国家自然科学基金(30600442)

作品数：10被引量：20H指数：3
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一株新基因型猪圆环病毒Ⅱ型的鉴定被引量：2
《中国农学通报》2013年第11期34-38,共5页谢俊岭 陈晓平 孟凡伟 王保有 周双海 王志军 
国家自然科学基金项目"微血管内皮细胞在猪圆环病毒II型感染中的作用"(30600442);天津市宁河原种猪场科技计划"规模化猪场重要疫病防控关键技术研究"(2011)
为了解新近出现的猪圆环病毒Ⅱ型(PCV2)的基因变异及其基因型信息。用PCR技术从新近发生断奶后多系统消耗综合征的病猪组织中扩增和克隆出一株PCV2全基因组序列,并进行了遗传变异分析。结果显示:该PCV2毒株基因组全长为1767bp,与部分其...
关键词：猪圆环病毒II型 基因变异 进化分析 基因型 
猪圆环病毒Ⅱ型感染性DNA克隆的构建被引量：2
《中国农学通报》2012年第32期84-88,共5页谢俊岭 邵小雪 孟凡伟 周双海 
国家自然科学基金项目"微血管内皮细胞在猪圆环病毒II型感染中的作用"(30600442);北京市自然科学基金项目"猪圆环病毒II型感染对伪狂犬病疫苗免疫反应的影响"(6082008);北京市教委科技计划项目"嵌合猪圆环病毒疫苗株的构建"(KM200810020013)
为了构建猪圆环病毒Ⅱ型(PCV2)感染性DNA克隆,并为PCV2的突变体构建及其致病机理研究建立基础。用PCR方法从PCV2 DNA质粒中扩增出PCV2全基因组片段,将其插入到pBluescript-SK载体中,构建出单拷贝PCV2 DNA克隆,并进一步构建了双拷贝PCV2 ...
关键词：猪圆环病毒Ⅱ型 感染性DNA克隆 拯救病毒 增殖能力 
DNA免疫法制备猪圆环病毒Ⅱ型ORF3抗体被引量：1
《中国农学通报》2012年第17期97-100,共4页谢俊岭 耿美鸽 吴迪 卻小宁 周双海 
国家自然科学基金项目"微血管内皮细胞在猪圆环病毒Ⅱ型感染中的作用"(30600442);北京市自然科学基金项目"猪圆环病毒Ⅱ型感染对伪狂犬病疫苗免疫反应的影响"(6082008);北京市本科生科学研究计划项目"猪圆环病毒Ⅱ型ORF3蛋白抗体的制备(2012)
为了制备猪圆环病毒Ⅱ型(PCV2)开放阅读框3(ORF3)蛋白的抗体,并为ORF3功能研究奠定基础,用PCR方法扩增PCV2ORF3基因,对其PCR产物用EcoRI与XhoI进行酶切,并对真核表达载体pCDNA3.1(+)进行同样酶切,连接2种目的酶切产物后转化E.coliDH5a...
关键词：猪圆环病毒Ⅱ型 DNA免疫 小鼠 ORF3抗体 效价 
猪圆环病毒2型实时定量PCR检测方法的建立被引量：2
《北京农学院学报》2010年第3期31-34,共4页韩玉环 汤世坤 周双海 刘玉洁 朱荣昌 吴国娟 
国家自然科学基金资助项目(30600442)
用PCR技术从一临床病猪组织中扩增出猪圆环病毒2型(PCV2)417 bp片段,并克隆到pGEM-T Easy载体中,构建成含有PCV2基因片段的重组质粒。应用该重组质粒进行实时荧光定量PCR,建立了PCV2 DNA的实时PCR标准曲线及其直线回归方程。结果显示该...
关键词：PCV2 实时定量PCR 定量检测 
猪圆环病毒1型天津株全基因组的克隆与序列分析被引量：1
《中国农学通报》2010年第18期22-26,共5页韩玉环 高峰 周双海 邵小雪 王志军 王保有 刘玉洁 
国家自然科学基金项目"微血管内皮细胞在猪圆环病毒2型感染中的作用"(30600442);北京市教委科技计划项目"嵌合猪圆环病毒疫苗株的构建"(KM200810020013)
从天津地区分离和克隆出1株猪圆环病毒1型(PCV1),并进行基因组序列分析。参照GenBank上PCV1全基因组序列设计1对引物,用PCR技术从天津一猪场的临床发病猪病变组织中扩增和克隆获得1株PCV1全基因组序列,并进行序列测定和分析。全基因组...
关键词：猪圆环病毒1型 天津株 全基因组 克隆 序列分析 
猪圆环病毒1型北京株全基因组克隆及序列分析被引量：3
《北京农学院学报》2009年第4期35-38,共4页邵小雪 郭星 周双海 冉多良 汤世坤 
国家自然科学基金项目(30600442);北京市教委科技计划项目(KM200810020013)
参照GenBank上猪圆环病毒1型（PCV1）全基因组序列设计1对引物，用PCR技术从北京一猪场的临床发病猪病变组织中扩增和克隆获得1株PCV1全基因组序列，并进行序列测定和分析。全基因组序列结果显示，该株PCV1基因组全长为1759bp，与国内...
关键词：猪圆环病毒1型 北京株 全基因组 克隆 序列分析 
猪圆环病毒2型北京株全基因组的克隆与序列分析被引量：3
《北京农学院学报》2009年第2期47-50,共4页汤世坤 张雪 周双海 王霞泰 吴国娟 
国家自然科学基金项目(30600442);北京市自然科学基金项目(6082008);北京市优秀人才培养专项资助项目(20042D0502111);北京市属市管高校人才强教计划项目(2007);北京市教委科技计划项目(KM200810020013)
为探索近年来北京地区猪圆环病毒2型(PCV2)的流行病学和变异规律,用PCR技术从北京不同猪场的临床发病猪和死亡猪病变组织中分别扩增和克隆获得4株PCV2分离株全基因组序列,并进行测定和分析。结果显示,4株PCV2基因组全长均为1 767 nt,其...
关键词：猪圆环病毒2型 全基因组 克隆 序列分析 
猪GM-CSF荧光定量PCR检测方法的建立被引量：4
《北京农学院学报》2009年第2期51-53,56,共4页王霞泰 蒋伟娇 周双海 汤世坤 刘凤华 
国家自然科学基金资助项目(30600442);北京市自然科学基金资助项目(6082008);北京市属市管高校人才强教计划资助项目(2007)
根据GenBank中猪粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)基因序列设计一对引物,用RT-PCR技术从猪外周血单个核细胞中扩增出296 bp cDNA片段,并克隆到pGEM-T Easy载体中。经测序鉴定后,构建出含猪GM-CSF cDNA部分片段的重组质粒。通过重组...
关键词：猪 GM-CSF 荧光定量PCR 
猪IL-18 mRNA定量RT-PCR检测方法的建立
《北京农学院学报》2008年第4期37-40,共4页王霞泰 汤世坤 周双海 刘凤华 
国家自然科学基金资助项目(项目编号:30600442);北京市自然科学基金资助项目(项目编号:6082008);北京市属市管高校人才强教计划项目(项目编号:2007)
根据GenBank中猪白介素(IL)-18基因序列,设计1对引物,用RT-PCR技术从猪肺泡巨噬细胞总RNA中扩增出其411 bp cDNA片段,将其与pGEM-T Easy载体连接,经转化、筛选阳性克隆、酶切与测序鉴定后,构建出含猪IL-18 cDNA部分片段的重组质粒。后...
关键词：猪 IL-18 竞争定量PCR 
猪圆环病毒检测技术研究进展被引量：3
《北京农学院学报》2007年第4期71-74,共4页汤世坤 周双海 张广学 周志山 吴国娟 
国家自然科学基金资助项目(30600442);北京市优秀人才培养专项资助项目(20042D0502111);北京农学院青年科学基金资助项目(2003)
猪圆环病毒(PCV)具有PCV1和PCV2两种基因型,PCV1无致病性,而PCV2可引起猪断奶后多系统消耗综合征等多种疾病。PCV2相关疾病已给世界养猪业造成了巨大经济损失。因此,建立一套快速、有效的PCV检测方法非常重要。笔者综述了当前PCV的检测...
关键词：猪圆环病毒 检测技术 研究进展 
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