N-乙酰神经氨酸醛缩酶基因在大肠杆菌中的高效表达  

High-efficiency Expression of N-Acetylneuraminic Lyase Gene in Escherichia coli

作　　者：李春[1] 戚晓熙[1] 杨鹤[1] 龚雅丽[1] 祁昕[1] 梁婉婷[1] 刘丽波[1] 

机构地区：[1]东北农业大学乳品科学教育部重点实验室食品学院,哈尔滨150030

出　　处：《中国食品学报》2015年第8期71-77,共7页Journal of Chinese Institute Of Food Science and Technology

基　　金："十二五"国家科技支撑计划课题(2011BAD09B0304);国家自然科学基金项目(31301519);黑龙江科技厅面上项目(C201134)

摘　　要：以大肠杆菌TG1的染色体总DNA为模板,通过引物设计和PCR扩增,克隆获得编码Neu5Ac醛缩酶基因(nanA)的片段;以p ET28(b)构建的nanA基因重组质粒p ET28(b)-nanA转化大肠杆菌BL21(DE3),达到高产N-乙酰神经氨酸醛缩酶的目的。在得到的转化子大肠杆菌BL21(DE3)/pNA1中,nanA基因受lac启动子控制,为IPTG或乳糖所诱导表达。此工程菌产酶量在浓缩后达到6.13mg/m L。Using chromosomal DNA of E. coli TG1 as template, the gene （nanA） coding N-Acetylneuraminic lyase is obtained and amplified through primer design and PCR technique. The recombinant plasmid with the vector pET28 （b） and the nanA transforms E. coli BI21 （DE3） to obtain the engineered strain that has a high expression of N-Acetylneu- raminic lyase. The nanA in transformant E. coli BL21（DE3）/pNAI is controlled by the lac promoter with the induction of IPTG or laetose. This strain has a concentrate expression up to 6.13mg/mL of N-Acetylneuraminic lyase.

关 键 词：大肠杆菌 N-乙酰神经氨酸醛缩酶 工程菌 基因表达 

分 类 号：Q78[生物学—分子生物学]