国家自然科学基金(31201919)

作品数：9被引量：20H指数：2
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相关作者：何孔旺张雪寒周俊明倪艳秀汪伟更多>>
相关机构：江苏省农业科学院吉林农业大学南京农业大学更多>>
相关期刊：《中国人兽共患病学报》《西南农业学报》《中国兽医学报》《江苏农业学报》更多>>
相关主题：H7大肠杆菌O157:H7间接ELISA大肠杆菌O157菌毛更多>>
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检测产志贺毒素大肠杆菌抗体的间接ELISA试剂盒的研制被引量：2
《西南农业学报》2016年第11期2738-2745,共8页张雪寒 张强 张碧成 汪伟 倪艳秀 温立斌 李彬 周俊明 何孔旺 周萍 
国家自然科学基金(31201919和31572503);江苏省自主创新资金[cx(15)1060]
本研究旨在研制一种以紧密素为检测靶标的间接ELISA技术,检测血清中产志贺毒素大肠杆菌（Shiga toxigenic Escherichia coli,STEC）的抗体水平。根据紧密素27个亚型的N端保守序列,体外表达390-543 aa片段制备包被抗原,通过敏感性、特异...
关键词：致病性大肠杆菌 紧密素 间接ELISA 
大肠杆菌O157∶H7独有基因z3276的表达及初步鉴定被引量：2
《中国兽医学报》2016年第8期1354-1357,共4页张碧成 张雪寒 何孔旺 范红结 
国家自然科学基金资助项目(31201919);农业部"948"计划资助项目(2014-S17);江苏省农业科技自主创新资金资助项目(CX(13)5033)
经BLAST分析表明,开放阅读框z3276是大肠杆菌O157∶H7独有的遗传标志性基因,编码氨基酸与大肠杆菌Ⅰ型菌毛有较高的同源性,但z3276基因编码蛋白的生物学特性尚不明确。为了明确z3276基因编码蛋白的抗原性,进一步研究其在大肠杆菌O157∶H...
关键词：大肠杆菌O157:H7 标签基因 z3276基因 原核表达 
ETEC F4-F5融合基因表达及间接ELISA方法建立被引量：5
《中国兽医学报》2016年第8期1312-1317,共6页张强 张雪寒 何孔旺 王春凤 
国家自然科学基金资助项目(31201919);农业部"948"计划资助项目(2014-S17);江苏省农业科技自主创新资金资助项目(CX(13)5033)
表达产肠毒素性大肠杆菌(enterotoxigenic Escherichia coli,ETEC)黏附素F4和F5融合蛋白,建立间接ELISA方法,旨在监测猪场ETEC感染以及疫苗免疫情况。根据GenBank中登录F4和F5基因序列,分析保守区,优化密码子,合成F4-F5串联基因,克隆入...
关键词：产肠毒索性大肠杆菌 F4菌毛 F5菌毛 间接酶联免疫吸附试验 
遗传标志性基因Z0372 PCR检测肠出血大肠杆菌O157:H7被引量：3
《西南农业学报》2015年第1期409-413,共5页张雪寒 张碧成 栾晓婷 汪伟 周俊明 何孔旺 
江苏省支撑计划(BE2011771);国家自然科学基金(31201919)
肠出血性大肠杆菌（Enterohaemorrhagic E.coli,EHEC）O157：H7是重要的食源性病原菌,导致严重的人兽共患病。本文旨在建立以Z0372基因为靶基因的PCR检测技术,特异性检测EHEC O157：H7。以Z0372基因为靶序列,设计引物,建立Z0372-PCR,分...
关键词：大肠杆菌O157:H7 Z0372 聚合酶链反应 食品 排泄物 
肠出血性大肠杆菌O157∶H7toxB基因的分片段克隆和表达被引量：1
《江苏农业学报》2014年第6期1392-1395,共4页张雪寒 栾晓婷 何孔旺 倪艳秀 周俊明 
江苏省农业支撑计划-社会发展项目(BE2011771);国家自然科学基金项目(31201919)
根据Gen Bank已有tox B基因全长序列,分别设计6对引物扩增tox B基因,克隆到质粒p GEX-4T-1,构建重组菌BL21(plys)(p GEX-4T-1-tox B),IPTG诱导表达重组蛋白质,用Western blot鉴定重组蛋白质免疫原性。tox B基因片段大小分别为1 531 bp、...
关键词：肠出血性大肠杆菌O157∶H7 tox B基因 表达 免疫原性 
通用引物检测志贺毒素和紧密素多个基因亚型被引量：4
《中国人兽共患病学报》2014年第6期607-611,617,共6页张雪寒 汪伟 何孔旺 倪艳秀 温立斌 李彬 王小敏 周俊明 
江苏省支撑计划(No.BE2011771);国家自然科学基金(No.31201919)联合资助~~
目的旨在建立同时检测stx2和intimin两个基因多个变型的双重PCR快速检测技术，更好满足实验室和临床检测的需求。方法以stx2主要的6个亚型和intimin主要的27个基因亚型为靶序列，设计引物，建立双重PCR方法，分析其敏感性、特异性，并...
关键词：大肠杆菌致病群 志贺毒素 紧密素 变异型 PCR 
H7-HCP-Tir-Intimin高效降低小鼠粪便中大肠杆菌O157:H7排菌被引量：1
《中国兽医学报》2014年第3期465-470,共6页张雪寒 何孔旺 叶青 俞正玉 倪艳秀 温立斌 王小敏 李彬 周俊明 汪伟 
国家科技支撑计划资助项目(2012BAK08B07);国家自然科学基金资助项目(31201919)
构建BL21(PcoldⅠ-fliC-hcpA-tir-eae),并评价对小鼠的免疫原性,以期研制更加有效的候选免疫原,最大限度降低E.coli O157:H7对食物、环境和人类的危害。将946、423、309、811bp的fliC,hcpA,tir和eae基因被依次克隆,中间添加8个氨基酸的...
关键词：E coli 0157 H7 鞭毛 Ⅳ菌毛 紧密素转位受体蛋白 紧密素 疫苗 排菌 小鼠 
Sequence Analysis of Type III Effector tccP and tccP2 Genes in Escherichia coli O157:H7 from Chinese Water-chestnut
《Agricultural Science & Technology》2013年第2期202-205,共4页张雪寒 叶青 刘亚栋 何孔旺 
Supported by the National Key Technology Research and Development Program of China (2012BAK08B07);the National Natural Science Foundation of China (31201919)~~
[Objective] This study aimed to analyze the type III effector tccP and tccP2 genes in Escherichia coli O157：H7 from Chinese water-chestnut. [Method] Gene-specific and locus-specific primers were utilized to amplify t...
关键词：EHEC O157：H7 Chinese water-chestnut tccP gene tccP2 gene proline-rich repeats 
大肠杆菌O157∶H7菌毛hcpA基因产物的小鼠免疫保护试验(英文)被引量：2
《中国人兽共患病学报》2012年第11期1065-1070,1101,共7页张雪寒 何孔旺 叶青 倪艳秀 温立斌 李彬 周俊明 王小敏 
Financially supported by the National Science&Technology Pillar Program(No.2012BAK08B07);the National Natural Sciences Foundation of China(No.31201919)~~
最近鉴定的大肠杆菌O157∶H7Ⅳ型菌毛(HCP)与细菌粘附、定植和致病有着密切关系。本文研究表明,PCR扩增出15个大肠杆菌O157∶H7分离株HcpA基因,透射电镜观察到HCP表达于菌体表面。同时,构建BL21(pET32-hc-pA)重组菌,成功表达重组蛋白His...
关键词：肠出血性大肠杆菌O157∶H7 Ⅳ型菌毛 表达 排菌 
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