国家自然科学基金(90412015)

作品数：33被引量：117H指数：6
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相关期刊：《广东农业科学》《河南工业大学学报（自然科学版）》《细胞与分子免疫学杂志》《大连理工大学学报》更多>>
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重组纤维素酶E4酶活性改变的初步研究
《广东农业科学》2013年第9期150-154,共5页葛洪 曹以诚 区镜深 李军 
国家自然科学基金(90412015);教育部中国网格计划生物信息网格平台子项目(B12137040130)
纤维素酶E4是一种噬温的丝状土壤放线菌Thermomonospora fusca分泌的一种特殊纤维素酶,对细菌微结晶纤维素(BMCC)有较高的活性,可与T.fusca中典型的外切酶和内切酶协同作用。初步研究显示,其不同底物水解活性与结合域(CBD)有很大关系,...
关键词：纤维素酶 结合域 重组质粒 酵母GS115 
黄曲霉毒素B1致癌毒性相关基因的生物信息学分析被引量：11
《现代食品科技》2013年第8期1994-1998,2010,共6页李力 曹以诚 区镜深 毛小帆 
国家自然科学基金重大研究项目(90412015);教育部中国网格计划生物信息网格平台子项目(B12137040130)
黄曲霉毒素是广泛存在于食品中的对人类危害最大的、最常见的霉菌毒素,其中黄曲霉毒素B1是致癌毒性最强的一种。为了筛选与黄曲霉毒素B1致癌作用密切相关的基因,利用生物信息学技术对从GEO数据库中下载的三组相关的人基因组芯片实验数...
关键词：黄曲霉毒素 致癌物 基因表达谱 聚类分析 
靶向TTF-1的siRNA腺相关病毒载体组装验证
《华南理工大学学报（自然科学版）》2012年第1期114-119,共6页高强 曹以诚 杨磊 
国家自然科学基金重大研究项目(90412015);教育部中国网格计划生物信息网格平台子项目(B12137040130);广州市科技攻关计划项目(2005Z12E4023)
为了解决靶向TTF-1的siRNA导入肺腺癌细胞的问题,设计了3条靶向NCI-H1975细胞TTF-1基因的siRNA,并将其分别构建到腺相关病毒上.在293细胞中装配病毒,收获病毒原初液后进行超滤浓缩、层析柱纯化,测定病毒滴度.重组病毒感染肺腺癌细胞系NC...
关键词：TTF-1 腺相关病毒 小分子干扰RNA 载体 感染验证 
肝脏特异性表达载体的构建及Western blotting检测被引量：1
《中国畜牧兽医》2011年第1期100-104,共5页张利涛 刘慧琳 曹以诚 
国家自然科学基金重大研究计划项目(90412015)
研究靶向于肝细胞的组织特异性siRNA,实现siRNA基因治疗的组织特异性,可用于特异性治疗乙肝,突破RNA干扰技术在临床应用的一大障碍。用靶向于EGFP的siRNA(以下简称siEGFP)替代靶向于乙肝病毒保守区的siRNA,构建可以在肝细胞中特异性表...
关键词：RNAI 组织特异性siRNA 肝脏特异性 EGFP WESTERN BLOTTING 
特异性siRNA质粒的构建及其抑制癌细胞中mcl-1表达的研究被引量：2
《现代食品科技》2010年第8期789-792,783,共5页徐爱群 曹以诚 区镜深 张珍武 
国家自然科学基金重大研究项目(90412015);教育部中国网格计划生物信息网格平台子项目(B12137040130);国家科技基础条件平台项目(2005DKA64001);科技部基础学科平台建设生物计算网络平台项目(2005DKA64001);广州市科技攻关计划(2005Z12E4023)资助项目
本文构建了靶向mcl-l基因构建的特异性siRNA重组质粒,在细胞水平检测的其抑制效果,并筛选出能高效抑制mcl-l基因表达的siRNA重组质粒,针对mcl-1的特异性siRNA重组质粒,将其转染到人肝癌细胞HepG2,用Rt-PCR(实时荧光定量PCR)方法和Wester...
关键词：肝癌 MCL-1 基因沉默 实时荧光定量PCR 
RNA干扰技术抑制乳腺癌细胞系MDA-MB-231中SATB1的表达
《现代食品科技》2010年第7期669-672,687,共5页张瑞 曹以诚 张珍武 杜淑敏 徐爱群 
国家自然科学基金重大研究计划(编号:90412015);教育部中国网格计划生物信息网格平台子项目(编号:B1-137040130)
构建含有靶向satb1基因的siRNA质粒,体外观察对乳腺癌细胞系MDA-MB-231的SATB1mRNA以及蛋白质表达的影响。设计合成三对靶向人源satb1基因的siRNA,并分别克隆在质粒载体上,在脂质体的介导下转染高表达SATB1的乳腺癌细胞系MDA-MB-231。运...
关键词：乳腺癌 SABT1 SIRNA 基因表达 
Rspo1-EGFP重组腺相关病毒载体的构建
《现代食品科技》2009年第9期993-997,共5页杜淑敏 曹以诚 李新建 
国家自然科学基金重大研究计划(No.90412015);国家科技基础条件平台(2005DKA64001)资助项目
本文通过构建携带Rspo1-EGFP融合基因的重组腺相关病毒载体,包装出含有目标基因的重组腺相关病毒。首先利用PCR从cDNA文库中把Rspo1基因扩增出来,插入到pcDNA6-EGFP中EGFP的上游形成融合基因Rspo1-EGFP。采用AAVHelper-free包装系统,将...
关键词：R-SPONDIN 1 增强型绿色荧光蛋白 腺相关病毒 流式细胞技术 
49P(del)点突变提高中性纤维素内切酶EGV热稳定性的初步研究被引量：2
《现代生物医学进展》2009年第14期2634-2636,共3页方芳 曹以诚 陈晓曦 曾炳佳 
国家自然科学基金重大研究计划项目(90412015);教育部中国网格计划生物信息网格平台子项目(B1-137040130);科技部基础学科平台建设生物计算网络平台项目(2005DKA64001)
目的:探讨利用点突变方法改善EGV热稳定性的可能性和有效性。方法:对来源于Melanocarpus albomyces endoglucanase的耐热性纤维素酶maEG进行同源建模和序列比较,删除49位脯氨酸49P(del)进行定点突变,并将得到的突变体在毕氏酵母X33中表...
关键词：中性纤维素内切酶 49P(del) 定点突变 热稳定性 
基于语义分析的垂直搜索网络蜘蛛被引量：8
《计算机工程与设计》2008年第18期4662-4665,4812,共5页罗立宏 陈志 
国家自然科学基金项目(90412015)
通用搜索引擎数据量庞大,但查询结果不够准确。分类目录正好相反。为了综合两者优势,对垂直搜索引擎进行了研究和分析。着重研究了垂直搜索引擎的核心模块——智能网络搜索蜘蛛。提出了搜索分析的新概念——规则。研究了蜘蛛中定义支持...
关键词：计算机应用 互联网 搜索引擎 垂直搜索 网络蜘蛛 语义分析 
共表达siRNA和hIL-12的新型乙肝多表位DNA疫苗的研究被引量：2
《中国生物工程杂志》2008年第8期36-42,共7页黄镜贤 曹以诚 杜正平 陶嫦立 杨化强 
国家自然科学基金重大研究计划(No90412015);教育部中国网格计划生物信息网格平台子项目(B1-137040130);国家科技基础条件平台项目(2005DKA64001)资助项目
目的:构建含有靶向乙肝表面抗原(HBsAg)基因的siRNA、乙肝复合多表位抗原基因和hIL-12共质粒表达的新型DNA疫苗,并在HepG2细胞中检测siRNA的效果以及各基因的表达。方法:设计并合成复合多表位HBV抗原基因,将其与增强型绿色荧光蛋白(EGFP...
关键词：乙型肝炎 DNA疫苗 多表位抗原 hIL-12 SIRNA 
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