国家自然科学基金(30972198C180503)

作品数：14被引量：31H指数：3
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相关作者：王兴龙王景龙屈海龙王秀然张瑞更多>>
相关机构：军事医学科学院吉林大学北京奶牛中心长春市农业科学院更多>>
相关期刊：《安徽农业科学》《中国生物制品学杂志》《中国兽医学报》《中国畜牧兽医》更多>>
相关主题：布鲁菌基因表达酵母双杂交毒性自激活作用更多>>
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羊布鲁菌16M Omp25真核表达载体的构建被引量：2
《中国兽医学报》2013年第12期1848-1850,1854,共4页屈海龙 王海浪 陈思 张瑞 王秀然 钱晶 王兴龙 
国家自然科学基金资助项目(30972198/C180503);国家科技支撑计划(2010BAD04B03)
利用聚合酶链式反应(PCR),以羊布鲁菌16M基因组为模板克隆Omp25基因,设计含有EcoRⅠ和XhoⅠ酶切位点的引物序列,定向克隆到真核表达载体pCMV-HA上,构建真核表达重组质粒pCMV-HA-Omp25。经测序及双酶切验证正确,证明成功构建了pCMV-HA-Om...
关键词：羊布鲁菌16M Omp25 真核表达 
羊布鲁菌16M VjbR蛋白酵母双杂交诱饵表达载体的构建及其毒性和自激活效应检测
《中国兽医学报》2013年第9期1378-1382,共5页屈海龙 王景龙 李晓燕 张瑞 王秀然 陈思 钱晶 王兴龙 
国家自然科学基金资助项目(30972198/C180503);国家科技支撑计划资助项目(2010BAD04B03)
利用Sos招募系统(SRS),通过PCR扩增羊布鲁菌16M VjbR基因的编码序列,定向克隆到酵母表达载体pSos中,构建诱饵重组质粒pSos-VjbR,经测序正确后其将转入酵母菌cdc25H(α)感受态细胞,检测其表达产物对酵母细胞有无毒性作用及对报告基因有...
关键词：VjbR蛋白 羊布鲁菌16M 自激活作用 酵母双杂交 
羊布氏菌vjbR基因的克隆及原核表达被引量：1
《中国生物制品学杂志》2013年第2期188-190,195,共4页卜昭阳 王景龙 李晓艳 万丽娜 郎需龙 万忠海 孟柯音 王兴龙 
国家自然科学基金(30972198/C180503);国家科技支撑计划(2010BAD04B03)
目的克隆并原核表达羊布氏菌强毒株16M vjbR基因。方法 PCR扩增羊布氏杆菌16M株vjbR基因,亚克隆至原核表达载体pET-28a中,构建重组原核表达质粒pET-28a-vjbR,转化感受态大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达。表达的重组蛋白经His Trap FF纯...
关键词：羊布氏菌 vjbR基因 密度感应系统 克隆 原核细胞 基因表达 
羊布鲁氏菌16M Omp25蛋白酵母双杂交诱饵表达载体的构建及其毒性和自激活效应检测被引量：1
《安徽农业科学》2012年第19期10156-10159,共4页屈海龙 王海浪 李晓燕 张瑞 王秀然 陈思 钱晶 王兴龙 
国家自然科学基金(30972198/C180503);国家科技支撑计划(2010BAD04B03)
[目的]构建含羊布鲁氏菌16M Omp25基因的酵母双杂交诱饵质粒,检测诱饵质粒表达产物对cdc25H酵母细胞有无毒性作用以及对报告基因有无激活作用。[方法]聚合酶链反应(PCR)扩增布鲁氏菌Omp25基因的编码序列,定向克隆到酵母表达载体pSos上,...
关键词：Omp25蛋白 诱饵质粒 自激活作用 
羊布鲁菌16M VjbR蛋白酵母双杂交诱饵表达载体的构建及其毒性和自激活效应检测被引量：1
《中国兽医学报》2012年第6期852-856,共5页屈海龙 王景龙 李晓燕 张瑞 王秀然 陈思 钱晶 王兴龙 
国家自然科学基金资助项目(30972198/C180503);国家科技支撑计划资助项目(2010BAD04B03)
利用Sos招募系统(SRS),通过聚合酶链反应(PCR)扩增羊布鲁菌16M VjbR基因的编码序列,定向克隆到酵母表达载体pSos中,构建诱饵重组质粒pSos-VjbR,经测序正确后其将转入酵母菌cdc25H(α)感受态细胞,检测其表达产物对酵母细胞有无毒性作用...
关键词：vjbR蛋白 羊布鲁茵16M 自激活作用 酵母双杂交 
羊布氏菌外膜蛋白10基因的原核表达
《中国生物制品学杂志》2012年第1期39-42,共4页李晓艳 王景龙 卜昭阳 张瑞 王兴龙 
国家自然科学基金(30972198/C180503);国家转基因新品种培育重大项目(2009ZX08009-163B)
目的原核表达并纯化羊布氏菌外膜蛋白10(Outer membrane protein,Omp10)。方法利用PCR技术扩增羊布氏菌16M株Omp10基因,插入原核表达载体pET-28a(+),构建重组原核表达质粒pET-28a-Omp10,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达,表达的重组O...
关键词：羊布氏菌 细菌外膜蛋白质类 原核细胞 基因表达 诊断 鉴别 
细菌IV型分泌系统结构的研究进展被引量：3
《安徽农业科学》2011年第23期13979-13980,14020,共3页王景龙 张瑞 王兴龙 
国家自然科学基金项目(30972198/C180503)
革兰氏阴性菌的IV型分泌系统(T4SS)是一个由ATP供能,多种蛋白质复合构成的体系,该体系能够跨过整个细胞外膜、分泌大量底物。详细阐述了T4SS组成元件的结构,如底物转运通道、核心复合物、外膜复合物、内膜复合物、菌毛等。T4SS更大组成...
关键词：细菌 IV分泌系统 分子结构 
羊型布氏菌WbkC基因真核表达质粒的构建及鉴定被引量：5
《中国生物制品学杂志》2011年第8期889-892,共4页王景龙 屈海龙 王秀然 郎需龙 李晓艳 王兴龙 
国家自然科学基金(30972198/C180503)
目的构建羊型布氏菌脂多糖O-侧链合成必需的甲酰基转移酶WbkC基因真核表达质粒,并进行鉴定。方法提取16M株羊型布氏菌基因组DNA,PCR扩增WbkC基因,克隆至psos载体上,构建诱饵重组质粒psos-WbkC,转化酵母菌株cdc25Hα,进行菌落PCR鉴定,并...
关键词：羊型布氏菌 WbkC基因 酵母菌 酿酒 真核细胞 基因表达 
羊布鲁氏菌甲酰基转移酶的生物信息学研究
《中国畜牧兽医》2011年第7期123-126,共4页王景龙 王兴龙 
国家自然科学基金(30972198/C180503);国家转基因新品种培育重大项目(2009ZX08009-163B)
本研究旨在分析和预测羊布鲁氏菌甲酰基转移酶基因及其编码蛋白的结构与功能,用于指导其生物学功能的实验室研究。综合利用生物信息学软件(DNAMAN和Vector NTI)、数据库(prosite和PDB)和网络服务器对甲酰基转移酶进行基本性质分析、三...
关键词：羊布鲁氏菌 甲酰基转移酶 生物信息学分析 
羊布氏菌SOD基因重组酿酒酵母菌株的构建及鉴定
《中国生物制品学杂志》2011年第6期639-642,共4页王景龙 屈海龙 杨延玲 孙春辉 王秀然 郎需龙 李晓艳 卜昭阳 王兴龙 
国家自然科学基金(30972198/C180503)
目的构建羊布氏菌超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)基因重组酿酒酵母菌株,并进行鉴定。方法 PCR扩增羊布氏菌16M株SOD基因,与psos载体连接,构建重组表达质粒psos-SOD,转化酿酒酵母菌cdc25H,并进行PCR鉴定、表型验证、自激活及...
关键词：羊布氏菌 超氧化物歧化酶 酿酒酵母cdc25H 
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