国家自然科学基金(31201938)

作品数：9被引量：13H指数：2
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稳定转染CD151或CD163的Marc145细胞系的建立及其在PRRS疫苗生产中的应用被引量：1
《中国兽医杂志》2015年第6期93-96,I0006,共5页阮征 刘开武 吴建英 华娟 夏瑜 王莲芳 胡小明 刘杰 黄海军 
国家自然科学基金项目(31201938);武汉市科技局项目(2013020705070350-9;-14);武汉市农业科学院创新项目(CX201309);武汉市农业科学院青年英才项目(YC201101)
为了进一步探讨提高PRRSV感染靶细胞滴度的有效方法,本研究采用脂质体介导方法,通过G418筛选稳定转染Marc145细胞,并利用单个细胞克隆技术,获得了稳定超表达CD151蛋白和(或)CD163蛋白的Marc145细胞株,经免疫荧光化学和Western Blot鉴定...
关键词：猪繁殖与呼吸综合征 CD151分子 CD163分子 真核表达 疫苗生产 
新生猪骨髓间充质干细胞衍生细胞的分离、培养及生物学特性分析被引量：2
《生物技术通报》2015年第6期170-176,共7页阮征 王莲芳 胡修忠 吴建英 张四化 代长云 华娟 夏瑜 胡小明 李杰 黄海军 
国家自然科学基金项目(31201938);武汉市晨光计划(201150431078);武汉市农科院英才计划(YC201101)
利用骨髓间充质干细胞(Bone mesenchymal stem cells,BMSCs)治疗疾病已经逐渐成为现实,但是作为被移植的种子细胞,BMSCs体外传代能力非常有限,种子细胞来源极为贫乏。本研究通过差速贴壁筛选的方法分离出一种猪BMSCs的衍生细胞株,命名...
关键词：骨髓间充质干细胞 衍生细胞 猪 生物学特性 组织工程 
猪感染肺炎支原体模型的建立及评估
《中国畜牧兽医文摘》2015年第1期39-41,共3页代长云 吴建英 阮征 胡修忠 周华 刘开武 张四化 夏瑜 华娟 李杰 黄海军 
国家自然科学基金(31201938);武汉市晨光计划(201150431078);武汉市农科院英才计划(YC201101)项目资助
为了建立猪肺炎支原体感染的动物模型,选取实验室培养保存的猪肺炎支原体济南株F66株(编号:CVCC354),在不同时间点对12头实验猪进行人工感染,分别建立早期、中期和晚期猪支原体肺炎动物模型。采用PCR、形态学、组织学等多种方法对模型...
关键词：猪 肺炎支原体 动物模型 
PRRS病毒主要受体蛋白CD151和CD163真核表达载体的构建
《生物技术通报》2014年第12期190-194,共5页阮征 李杰 刘开武 王莲芳 华娟 胡小明 刘杰 黄海军 
国家自然科学基金项目(31201938);武汉市科技局项目(2013020705070350-9;2013020705070350-14);武汉市农科院创新项目(CX201309);武汉市农科院青年英才项目(YC201101)
为了进一步研究PRRSV与细胞受体之间的相互作用机理,通过基因工程方法从PAM细胞中克隆获得了CD151和CD163全长编码片段,利用Sal I和Kpn I内切酶对回收得到的CD151(762 bp)和CD163(3 333 bp)DNA片段进行酶切,构建了p IRES2-EGFP-CD151和p...
关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒 CD151分子 CD163分子 真核表达载体 细胞转染 
山羊超数排卵技术研究进展被引量：3
《畜牧与兽医》2014年第11期129-131,共3页刘杰 卢顺 高其双 黄海军 蒋思文 
武汉市科技平台项目(201302070507035-14);武汉市科技攻关计划项目(201302070350-9);国家自然科学基金项目(31201938)
超数排卵可以为胚胎移植提供胚胎,获得稳定、高效的超数排卵效果已成为推广胚胎移植的关键。本文从促卵泡素与促黄体生成素的比值、孕激素、优势卵泡以及其他因素对超数排卵的影响进行了综述,并就目前采用的超排方法进行了归纳总结,以...
关键词：超数排卵 激素 山羊 
动物疫苗生产中异源微生物污染清除技术的建立及应用
《畜牧与兽医》2014年第9期80-83,共4页黄海军 高其双 吴建英 程蕾 张四化 陈志华 占才耀 王莲芳 刘武 刘杰 
国家自然科学基金项目(31201938);武汉市晨光计划项目(201150431078);武汉市农科院青年英才计划项目(YC201101)和攻关项目(Y1201208)资助
通过2种方式建立了清除细胞、病毒等培养用原材料中异源微生物污染物的技术:1)采用钴-60γ射线辐照技术彻底除去细胞培养基、洗涤液、消化液等与细胞直接接触的原材料中的异源微生物,确定了钴-60最佳辐照剂量(12 kGy);2)通过对细胞进行...
关键词：钴-60γ射线 细胞培养 病毒培养 支原体 基因修饰 
猪繁殖与呼吸综合征病毒细胞受体研究进展被引量：2
《畜牧与兽医》2014年第3期110-113,共4页黄海军 彭霞 卢顺 周莉 向敏 陈志华 占才耀 陶弼菲 
国家自然科学基金项目(31201938);武汉市科技局项目(2013020705070350-9;-14);武汉市农科院创新项目(CX201309);武汉市农科院青年英才项目(YC201101)
猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)给世界养猪业造成了巨大损失。对PRRSV受体的深入研究有助于揭示病毒与宿主细胞的相互关系,明确病毒的入侵机制及其对宿主细胞的影响,帮助人们了解病毒的侵入过程、复制动力学及其一系列在胞内发生的事件...
关键词：猪繁殖与呼吸综合征 细胞受体 病毒 入侵 吸附 
细胞支原体巢式PCR检测方法的建立及应用被引量：5
《湖北农业科学》2014年第3期690-693,共4页黄海军 高其双 彭霞 周莉 向敏 陈志华 占才耀 卢顺 陶弼菲 钱运国 童伟文 李杰 华娟 王莲芳 夏瑜 任远 
国家自然科学基金项目(31201938);武汉市晨光计划项目(201150431078);武汉市农科院青年英才计划项目(YC201101);武汉市农科院科技攻关项目(Y1201208)
动物生物制品生产过程中细胞(特别是传代细胞)被支原体污染是个世界性问题。细胞支原体污染可显著影响生产用细胞的培养及生物功能的发挥,最终影响生物制品的生产,给生物制品企业造成巨大损失,建立高效、快速、敏感度高的检测方法十分...
关键词：支原体 细胞培养 巢式PCR 生物制品 
稳定转染pGM-CSF基因的哺乳动物细胞系的建立
《中国兽医杂志》2013年第8期6-8,12,共4页陶弼菲 高其双 陈志华 向敏 占才耀 钱运国 夏瑜 华娟 王莲芳 任远 黄海军 
国家自然科学基金项目(31201938);武汉市晨光计划项目(201150431078);武汉市农科院青年英才计划项目(YC201101)
构建稳定表达猪pGM-CSF基因的细胞系可以为工业化生产猪pGM-CSF并将其应用于新型兽药的开发提供生产细胞源。本试验用脂质体介导法将真核表达载体plRES2-EGFP-pGM-CSF瞬时转染BHK-21细胞,通过不同浓度的G418加压筛选和进一步采用单个克...
关键词：猪粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子 哺乳动物细胞 稳定转染 蛋白表达 
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