因,检测限为0.005%。该LAMP检测方法具有高度的特异性及灵敏度,不需要特殊仪器,结果可靠。We developed a loop-mediated isothermal amplification (LAMP) method for the detection ofBt gene in cooked rice and rice wine. Bt gene (GeneBank accession number Y09787) was amplified by a set of four special primers that were designed according to six regions of the target gene. We optimized the reaction conditions Mg2+ concentration, Bst DNA polymerase concentration, temperature and time. We also explored the specificity and sensitivity of the reaction. The results showed that the LAMP reaction system allowed easy and effective detection of Bt gene with a high specificity and sensitivity. The limit of detection was 0.005%. The LAMP detection method is specific, sensitive and reliable without need for special instruments.
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