国家自然科学基金(30300010)

作品数:14被引量:134H指数:5
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相关作者:徐琪寿郭长江张绪梅刘云李剑欣更多>>
相关机构:军事医学科学院南昌大学解放军第306医院河南中医药大学更多>>
相关期刊:《中国医药生物技术》《微生物学通报》《中国生物化学与分子生物学报》《中国生物制品学杂志》更多>>
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大肠杆菌trpBA和serA基因的串联表达被引量:4
《微生物学通报》2009年第1期2-8,共7页张绪梅 郭长江 刘云 徐琪寿 
天津市科技攻关项目(No.033182711);国家自然科学基金资助项目(No.30300010)
大肠杆菌trpBA基因编码的色氨酸合成酶(tryptophan synthetase,TSase)是色氨酸合成的关键酶;serA基因编码的磷酸甘油酸脱氢酶(D-3-phosphoglycerate-dehydrogenase,PGDH)为L-丝氨酸合成(色氨酸合成的底物)的关键酶。为了通过...
关键词:色氨酸 大肠杆菌 serA基因 trpBA基因 串联表达 
大肠杆菌色氨酸生物合成途径关键酶的调控研究被引量:4
《生物工程学报》2008年第5期844-850,共7页于金龙 王静 李剑欣 郭长江 黄英武 徐琪寿 
国家自然科学基金(No.30300010)资助~~
为了通过基因工程手段提高大肠杆菌色氨酸产量,对色氨酸生物合成途径中的关键基因trpR、tnaA、aroG和trpED进行了改造。首先通过敲除trpR基因解除了基因组上色氨酸合成和转运关键酶受到的反馈阻遏调控,进而又敲除了tnaA基因,阻断了色氨...
关键词:aroG和trpED共表达 trpR和tnaA双敲除 色氨酸 
大肠杆菌生物合成中心代谢途径的改造及其对工程菌色氨酸产量的影响被引量:4
《中国医药生物技术》2008年第2期93-97,共5页王静 于金龙 张婷 郭长江 徐琪寿 黄英武 
国家自然科学基金(30300010)
目的改造大肠杆菌色氨酸生物合成的中心代谢途径,以进一步提高色氨酸产量。方法根据ppsA和tktA基因序列分别合成引物行PCR扩增,将PCR扩增所得PLacO1-tktA-T1片段和pZA31质粒连接,经筛选鉴定正确的pZA31-tktA重组质粒和PCR扩增所得PLacO1...
关键词:色氨酸 生物合成途径 大肠杆菌 基因表达调控 细菌 
发酵液中色氨酸含量高通量快速测定被引量:2
《氨基酸和生物资源》2008年第1期70-71,76,共3页于金龙 郭长江 黄英武 徐琪寿 
国家自然科学基金(30300010)资助
为了高通量筛选色氨酸工程菌,利用色氨酸与MAA在酸性条件下产生荧光物质(激发波长253nm,发射波长450nm),荧光强度与色氨酸含量在一定范围内成正比的原理,建立了96孔微孔板中高通量测定发酵液色氨酸含量的方法。反应液80℃反应15mi...
关键词:色氨酸 高通量 荧光测定 
大肠杆菌色氨酸操纵子基因的克隆与表达被引量:1
《中国生物制品学杂志》2008年第1期30-32,共3页林维平 郭长江 张绪梅 徐琪寿 
国家自然科学基金(30300010);天津市科技攻关项目(033182711)
目的克隆并表达大肠杆菌色氨酸操纵子基因,提高其酶活性。方法利用PCR方法,从大肠杆菌31884基因组中直接克隆出色氨酸操纵子,并将其连接到原核表达载体pET-22b(+)中,构建重组质粒pET-22b(+)-Trpoperon,转化大肠杆菌BL21,IPTG诱导重组蛋...
关键词:色氨酸操纵子 克隆 表达 酶活性 
系统生物技术——组学时代的代谢工程
《军事医学科学院院刊》2007年第5期481-483,共3页于金龙 黄英武 徐琪寿 
国家自然科学基金资助项目(No.30300010)
高通量实验技术的广泛应用产生了海量数据,利用生物信息学工具整合这些数据,加深了人们对细菌生理活动规律的认识,系统生物学应运而生。系统生物学的出现使代谢工程从局部通路水平上升到整体水平,代谢工程也因此进入了新的发展阶段——...
关键词:系统生物技术 代谢工程 基因组 转录组 代谢组 蛋白组 
大肠杆菌邻氨基苯甲酸合成酶编码基因trpED的克隆与表达被引量:3
《生物技术通讯》2007年第2期183-185,共3页李剑欣 郭长江 刘云 林维平 张绪梅 徐琪寿 
国家自然科学基金项目(30300010);天津市科技攻关项目(033182711)
目的:通过基因重组的方法获得在体外具有邻氨基苯甲酸合成酶活性的基因trpED,为进一步解除反馈抑制的基因改造寻找靶标。方法:分别构建重组质粒pBV220-trpE和pBV220-trpD;由于trpE和trpD存在翻译偶联现象,将其自大肠杆菌基因组中经PCR...
关键词:trpED基因 邻氨基苯甲酸合成酶 色氨酸 生物合成 
大肠杆菌PGDH末端缺失突变体的构建及抗反馈抑制效应分析被引量:6
《中国生物化学与分子生物学报》2006年第10期806-810,共5页张绪梅 郭长江 刘云 杨继军 韦京豫 徐琪寿 
国家自然科学基金( No.30300010);天津市科技攻关项目(No.033182711)~~
为了获得具有抗反馈抑制性质的大肠杆菌磷酸甘油酸脱氢酶(PGDH,d-3-phosphoglycerate dehydrogenase,EC 1.1.1.95),通过对其碱基序列和蛋白质结构分析,用PCR突变法构建突变酶M1(缺失第410位氨基酸)、M2(缺失407~410位氨基酸)、M...
关键词:大肠杆菌 PGDH 蛋白纯化 缺失突变体 抗反馈抑制 
qa-3稀有密码子和mRNA结构改造及其在大肠杆菌中的高效表达被引量:17
《生物工程学报》2006年第2期198-203,共6页刘礼兵 刘云 何华庆 李永辉 徐琪寿 
国家自然科学基金资助项目(No.30300010)。~~
奎尼酸脱氢酶的高表达是奎尼酸生物合成的代谢工程研究的关键和基础。粗糙脉孢菌基因组中编码奎尼酸脱氢酶的基因qa-3在大肠杆菌中不表达,根据大肠杆菌密码子使用频率分析qa-3基因,发现有27个稀有密码子,其中编码Arg(R)的有8个,编码Gly...
关键词:qa-3 密码子 MRNA二级结构 奎尼酸脱氢酶 
大肠杆菌trpBA基因的克隆表达被引量:5
《生物技术通讯》2006年第1期12-14,共3页张绪梅 郭长江 刘云 杨继军 韦京豫 徐琪寿 
国家自然科学基金项目(30300010);天津市科技攻关项目(033182711)
目的:提高大肠杆菌中色氨酸合成酶的表达量和表达活性。方法:利用PCR方法从大肠杆菌K-12的基因组中直接克隆出紧密连锁trpB和trpA基因(简称trpBA),并将其连接到原核表达载体pet22b(+)中,得到重组质粒pet22b(+)-trp-BA,转化大肠杆菌BL21,...
关键词:大肠杆菌 色氨酸合成酶 trpBA基因 克隆 表达 酶活性 
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