国家自然科学基金(30471292)

作品数：11被引量：121H指数：6
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相关期刊：《畜牧兽医学报》《中国农业科学》《中国兽医学报》《华中农业大学学报》更多>>
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猪产毒多杀性巴氏杆菌皮肤坏死毒素的细胞毒性及其抗体的制备被引量：3
《华中农业大学学报》2010年第4期479-483,共5页胡军勇 汤金梅 汤细彪 杨明柳 赵战勤 吴斌 陈焕春 
国家自然科学基金项目(30471292)资助
将猪产毒多杀性巴氏杆菌(toxigenicPasteurella multocida,T+Pm)增菌后经超声波破碎,用DEAE-52阴离子交换柱和Sephadex G-200处理,提纯天然多杀性巴氏杆菌皮肤坏死毒素(Pasteurella multocidatoxin,PMT)。经Western blot和细胞毒性试验...
关键词：产毒多杀性巴氏杆菌 多杀性巴氏杆菌皮肤坏死毒素 生物学活性 类毒素菌苗 毒素抗体 
猪支气管败血波氏杆菌菌毛fimD基因的克隆表达及间接ELISA检测方法的建立被引量：2
《畜牧兽医学报》2009年第1期98-102,共5页何华 裴洁 吴斌 赵战勤 张建民 罗勇 向敏 卢顺 
国家自然科学基金项目(30471292);国家"863计划"(2006AA10A206)
参照GenBank上支气管败血波氏杆菌的菌毛fimD基因序列(X75811),设计1对引物,从本实验室分离鉴定的猪源支气管败血波氏杆菌中扩增出fimD编码区1 098 bp的片段,将其克隆至原核表达载体pET-28a,转化到大肠杆菌BL21(DE3)中进行融合表达。SDS...
关键词：支气管败血波氏杆菌 fimD 克隆 表达 ELISA 
猪源支气管败血波氏杆菌的分离鉴定及生物学特性研究被引量：31
《中国农业科学》2008年第12期4209-4217,共9页赵战勤 裴洁 薛云 汤细彪 吴斌 何华 周学利 程相朝 何启盖 陈焕春 
国家自然科学基金项目(30471292);国家科技支撑计划(2006BAD06A12,2006BAD06A18)
【目的】探讨2003～2006年间支气管败血波氏杆菌(Bordetella bronchiseptica,Bb)在中国湖北等十余省市猪群中的流行病学分布和协同感染特性并对部分菌株进行生物学特性研究。【方法】采用病原菌的形态学观察、生化鉴定和PCR鉴定,从2 05...
关键词：支气管败血波氏杆菌 流行病学 协同感染 毒力因子 
检测多杀性巴氏杆菌毒素抗体的单抗竞争ELISA方法的建立被引量：8
《农业生物技术学报》2008年第4期555-561,共7页卢顺 向敏 吴斌 赵战勤 汤细彪 但汉并 张建民 何华 陈焕春 
国家自然科学基金项目(No.30471292)资助。
用纯化的产毒素多杀性巴氏杆菌(toxigenie Pasteurella multocida,T^+Pm)毒素基因片段的原核表达产物免疫小鼠(Mus muslucus)制备单抗,并利用表达蛋白和辣根过氧化物酶(HRP)标记的单抗AH12建立了竞争ELISA方法检测多杀性巴氏杆菌毒素抗...
关键词：多杀性巴氏杆菌毒素 单克隆抗体 单抗竞争ELISA 抗体检测 
猪源支气管败血波氏杆菌百日咳杆菌黏附素基因的原核表达及其抗体检测ELISA方法被引量：8
《微生物学报》2008年第3期330-336,共7页赵战勤 薛云 吴斌 汤细彪 陈焕春 李增强 胡睿铭 张建民 段龙川 
国家自然科学基金(30471292);国家“863计划”(2006AA10A206)~~
[目的]以猪源支气管败血波氏杆菌(Bordetella bronchiseptica,Bb)百日咳杆菌黏附素(PRN)基因的原核表达产物为抗原建立检测PRN抗体的间接ELISA方法。[方法和结果]利用谷胱甘肽-S-转移酶(GST)表达系统对PRN基因在大肠杆菌中进行融合表达...
关键词：支气管败血波氏杆菌 百日咳杆菌黏附素 ELISA 
重组百日咳杆菌黏附素蛋白免疫小鼠可完全抵抗支气管败血波氏杆菌的致死性感染被引量：3
《微生物学报》2008年第3期337-341,共5页赵战勤 薛云 吴斌 段龙川 陈焕春 汤细彪 胡睿铭 何华 李增强 
国家自然科学基金(30471292);国家“863计划”(2006AA10A206)~~
【目的】通过建立的小鼠呼吸道感染模型评价重组百日咳杆菌黏附素蛋白(GST-PRN)对小鼠的免疫保护效力。【方法和结果】在主动免疫保护试验中,GST-PRN免疫组小鼠能产生较高的PRN抗体水平,在使用3×LD50的支气管败血波氏杆菌HH0809株进行...
关键词：支气管败血波氏杆菌 百日咳杆菌黏附素 免疫原性 
重组产毒多杀性巴氏杆菌毒素PMT的N-端和C-端蛋白的生物学活性及免疫原性被引量：7
《微生物学报》2008年第2期213-219,共7页汤细彪 吴斌 赵战勤 邓永 何华 何启盖 陈焕春 
国家自然科学基金(30471292);湖北省科技攻关项目(2001AA201)~~
将5个toxA基因片段N1518、C2345、N3172、N3388和C2115分别克隆到合适的原核表达载体pET-28a(b,c)系统,其中pET28a-N1518和pET28b-C2115在大肠杆菌成功表达,获得大小分别为57kDa和78kDa的融合蛋白rPMT-N和rPMT-C,Western blot检测证实...
关键词：产毒多杀性巴氏杆菌 PMT 亚克隆 生物学活性 免疫原性 
应用巢氏PCR方法快速检测猪鼻拭子样品中产毒素多杀性巴氏杆菌被引量：5
《畜牧兽医学报》2007年第10期1083-1087,共5页汤细彪 吴斌 刘国平 杨明柳 罗勇 卢顺 陈焕春 
国家自然科学基金项目(30471292)
根据产毒素多杀性巴氏杆菌的toxA基因序列,设计了2对特异性引物,扩增的片段大小分别为864和447 bp,从而建立了一种能直接从猪鼻拭子中快速检测产毒素多杀性巴氏杆菌的巢氏PCR方法。该方法能检出26CFU菌量以上的模板DNA,且不能从猪的其它...
关键词：产毒素多杀性巴氏杆菌 toxA 鼻拭子 巢氏PCR 
猪源D型产毒素多杀性巴氏杆菌toxA基因的克隆与表达被引量：7
《中国兽医学报》2006年第3期271-274,共4页王大鹏 吴斌 周锐 唐先春 陈焕春 
国家自然科学基金资助项目(30471292);湖北省科技攻关项目(2001AA201)
皮肤坏死毒素(Dermonecrotictoxin,DNT)是产毒素多杀性巴氏杆菌(ToxigenicPasteurellamultocida,T+Pm)的主要毒力因子和保护性抗原。以猪源D型T+Pm的基因组DNA为模板,用PCR方法扩增得到了编码DNT的toxA全基因编码序列,共4019bp。将其克...
关键词：猪源D型产毒素多杀性巴氏杆菌 toxA基因 克隆 表达 
猪源多杀性巴氏杆菌ompH基因的克隆、表达被引量：11
《畜牧兽医学报》2005年第7期701-704,共4页吴斌 唐先春 陈焕春 王大鹏 
国家自然科学基金项目(30471292)
利用已分离的菌株030224HB,根据NCBI上的序列(U52208)设计了一对引物,用PCR方法扩增了猪源多杀性巴氏杆菌的外膜蛋白基因(ompH),扩增的片段大小为1114bp(ORF为960bp),并克隆到载体pMD18T(TVector),测序表明该基因相当保守。用pET28b构...
关键词：多杀性巴氏杆菌 ompH基因 克隆 原核表达 ELISA 
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