国家自然科学基金(30972240)

作品数:15被引量:44H指数:4
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盐藻钙调素基因的克隆及表达分析
《水产科学》2021年第3期409-415,共7页王明芳 高相楠 徐微微 丛玉婷 柴晓杰 
国家自然科学基金资助项目(31472260,30972240).
为探究盐藻钙调素基因的结构与功能,利用RT-PCR和RACE技术克隆到盐藻钙调素基因(DsCaM,GenBank登录号:MN428415),并对其进行生物信息学分析,通过qRT-PCR方法检测盐藻钙调素在盐胁迫条件下的表达情况。试验结果显示,盐藻钙调素基因cDNA全...
关键词:盐藻 钙调素 QRT-PCR 生物信息学分析 
利用免疫共沉淀联合质谱技术筛选盐藻MAPK的互作蛋白被引量:2
《核农学报》2020年第6期1187-1195,共9页岳金荣 丛玉婷 邢震宇 高相楠 王明芳 柴晓杰 
国家自然科学基金(31472260、30972240)。
为进一步探究杜氏盐藻促有丝分裂原活化蛋白激酶(DsMAPK)的功能,采用免疫共沉淀联合质谱技术筛选盐藻MAPK的互作蛋白。将pGS21a-MAPK质粒转入大肠杆菌BL21中表达MAPK蛋白并制备多克隆抗体;将培养至对数生长期的盐藻细胞进行盐胁迫处理,...
关键词:杜氏盐藻 MAPK 免疫共沉淀技术 质谱技术 生物信息学 
Functional Analysis of Dunaliella salina Calmodulin Kinase Gene
《Agricultural Biotechnology》2020年第2期10-13,20,共5页Zhenyu XING Mingfang WANG Xiangnan GAO Weiwei XU Yuting CONG Xiaojie CHAI 
Supported by National Natural Science Foundation of China(31472260,30972240)。
[Objectives] This study was conducted to investigate the function of Dunaliella salina calmodulin kinase(CaM K) gene.[Methods] The sense and antisense gene fragments(223 bp) and spacer sequence(129 bp) of D.salina cal...
关键词:DUNALIELLA SALINA CAMK RNAI LiAc/PEG-mediated method Real-time fluorescence quantitative PCR 
Cloning of Ds MAPK Gene and Construction of Antisense Expression Vector
《Agricultural Biotechnology》2018年第4期8-11,24,共5页Jinrong YUE Yuting CONG Xiangnan GAO Zhenyu XING Wenjing YUE Xiaojie CHAI 
Supported by National Natural Science Foundation of China(31472260,30972240)
In order to investigate the role of MAPK gene in adaptation of Dunaliella salina to hypersaline environment, the Ds MAPK gene of D. salina was amplified by PCR. After inverted insertion of the open reading flame ofDs ...
关键词:Dunaliella salina Ds MAPK Antisense expression vector Semi-quantitative RT-PCR 
杜氏盐藻MAPKK激酶基因DsMAPKKK的克隆、原核表达与纯化
《中国农学通报》2015年第23期53-57,共5页柴晓杰 刘艺琼 王逸云 武天祥 刘丽颖 
国家自然科学基金项目"杜氏盐藻PKC在盐胁迫信号传导中的功能研究"(31472260);国家自然科学基金项目"盐藻中磷酸化转录因子对盐胁迫的分子响应"(30972240)
为了进一步研究MAPKK激酶的生理功能,利用RT-PCR技术扩增了Ds MAPKKK的开放阅读框序列,并利用T4连接酶与质粒p GS21a连接,构建了原核表达载体p GS21a-Ds MAPKKK。将该重组质粒导入大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,经IPTG诱导成功表达了融...
关键词:杜氏盐藻 DsMAPKKK 原核表达 纯化 蛋白印迹 
Cloning, Analysis and Prokaryotic Expression of DsSP Gene from Dunaliella salina
《Agricultural Science & Technology》2014年第6期907-915,共9页刘世才 柴晓杰 郭卫华 王逸云 韩冬梅 
Supported by National Natural Science Foundation of China(No.30972240);Science and Technology Project of Liaoning Provincial Department of Education(No.2008T023)~~
[Objective] The purpose of this study was to clone a starch phosphorylase gene from Dunaliella salina and to preliminarily analyze its basic properties and protein expression. [Method] RT-PCR and RACE (rapid amplific...
关键词:Dunafiella salina Starch phosphorylase gene CLONE BIOINFORMATICS Prokaryotic expression 
盐藻DsMAPKKK基因的克隆与生物信息学分析被引量:1
《中国农学通报》2014年第15期274-281,共8页王逸云 柴晓杰 韩冬梅 刘世才 郭卫华 
国家自然科学基金项目"盐藻中磷酸化转录因子对盐胁迫的分子响应"(30972240);辽宁省教育厅科技研究项目"胰蛋白酶抑制剂基因在盐藻中的高效表达"(2008T023)
为了阐明MAPKs级联反应在盐藻耐盐机制中发挥的作用,需要克隆MAPKs信号转导途径中的成员之一MAPKKK基因并研究其功能。采用RT-PCR与RACE技术从盐藻中首次克隆到一个盐藻MAPKK激酶基因,将其命名为DsMAPKKK(GenBank Accession No.KF366904...
关键词:盐藻 MAPKK激酶(MAPKKK) 全长CDNA 生物信息学 
盐藻小G蛋白DsRab的原核表达及纯化被引量:1
《生物技术通报》2014年第4期176-180,共5页李秀娟 柴晓杰 陶晓迎 赵欢 丛玉婷 
国家自然科学基金项目(30972240);辽宁省教育厅科技研究项目(2008T023)
前期对盐藻小G蛋白基因DsRab研究表明,在盐胁迫诱导下该基因转录水平明显提高。为进一步研究该蛋白在盐藻耐盐机制中的作用,PCR扩增DsRab的开放阅读框(ORF),并将其克隆至带有GST标签的原核表达载体pGS-21a,得到重组表达载体pGS-21a-DsRa...
关键词:盐藻 DsRab GST 原核表达 纯化 
盐藻丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶基因DsSTPK的克隆、原核表达及纯化被引量:7
《中国农学通报》2014年第2期45-49,共5页陶晓迎 柴晓杰 薛飞 李秀娟 丛玉婷 
国家自然科学基金项目"盐藻中磷酸化转录因子对盐胁迫的分子响应"(30972240);辽宁省教育厅科技研究项目"胰蛋白酶抑制剂基因在盐藻中的高效表达"(2008T023)
前期研究表明,盐藻丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶DsSTPK在转录水平上的表达受盐胁迫诱导。为了进一步研究该蛋白激酶的生理功能,通过RT-PCR扩增DsSTPK的开放阅读框,并将其克隆至pET32a(+)载体,得到重组表达载体pET32a(+)-DsSTPK。将重组表达载...
关键词:盐生杜氏藻 DsSTPK 原核表达 纯化 
盐藻小G蛋白基因(DsRab)的克隆及在高盐胁迫下的表达分析被引量:5
《生物技术通报》2013年第9期77-83,共7页余祝君 柴晓杰 张晓琳 张婷 薛飞 
国家自然科学基金项目(30972240);辽宁省教育厅科技研究项目(2008T023)
采用RT-PCR和RACE技术扩增了杜氏盐藻小G蛋白基因cDNA全长序列(GenBank Accession No.JN989548),命名为DsRab,对其进行生物信息学分析,并通过实时荧光定量PCR方法检测盐胁迫下该基因的表达情况。结果表明,DsRab基因的cDNA全长为1 299 bp...
关键词:杜氏盐藻 小G蛋白基因 RACE技术 生物信息学 荧光定量PCR 
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