国家自然科学基金(30570142)

作品数：14被引量：44H指数：5
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相关期刊：《化工学报》《微生物学通报》《食品与发酵工业》《遗传》更多>>
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利用荧光蛋白研究产甘油假丝酵母胞浆3-磷酸甘油脱氢酶基因CgGPD启动子被引量：7
《微生物学报》2008年第8期1013-1018,共6页丁春生 饶志明 诸葛斌 沈微 陈献忠 方慧英 诸葛健 
国家自然科学基金(30570142,20676053);国家“863计划”(2006AA020103);江苏省青年科技创新人才(学术带头人)基金(BK2006504);长江学者和创新团队发展计划资助(IRT0532)~~
【目的】克隆产甘油假丝酵母(Candida glycerinogenes)胞浆3-磷酸甘油脱氢酶基因CgGPD的启动子(PCggpd),并通过报告基因gfp的差异表达来研究葡萄糖浓度对PCggpd在酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)中的诱导特性。【方法】采用PCR扩增...
关键词：产甘油假丝酵母 3-磷酸甘油脱氢酶启动子 绿色荧光蛋白 酿酒酵母 葡萄糖 
优化简并引物PCR克隆Candida glycerinogenes 3-磷酸甘油脱氢酶基因片段
《食品与生物技术学报》2008年第4期91-96,共6页陈献忠 饶志明 沈微 诸葛斌 方慧英 王正祥 诸葛健 
国家自然科学基金项目(30570142)
为了从工业生产菌株耐高渗产甘油假丝酵母(Candida glycerinogenes)克隆甘油合成的限速酶编码基因胞浆NAD+-3-磷酸甘油脱氢酶基因(ctGPD),对不同酵母和其他真核生物的NAD+-3-磷酸甘油脱氢酶进行比对,分析氨基酸和核苷酸的保守序列,设计...
关键词：PCR NAD^+依赖3-磷酸甘油脱氢酶 产甘油假丝酵母 克隆 简并引物 
产甘油假丝酵母甘油合成关键酶编码基因的克隆被引量：4
《遗传》2008年第4期508-514,共7页陈献忠 方慧英 沈微 饶志明 诸葛斌 王正祥 诸葛健 
国家自然科学基金项目(编号:30570142,20676053);长江学者和创新团队发展计划项目资助(编号:IRT0532)~~
产甘油假丝酵母(Candida glycerinogenes)作为优良的甘油生产菌株已经成功应用于工业化生产。但相对于酿酒酵母,该菌株的耐高渗机理和甘油代谢的分子机制还不甚清楚。本文根据已公布的3-磷酸甘油脱氢酶基因的序列信息,设计出一组寡核苷...
关键词：产甘油假丝酵母 3-磷酸甘油脱氢酶 基因克隆 甘油合成 
以Zeocin抗性基因为选择标记的Candida glycerinogenes遗传转化被引量：3
《激光生物学报》2008年第2期176-180,共5页陈献忠 饶志明 沈微 方慧英 王正祥 诸葛健 
国家自然科学基金项目(30570142)
为从分子水平上阐释产甘油假丝酵母(Candida glycerinogenes)高产甘油机理,建立一种方便可行的遗传转化系统是十分必要的。与G418和潮霉素等抗生素相比,Zeocin抗生素对C.glycerinogenes具有较低的致死浓度。以pGAPZb作为构建整合载体的...
关键词：产甘油假丝酵母 遗传转化系统 电击转化 整合质粒 
产甘油假丝酵母烯醇化酶基因的克隆及序列分析
《食品与生物技术学报》2008年第2期92-97,共6页姚雁 沈微 饶志明 王正祥 诸葛健 
国家自然科学基金项目(30570142)
从产甘油假丝酵母(Candida glycerinogenes)基因文库中分离了一个含烯醇化酶基因(CgENO1)的克隆子。插入片段全长2 456 bp,包含一段1 314 bp的没有内含子的蛋白质编码区,编码一个含438个氨基酸残基的多肽链,其氨基酸序列与来源于酿酒酵...
关键词：产甘油假丝酵母 烯醇化酶 序列分析 
根癌农杆菌介导工业化产甘油假丝酵母的遗传转化被引量：5
《应用与环境生物学报》2007年第6期868-871,共4页饶志明 张君胜 沈微 方慧英 诸葛健 
国家自然科学基金(No30570142);江苏省青年科技创新人才(学术带头人)基金(BK2006504);教育部长江学者和创新团队发展计划资助(IRT0532)资助~~
通过构建质粒pCAM3300-zeocin,将其电击转化到根癌农杆菌LBA4404中.将含有目的质粒pCAM3300-zeocin的根癌农杆菌和工业化产甘油假丝酵母(Candida glycerinogenes)WL2002-5共培养,利用zeocin抗性基因为筛选标记,实现了pCAM3300-zeocin对...
关键词：产甘油假丝酵母 转化 根癌农杆菌 zeocin基因 
产甘油假丝酵母基因CgZWF片段的克隆与序列分析
《安徽农业科学》2007年第11期3161-3162,共2页张永光 饶志明 沈微 方慧英 诸葛健 
江苏省青年科技创新基金资助项目(BK2006504);国家自然科学基金资助项目(30570142)
以产甘油假丝酵母基因组DNA为模板,通过简并PCR和反向PCR扩增得到了一个长为1 244 bp片段,并将其克隆到pMD18-Tvector。基因序列分析表明,此片段编码的氨基酸序列与Kluyveromyces lactis的G6pdp同源性最高(62.7%),表明已经得到编码葡萄...
关键词：产甘油假丝酵母 葡萄糖 6-磷酸脱氢酶基因 克隆 
REMI介导电转化产甘油假丝酵母
《微生物学通报》2007年第5期848-851,共4页张永光 沈微 饶志明 方慧英 诸葛健 
江苏省青年科技创新基金资助项目(NoBK2006504);国家自然科学基金资助项目(No30570142)
为了分离耐高渗和甘油代谢相关基因,以Zeocin为选择标记,利用REMI技术电转化产甘油假丝酵母Candida glycerinogenes。考察了7种限制性内切酶对转化的影响,选择HindIII进一步优化了转化的几个条件。结果表明,在OD600≈1.3时收集细胞,在1....
关键词：产甘油假丝酵母 遗传转化 REMI 
gsh 1基因的克隆及其在巴斯德毕赤氏酵母中的表达被引量：5
《应用与环境生物学报》2007年第2期257-260,共4页饶志明 艾丽静 沈微 方慧英 诸葛健 
国家自然科学基金(No.30570142);江苏省青年科技创新人才(学术带头人)基金(BK2006504);教育部长江学者和创新团队发展计划;江南大学工业生物技术教育部重点实验室开放课题(KLIB-KF-200507)资助~~
利用PCR技术克隆了来源于Saccharomyces cerevisiae ALJ036的γ-L-谷氨酰-L-半胱氨酸合成酶(γ-glutamyl-cysteine synthetase)编码基因gsh1,连接多拷贝表达载体pGAPZA,转化Pichia pastorisx-33,构建了重组菌P.pastorisx-33(pGAPZA-gsh...
关键词：GSH 1 巴斯德毕赤氏酵母 克隆 表达 谷胱甘肽 γ- 谷氨酰半胱氨酸合成酶 
产谷胱甘肽重组巴斯德毕赤氏酵母发酵条件的研究被引量：3
《食品与发酵工业》2007年第5期1-4,共4页饶志明 艾丽静 沈微 方慧英 诸葛健 
国家自然科学基金(30570142);江苏省青年科技创新人才(学术带头人)基金(BK2006504)资助项目
考察了培养基组成及培养条件对重组巴斯德毕赤氏酵母(Pichia pastoris)x-33(pGAPZA-gsh 1)合成谷胱甘肽(GSH)的影响。优化后的培养基组成为:甘油30g/L、蛋白胨40g/L、酵母膏9g/L、半胱氨酸0.36 g/L、KH_2PO_4 3g/L;培养条件为:自然pH、...
关键词：重组酵母 谷胱甘肽 摇瓶 发酵罐 
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