国家自然科学基金(30070670)

作品数：13被引量：26H指数：3
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相关作者：鲍朗张会东胡昌华晏菊芳李学敏更多>>
相关机构：四川大学华西医科大学西南师范大学石河子大学更多>>
相关期刊：《生命科学研究》《中国人兽共患病学报》《中华微生物学和免疫学杂志》《微生物学报》更多>>
相关主题：钩端螺旋体赖型钩端螺旋体强毒新基因抑制消减杂交更多>>
相关领域：医药卫生生物学更多>>
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问号钩端螺旋体毒力基因mviN的表达及细胞毒性作用研究
《中国人兽共患病学报》2007年第1期23-26,共4页王中平 鲍朗 张会东 商正玲 钟琪 郝牧 朱海龙 
国家自然科学基金资助项目(30070670)
目的克隆表达问号钩端螺旋体毒力基因mviN并观察表达产物对血管内皮细胞ECV304及肺上皮细胞A549的毒性作用。方法将mviN基因插入原核表达载体pET32a(+),构建重组质粒pET-mviN,转化大肠杆菌BL21(DH3)以高效表达携带组氨酸标签的Trx-MviN...
关键词：mviN 钩端螺旋体 毒力 XTT法 细胞凋亡率 
中国强毒赖型钩端螺旋体新基因OmpL17的表达及其免疫原性被引量：2
《生物医学工程学杂志》2005年第2期250-253,共4页朱庆平 赵计林 鲍朗 张会东 赵明才 黎光 
国家自然科学基金资助项目 (3 0 0 70 670)
将Omp L17基因克隆于p GEX- 1λT载体,在大肠杆菌JM10 9中表达分子量约为5 4 KDa的GST-Omp L17融合蛋白,凝血酶切割后得到了大小约2 8KDa的Omp L17蛋白。用纯化的Omp L17蛋白免疫大白兔,制备了高滴度的特异性抗体(1∶4 896 )。本研究获...
关键词：OmpL17 钩体外膜蛋白 GST融合表达 免疫原性 赖型钩端螺旋体 新基因 特异性抗体 中国 融合蛋白 JM109 
赖型钩端螺旋体毒力相关蛋白InvA的表达及其促细胞增殖效应被引量：1
《中华微生物学和免疫学杂志》2004年第11期866-869,共4页朱庆平 鲍朗 张会东 赵计林 龙洋 吴悦涵 赵明才 
国家自然科学基金资助项目 ( 3 0 0 70 670 )
目的　在大肠杆菌中表达赖型钩端螺旋体毒力相关蛋白InvA ,并观察该蛋白对ANA 1细胞的增殖作用。方法　将invA基因克隆于pET32a(+)载体 ,在大肠杆菌BL2 1(DE3)中表达带组氨酸标签的Trx InvA融合蛋白 ,经亲和层析获得纯化Trx InvA蛋白。...
关键词：原核表达载体 细胞增殖 相关蛋白 ANA 钩端螺旋体 融合蛋白 大肠杆菌 纯化 亲和层析 基因克隆 
致病钩体表层膜蛋白新基因(Lslp)的克隆表达及免疫原性研究
《微生物学报》2004年第4期500-503,共4页胡昌华 鲍朗 谢建平 张会东 
国家自然科学基金项目 ( 3 0 0 70 670 ) ;重庆市应用基础研究项目 ( 2 0 0 2 7481)~~
克隆表达钩端螺旋体表层膜蛋白新基因Lslp并分析表达产物的免疫原性。根据前期研究得到的致病钩体新基因Lslp(GenBankAF32 5 80 7)的序列设计引物 ,在 6株致病钩体中扩增Lslp基因并测序。以BamHⅠ酶切Lslp和pGEX 1 λT ,构建重组质粒...
关键词：克隆 表达 钩端螺旋体 表层膜蛋白 基因 免疫原性 
致病钩端螺旋体特异消减片段的序列测定与分析被引量：1
《西南师范大学学报（自然科学版）》2004年第3期434-438,共5页胡昌华 鲍朗 毕小君 
国家自然科学基金资助项目(30070670);重庆市应用基础研究资助项目(2002-7481).
对24个已鉴定的赖型致病钩端螺旋体特异消减片段进行DNA序列测定和生物信息学分析.结果显示,片段两端皆含有AluⅠ酶切位点,片段大小为149～1506bp,平均480bp,GC含量平均为36 63%.其中6个序列无任何同源匹配序列,提示可能来自新基因;18...
关键词：钩端螺旋体 差异消减片段 序列测定 生物信息学 
赖型钩端螺旋体毒力株新基因差异片段筛选和核苷酸序列分析被引量：2
《中国病理生理杂志》2003年第2期185-188,共4页赵计林 鲍朗 张会东 
国家自然科学基金资助项目 (No .30 0 70 670 )
目的 :筛选致病钩端螺旋体赖型 0 1 7株毒力相关基因DNA差异片段 ,并进行核苷酸及基因信息学分析。方法 :提取钩端螺旋体 0 1 7株基因组DNA ,根据抑制消减杂交 (SSH)筛选的 0 1 7株特有的 1 53bp核苷酸短片段 ,采用盒式连接半巢式PCR技...
关键词：钩端螺旋体属 聚合酶链反应 碱基序列 基因 
钩端螺旋体赖型017鞭毛钩相关蛋白K基因的克隆及序列分析
《生命科学研究》2002年第S1期101-107,共7页于向华 鲍朗 谢勇恩 张会东 
国家自然科学基金资助项目(30070670)
在以抑制消减杂交比较强毒株赖型钩端螺旋体017株和无毒株双曲钩体Patoc　I株　的基因组差异时,获得了一系列仅存在于强毒株而无毒株缺如的差异片段.选取差异片段AF325810设计特异性引物,以赖型钩端螺旋体017株基因组DNA为模板,进行巢式...
关键词：钩端螺旋体 巢式PCR 鞭毛钩相关蛋白K(flgK) 生物信息学 
中国强毒钩端螺旋体膜蛋白基因的真核表达及基因免疫
《中华微生物学和免疫学杂志》2002年第4期407-410,共4页晏菊芳 鲍朗 胡昌华 李学敏 张会东 
国家自然科学基金资助项目 ( 30 0 70 6 70 ) ;四川省学术带头人基金资助项目
目的　检测含有强毒赖型钩体OmpL1外膜蛋白基因的 2个重组质粒pBC OmpL1和pcDNA3 OmpL1在哺乳动物细胞中的表达 ,及其作为DNA疫苗诱导小鼠体液免疫应答的效果。方法　采用脂质体转染法 ,以重组质粒转染COS7细胞 ,通过抗性标志筛选稳定...
关键词：膜蛋白基因 钩端螺旋体 基因表达 DNA疫苗 免疫应答 重组质粒 特异性抗体 
赖型钩端螺旋体外膜蛋白真核表达载体构建及表达的初步研究
《中国人兽共患病杂志》2002年第4期23-27,共5页晏菊芳 鲍朗 胡昌华 李学敏 张会东 
国家自然科学基金 (批准号 :3 0 0 70 670 );四川省学术带头人基金资助
目的　测定所克隆的强毒力赖型钩端螺旋体OmpL1基因的序列 ,构建能够在哺乳动物细胞中表达赖型钩体OmpL1外膜蛋白的重组质粒。 方法　首先对自行构建的含有赖型钩端螺旋体OmpL1基因的重粗质粒 pAC -OmpL1进行插入片段的序列分析 ,然后...
关键词：钩端旋体 质粒 真核细胞 基因序列 基因表达 钩体病 
中国强毒力赖型钩端螺旋体外膜蛋白基因的克隆表达及对大肠杆菌活力的影响被引量：4
《中国病理生理杂志》2001年第8期705-709,共5页鲍朗 晏菊芳 胡昌华 谢勇恩 邱洪宇 张会东 
国家自然科学基金资助项目 (No .30 0 70 6 70 );四川省学术技术带头人培养基金资助项目
目的 :构建表达致病性赖型 0 17株钩端螺旋体OmpL1外膜蛋白的真核 -原核穿梭表达载体 ,并在原核细胞中表达出目的蛋白。方法 :用PCR方法从 0 17株钩体基因组中钓出OmpL1蛋白基因 ,酶切纯化后与质粒pBK -CMV连接 ,通过电泳、限制性内切...
关键词：钩端螺旋体 基因表达 质粒 克隆 大肠杆菌 外膜蛋白 
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