国家自然科学基金(30230270)

作品数：13被引量：27H指数：2
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相关作者：张改平张红周继勇王丽郭军庆更多>>
相关机构：浙江大学河南省动物免疫学重点实验室河南农业大学河南省农业科学院更多>>
相关期刊：《浙江大学学报（农业与生命科学版）》《河南农业科学》《生物化学与生物物理进展》《河南农业大学学报》更多>>
相关主题：遗传进化分析遗传进化传染性法氏囊病毒克隆CDNA更多>>
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传染性法氏囊病病毒凋亡调节蛋白表达细胞株的建立
《中国兽医学报》2008年第3期247-251,256,共6页叶菊秀 李玲燕 陈庆新 周继勇 
国家自然科学基金重点资助项目(30230270)
构建传染性法氏囊病病毒非结构蛋白基因（NS）的重组表达质粒pEGFP-C2-NS,然后在LipofectamineTM 2000介导下转染Vero细胞,活细胞状态下直接观察EGFP-NS蛋白在细胞中的表达与定位。结果显示,转染后4~5 h出现荧光蛋白表达,24 h达到高峰,...
关键词：传染性法氏囊病病毒 非结构蛋白(NS) 绿色荧光蛋白 VERO细胞 
鸡B淋巴细胞cDNA T7噬菌体表达文库的构建与鉴定被引量：2
《细胞与分子免疫学杂志》2007年第12期1186-1188,共3页张改平 张红 郭军庆 王选年 乔松林 郝慧芳 王丽 
国家自然科学基金重点资助项目(30230270)
目的:构建鸡B淋巴细胞cDNAT7噬菌体表达文库并对文库质量进行鉴定。方法:利用oligo(dT)-纤维素亲和层析从SPF雏鸡法氏囊细胞制备mRNA,合成的双链cDNA定向克隆到T7EcoR I/HindIII载体臂,包装并构建cDNA表达文库。对文库进行滴度测定和重...
关键词：鸡B细胞 17噬菌体 CDNA表达文库 
鸡免疫球蛋白λ轻链绿色荧光蛋白重组分子在COS7细胞的分泌表达
《河南农业大学学报》2007年第2期204-206,241,共4页张红 刘钧珂 张改平 宋海涛 王青 段艳华 赵光辉 
国家自然科学基金重点项目(30230270)
将鸡Igλ轻链信号肽与pEGFP-C1载体的绿色荧光蛋白N端融合产生带有信号肽的中间载体pEGFP-C1-SP,通过对鸡Igλ轻链基因的定向克隆,构建了带有纯化标签的鸡Igλ轻链绿色荧光蛋白真核表达载体.转染COS7细胞后,荧光显微镜观察及Western blo...
关键词：鸡Igλ轻链 绿色荧光蛋白 COS7细胞 分泌表达 
鸡传染性法氏囊病研究进展被引量：4
《郑州牧业工程高等专科学校学报》2007年第1期23-26,共4页宋海涛 张红 段艳华 赵光辉 张改平 
国家自然科学基金重点项目(30230270)
鸡传染性法氏囊病（Infectious Bursal Disease，IBD）是由传染性法氏囊病毒（IBDV）引起的鸡的一种高度接触性传染病，该病主要感染3～6周龄的青年鸡，病毒在法氏囊的B淋巴细胞中迅速繁殖，损伤法氏囊的B淋巴细胞，引起严重的免疫抑制...
关键词：鸡传染性法氏囊病 传染性法氏囊病毒 B淋巴细胞 接触性传染病 免疫力下降 免疫抑制 生产性能 免疫应答 
鸡免疫球蛋白基因结构与抗体多样性产生的分子机制被引量：2
《河南农业科学》2007年第2期102-105,共4页张红 刘钧珂 张改平 王丽 席俊 宋海涛 
国家自然科学基金重点项目资助(30230270)
鸡具有独特的免疫球蛋白基因结构,抗体多样性产生机制有别于啮齿动物和灵长类动物。种系基因重排产生了有限的抗体基因类型,抗体多样性的产生机制主要源于体细胞的基因转变,一种由胞嘧啶核苷脱氨酶(AID)启动的同源重组,V基因上游的假基...
关键词：鸡 免疫球蛋白基因 基因转变 抗体多样性 AID E2A 
鸡Igλ轻链绿色荧光蛋白融合分子在COS7细胞膜的表达
《河南农业科学》2006年第11期102-104,109,共4页张红 宋海涛 张改平 邢广旭 赵东 杨继飞 柴书军 郝青梅 
国家自然科学基金重点项目资助(30230270)
将牛IgG Fc受体γRⅡ的跨膜区序列嵌合入鸡Igλ轻链基因中,并将鸡Igλ轻链信号肽与Pegfp-C1载体的绿色荧光蛋白N端融合产生带有信号肽的中间载体Pegfp-C1-SP。鸡Igλ轻链基因嵌合分子定向克隆入载体的多克隆位点,构建了带有信号肽的鸡I...
关键词：鸡Igγ轻链 牛IgG Fc受体γR Ⅱ跨膜区 COS7细胞 GFP融合蛋白 
牛IgG Fc受体Ⅱ胞外区在大肠杆菌中的表达及特性鉴定被引量：1
《河南农业科学》2005年第7期86-89,共4页张改平 王丽 李青梅 张华 乔松林 乔宏星 席俊 王选年 郭军庆 
国家杰出青年基金项目(30125035);国家自然科学基金重点项目(30230270)
从牛肺巨噬细胞cDNA文库中扩增编码牛IgGFc受体Ⅱ(boFcγRⅡ)胞外区基因,PCR产物经EcoRⅠ和HindⅢ双酶切后,插入原核表达载体pET28a的T7启动子下游,构建重组表达质粒pETboRⅡ。以pETboRⅡ转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达。SDS-PAGE...
关键词：牛IgG Fc受体Ⅱ 胞外区基因 原核表达 
牛FcγRⅠ(CD64)GST融合蛋白在大肠杆菌中的表达被引量：2
《河南农业科学》2005年第6期79-82,共4页张改平 乔松林 李青梅 王丽 张红 郭军庆 王选年 夏春 
国家杰出青年基金项目 (30 12 5 0 35 ) ;国家自然科学基金重点项目 (30 2 30 2 70 )
采用PCR技术从牛巨噬细胞cDNA文库中扩增了牛的高亲和力IgGFc受体FcγRⅠ,测序结果显示与已报道的牛FcγRⅠ序列一致。在牛FcγRⅠ成熟蛋白胞外环区两端分别合成带有BamHⅠ、XhoⅠ限制酶切位点的引物,用PCR扩增后亚克隆到GST融合蛋白表...
关键词：牛FcγRⅠ(CD64) GST融合蛋白 表达 
PCR克隆高GC含量牛Fcγ2R cDNA被引量：2
《河南农业科学》2005年第5期67-69,共3页乔松林 张改平 王丽 张红 张华 付彦峰 郭军庆 王选年 夏春 
国家杰出青年基金项目 ( 30 12 5 0 35 );国家自然科学基金重点项目 ( 30 2 30 2 70 )
根据已发表的牛Fcγ2RcDNA序列设计1对引物,采用改进的RT -PCR技术从牛外周血淋巴细胞总RNA中扩增出了GC含量为6 4%的牛Fcγ2RcDNA分子,克隆片段全长795个核苷酸,含有一个完整的开放阅读框,编码2 6 5个氨基酸,和已报道的序列相比存在3...
关键词：牛IgG FCγ2R 克隆 
SARS-CoV核衣壳蛋白的体外表达及单克隆抗体功能鉴定
《浙江大学学报（农业与生命科学版）》2005年第2期232-236,共5页陈洪勋 严兴成 应建跃 吴建祥 周继勇 
国家自然科学基金资助项目(30230270).
为对SARSN蛋白的功能进行研究,并建立快速、方便的诊断方法,将已克隆、构建成功的重组质粒PGEX-4T/N转化至E.coliBL21中,IPTG诱导表达,表达产物与兔源GST多抗在66kD处有很强的反应性,融合蛋白GST-N分别通过GSTrapFF1mL纯化柱和割胶纯化...
关键词：严重急性呼吸综合征(SARS) 冠状病毒 N蛋白 单克隆抗体 
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