国家高技术研究发展计划(2008AA10Z411)

作品数：16被引量：93H指数：6
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相关机构：中国农业科学院北京畜牧兽医研究所中国农业大学兰州军区兰州总医院甘肃农业大学更多>>
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狂犬病病毒基质蛋白的原核表达及其间接ELISA方法的建立被引量：8
《中国人兽共患病学报》2013年第1期17-22,26,共7页宫苗苗 曾妮 程朝飞 李刚 
国家自然科学基金(No.31172342);国家高技术研究发展计划"863"计划(No.2008AA10Z411);北京市科委基金项目(No.Z07010501780701);国家农业行业公益项目(No.200903037);FAO/IAEA项目(No.14133;No.14515;No.17453)联合资助~~
目的以原核表达的狂犬病病毒M蛋白作为检测抗原,建立间接ELISA方法用来检测狂犬病病毒抗体。方法为表达狂犬病病毒(RV)基质蛋白(M),采用RT-PCR方法从狂犬病病毒Flury-LEP株中扩增RV基质蛋白基因,双酶切后定向克隆至原核表达载体pET-32a(...
关键词：狂犬病病毒 基质蛋白 原核表达 蛋白纯化 酶联免疫吸附试验 
基于狂犬病病毒重组蛋白的ELISA检测方法比较研究
《畜牧兽医学报》2012年第12期1925-1930,共6页程朝飞 宫苗苗 田康乐 王勇 赵占中 史利军 李刚 
国家高技术研究发展计划(863计划)(2008AA10Z411);北京市科委项目(Z07010501780701);国家公益行业项目(20083014;200903037-2)
原核表达狂犬病病毒的基质蛋白(M),并以此作为包被抗原建立间接ELISA检测方法,与以狂犬病病毒磷蛋白(P)作为包被抗原建立的间接ELISA方法进行比较。根据GenBank中公布的狂犬病病毒LEP-Flury株M基因序列设计特异性引物并引入SmaⅠ和Not...
关键词：狂犬病病毒 基质蛋白M 原核表达 间接ELISA 磷蛋白P 
小反刍兽疫病毒F蛋白的原核表达及其多克隆抗体的制备被引量：5
《中国生物制品学杂志》2012年第9期1185-1189,共5页田康乐 李刚 邱文英 程朝飞 
国家高新技术研究发展计划(863计划)(2008AA10Z411);"十一五"国家科技支撑计划(2006BAD06A13-4);"948"项目(2007-G57-C);FAO/IAEA项目(14515-0;R1);国家公益行业项目(200903037-2)
目的原核表达小反刍兽疫病毒(Peste des petits ruminants virus,PPRV)F蛋白,并制备多克隆抗体。方法根据GenBank中登录的PPRV Nigeria 75/1株F基因全长序列,采用DNAStar软件设计去除F基因信号肽和跨膜区的引物,进行RT-PCR扩增,并克隆...
关键词：小反刍兽疫病毒 F蛋白 原核细胞 基因表达 多克隆抗体 
纳米金标记核酸探针检测小反刍兽疫病毒核酸的研究被引量：9
《中国生物工程杂志》2012年第7期89-94,共6页陶春爱 邱文英 李刚 田康乐 
国家自然科学基金(31172342);国家"863"计划(2008AA10Z411);国家公益性行业科研专项(200903037);"十一五"国家科技支撑计划(2006BAD6A13-4);FAO/IAEA项目(14133;515)资助项目
试验旨在探讨利用纳米金标记寡核苷酸探针快速检测小反刍兽疫病毒核酸的方法。针对小反刍兽疫病毒N基因的高度保守区设计两条特异寡核苷酸探针,一条探针5'端修饰生物素,另一条探针3'端修饰巯基。巯基化的探针通过Au-S键连接到纳米金颗...
关键词：纳米金 PPRV 核酸探针 银染 
抗狂犬病病毒N蛋白单克隆抗体的制备与鉴定被引量：2
《中国人兽共患病学报》2011年第10期866-870,共5页曾妮 宫苗苗 程朝飞 黄华欣 郭李平 李刚 
国家高技术研究发展计划(863计划)(No.2008AA10Z411);北京市科委项目(Z07010501780701);国家公益行业项目(No.200830-14;200903037-2);中央级公益性科研院所基本科研业务费专项(0032007008)
目的制备抗狂犬病病毒N蛋白单克隆抗体,为建立快速准确的狂犬病病毒抗原检测方法奠定基础。方法将狂犬病病毒Flury LEP株N基因克隆至pGEX-6P-1表达载体中,将纯化后的pGEX-6P-1-RV-N蛋白免疫BALB/c小鼠3次。取小鼠脾脏细胞和SP2/0细胞融...
关键词：狂犬病病毒 N蛋白 表达 单克隆抗体 
狂犬病病毒N蛋白主要抗原区的表达及SPA-ELISA抗体检测方法的建立被引量：4
《生物工程学报》2011年第8期1149-1157,共9页曾妮 宫苗苗 郭李平 邱文英 李刚 
国家高技术研究发展计划(863计划)(No.2008AA10Z411);北京市科委项目(No.Z07010501780701);国家公益行业项目(Nos.20083014;200903037-2)资助~~
为有效监测免疫狂犬病疫苗后的抗体水平,以狂犬病病毒N蛋白的主要抗原表位所在区域N1蛋白为包被抗原,建立了SPA-ELISA抗体检测方法。用RT-PCR方法分别扩增出狂犬病病毒Flury LEP株N基因及其N1区域（1 000~1 353 bp）,将二者分别克隆至...
关键词：狂犬病病毒 主要抗原区 ProeteinA ELISA 抗体检测 
减蛋综合征病毒环介导等温扩增检测方法的建立被引量：3
《甘肃农业大学学报》2011年第2期1-5,共5页董春娜 李刚 李伟 张坤 史利军 哈小琴 胡永浩 
国家"863"计划项目(2008AA10Z411);中央级公益性科研院所基本业务费专项(0032007008);北京市科委基金项目(Z07010501780701)
根据GenBank登录的减蛋综合征病毒(EDSV)六邻体基因的保守区,设计了3对环介导等温基因扩增(LAMP)引物,优化反应体系,并对其灵敏性、特异性进行验证.结果表明:LAMP优化后的反应体系为外引物浓度0.1μmol·L-1,内引物浓度0.8μmol·L-1,...
关键词：减蛋综合征病毒 环介导等温扩增 检测 
猪圆环病毒2型间接ELISA抗体检测试剂盒的研制及初步应用被引量：7
《中国畜牧兽医》2011年第3期120-123,共4页胡小华 李刚 史利军 张坤 贾凤芹 
国家高技术研究发展计划"863"计划(2008AA10Z411);国家"十一五"科技支撑计划(2006BAD6A13-4);中央级公益性科研院所基本科研业务费专项(0032007008)
以大肠杆菌原核表达系统表达的猪圆环病毒2型Cap蛋白为抗原,建立猪圆环病毒2型间接ELISA检测方法,优化ELISA反应条件,研制猪圆环病毒2型ELISA抗体检测试剂盒。与商品化试剂盒相比,该检测试剂盒敏感性、特异性和符合率分别为95.12%、92....
关键词：猪圆环病毒2型 CAP蛋白 间接ELISA 抗体检测试剂盒 
减蛋综合征病毒NE4株全基因组序列测定与分析
《甘肃农业大学学报》2010年第5期21-28,共8页董春娜 李刚 邱文英 张坤 哈小琴 
国家"863"计划(2008AA10Z411);中央级公益性科研院所基本业务费专项(0032007008);北京市科委基金项目(Z07010501780701)
根据减蛋综合征病毒(EDSV-76)AV-127株的全基因序列(序列号BK000404),用Premier5.0软件设计22对引物,利用PCR方法对EDSV-76病毒NE4株的全基因组进行了分段扩增、克隆和序列测定,并用DNAStar分析软件对各片段的测序结果进行拼接,将该序列...
关键词：减蛋综合征病毒 基因组 同源性 序列分析 
小反刍兽疫病毒N基因重组杆状病毒的构建及间接ELISA抗体检测方法的建立被引量：9
《畜牧兽医学报》2010年第9期1147-1153,共7页李伟 李刚 吴晓东 邱文英 张坤 Hermann Unger 
国家高技术研究发展计划(863计划)(2008AA10Z411);"十一五"国家科技支持撑计划(2006BAD06A13-4);"948"项目(2007-G57-C);FAO/IAE(14515-0;R1)
本研究旨在建立基于真核表达的小反刍兽疫病毒(PPRV)N蛋白的诊断小反刍兽疫的间接ELISA方法。利用Bac-to-Bac杆状病毒-昆虫表达系统,构建含有PPRV N基因的重组供体质粒pFastBacHTA-N,转化E.coliDH10Bac感受态细胞,得到重组穿梭质粒pBacm...
关键词：小反刍兽疫病毒 杆状病毒 昆虫细胞 间接ELISA 
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