国家教育部博士点基金(20040610060)

作品数：11被引量：32H指数：4
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相关作者：周清华朱文朱大兴王艳萍杨雪琴更多>>
相关机构：四川大学华西医院天津医科大学总医院第三军医大学大坪医院四川大学更多>>
相关期刊：《中国肺癌杂志》《生物技术通讯》《癌症》《生物工程学报》更多>>
相关主题：NM23-H1L9981NM23-H1基因NM23-H定点突变更多>>
相关领域：医药卫生生物学化学工程更多>>
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突变型nm23-H1基因的磷酸化活性研究被引量：2
《中国肺癌杂志》2009年第3期193-197,共5页杨雪琴 马力 朱大兴 王东 王阁 周清华 
国家自然科学基金重点项目(No.30430300);国家自然科学基金(No.30070333);国家“十一五”科技攻关项目(No.2006BAI02A01);高等学校博士学科点专项基金(No.20040610060)资助~~
背景与目的磷酸化活性是nm23-H1重要的生物学活性,本研究旨在探讨不同位点的突变对nm23-H1磷酸化活性的影响。方法以野生型nm23-H1研究对照,采用放射自显影的方法检测nm23-H1野生型(WT)和4种突变型(P96S,H118F,S120G和S44A)原核表达蛋...
关键词：NM23-H1 突变 磷酸化活性 
高效原核表达载体pBV220的改造与应用被引量：4
《生物工程学报》2008年第7期1312-1316,共5页朱大兴 王艳萍 杨学勤 朱文 陈小禾 孙芝琳 周清华 
国家自然科学基金重点项目(No.30430300);教育部高等学校博士学科点专项科研基金(No.20040610060)资助~~
以高效原核表达载体pBV220为骨架载体,应用单链寡核苷酸引物插入法在pBV220多克隆位点的下游插入了六聚组氨酸融合标签编码序列(6×His-Tag)、羟胺和凝血酶蛋白切割位点,并增加了Xho I和Kpn I酶切位点和强终止密码子TAA,将此新质粒命名...
关键词：纯化标签 融合蛋白 NM23-H1 
转移抑制基因nm23-H1参与肺癌Ras信号传导机理研究被引量：1
《中国肺癌杂志》2008年第5期700-703,共4页杨雪琴 姚毅冰 周清华 马力 朱大兴 肖文 李昌林 马家宝 张芷旋 高利伟 朱文 王艳萍 
国家自然科学基金重点项目(No.30430300);国家自然科学基金(No.30070333);高等学校博士学科点专项基金(No.20040610060)资助~~
背景与目的nm23-H1基因已被证实为一种肿瘤转移抑制基因,但其作用机理尚不明了,本研究探讨nm23-H1参与肺癌Ras信号传导的机理。方法应用脂质体法将pEGFP-nm23-H1野生型和突变型质粒(WT,H118F,S120G,P96S,S44A)转染人大细胞肺癌细胞株L99...
关键词：NM23-H1 KSR 肺肿瘤 Ras信号传导 
利用Pyrobest DNA聚合酶一步法进行大片段基因的定点突变被引量：4
《生物技术通讯》2007年第4期590-593,共4页朱大兴 周清华 王艳萍 车国卫 唐小军 朱文 陈小禾 孙芝琳 
国家自然科学基金重点项目(30430300);教育部高等学校博士学科点专项科研基金(20040610060)
目的:介绍一种简单、快速、高效和经济的进行大片段基因定点突变的方法。方法:小量抽提含有NM23H1-EGFP融合基因的逆转录病毒真核表达质粒pLXSN-NM23H1-EGFP,体外合成突变引物对,利用高保真Pyrobest DNA聚合酶对质粒DNA进行PCR突变反应...
关键词：Pyrobest DNA聚合酶 定点突变 PCR 
Ras激酶抑制子KSR定点突变、表达和鉴定
《中国肺癌杂志》2007年第2期93-97,共5页肖文 周清华 王燕萍 朱文 陈晓禾 杨雪琴 朱大兴 
国家自然科学基金重点项目(No.30430300);国家自然科学基金(No.30070333);高等学校博士学科点专项基金(No.20040610060)资助~~
背景与目的Ras to MAPK通路在生长、发育信号传递中起关键的作用。Ras激酶抑制基因(KSR)是该通路中的一个重要组分,其功能主要是作为一个支架蛋白协调装配包含有丝分裂原活化蛋白激酶(MAPK)及其上游调控子的多蛋白复合体。已有的研究表...
关键词：定点突变 Ras激酶抑制基因 真核表达 构建 纯化 鉴定 
利用定点突变技术构建突变nm23-H_1和EGFP融合基因被引量：7
《中国肺癌杂志》2006年第2期117-122,共6页朱大兴 周清华 王艳萍 朱文 陈小禾 孙芝琳 
国家自然科学基金重点项目(No.30430300);教育部高等学校博士学科点专项基金(No.20040610060)资助~~
背景与目的以前的研究已经证明nm23H1基因是肿瘤转移抑制基因,但其抑制肿瘤转移的分子机制目前还不完全清楚。基因定点突变技术可以精确地改变基因的特定碱基序列,获得突变蛋白质。本研究的目的是应用基因定点突变技术构建突变型nm23H1...
关键词：定点突变 NM23-H1 EGFP 突变型nm23-H1-GFP融合基因 
小鼠Ras激酶抑制剂(KSR)基因氨基端和羧基端真核表达载体的构建及其在293T细胞中的表达被引量：1
《中国肺癌杂志》2006年第2期123-126,共4页杨雪琴 周清华 朱文 朱大兴 马力 李昌林 王艳萍 陈小禾 马家宝 
国家自然科学基金重点项目(No.30430300);国家自然科学基金(No.30070333);高等学校博士学科点专项基金(No.20040610060)资助~~
背景与目的已有的实验证据表明,Ras激酶抑制剂(kinasesuppressorofRas,KSR)的功能主要是作为一个支架蛋白组装MAPK及其上游调控子形成多蛋白的复合体。但KSR是否存在激酶活性,一直是争论的焦点。本研究的目的是构建小鼠KSR基因氨基端(NK...
关键词：KSR 真核表达 基因重组 
nm23-H_1基因点突变对人高转移大细胞肺癌细胞株L9981的GSK-3β激酶活性的影响被引量：3
《中国肺癌杂志》2006年第1期30-34,共5页马力 周清华 朱文 朱大兴 杨雪琴 王艳萍 陈小禾 张敏 高利伟 赵颖 
国家自然科学基金重点项目(No.30430300);国家自然科学基金(No.30070333);高等学校博士学科点专项基金(No.20040610060)资助~~
背景与目的我们的前期研究结果表明nm23-H1基因的肺癌转移抑制作用可能与上调Wnt信号通路中关键激酶GSK-3β的活性、进而抑制Wnt信号通路相关。本研究的目的是探讨nm23-H1点突变对人高转移大细胞肺癌细胞株L9981中胞质和胞核的GSK-3β...
关键词：人高转移大细胞肺癌细胞株L9981 NM23-H1 基因 Wnt信号通路 GSK-3Β 点突变 
nm23-H1基因逆转人高转移大细胞肺癌细胞L9981转移表型的分子机制被引量：11
《癌症》2005年第3期278-284,共7页车国卫 周清华 朱文 王艳萍 覃杨 刘伦旭 陈晓禾 孙艺琳 孙泽芳 
国家自然科学基金项目(No.30430300;30070333);高等学校博士点专项科研基金项目(No.20040610060)~~
背景与目的:nm23-H1基因已被证明是转移抑制基因,转染野生型nm23-H1基因可以逆转肿瘤的恶性转移表型,但是nm23-H1基因抑制或逆转肺癌转移的分子机制却知之甚少,我们在建立转nm23-H1基因的人高转移大细胞肺癌细胞株L9981-nm23-H1的基础上...
关键词：NM23-H1基因 转移表型 肿瘤转移相关基因 肺肿瘤 
nm23-H_1基因转染对人高转移大细胞肺癌细胞株L9981中β-catenin表达的影响被引量：1
《中国肺癌杂志》2004年第6期471-474,共4页付军科 周清华 朱文 王艳萍 刘伦旭 陈晓禾 车国卫 聂强 李定彪 
国家自然科学基金重点项目 (No .30 4 30 30 0 );国家自然科学基金 (No .30 0 70 333和 30 1 0 0 0 75);教育部高等学校博士学科点专项科研基金资助 (No .2 0 0 4 0 61 0 0 60 )~~
目的　探讨nm2 3 H1基因转染对人高转移大细胞肺癌细胞株L9981中 β catenin和磷酸化β catenin表达水平的影响 ,为阐明nm2 3 H1基因逆转肺癌转移的分子机制提供实验依据。方法　以原代L9981、转染nm 2 3 H1基因的L9981 nm2 3 H1和...
关键词：人高转移大细胞肺癌细胞株 “肺癌转移抑制级联” L9981 nm-23-H1 基因 Β-CATENIN WNT信号通路 
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