国家自然科学基金(30670441)

作品数：8被引量：4H指数：1
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相关主题：HELA细胞基因片段克隆重组融合蛋白质类逆转录聚合酶链反应更多>>
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Tudor-SN蛋白TSN结构域亚结构片段重组质粒的构建与表达
《天津医药》2011年第10期881-883,985,共4页钱宝鑫 高星杰 朱梦瑜 杨震霞 宋娟 段中潮 邵洁 杨洁 
国家科技部"863"项目(项目编号:2007AA02Z115);国家自然科学基金(项目编号:30670441;30970562;30670802;30811130394;30911130165;30970582);天津市科委国际合作项目(项目编号07JCZDJC07300);国家自然科学重大研究计划培育项目(项目编号90919032);国家教育部高等学校博士学科点专项科研基金(项目编号:20091202110001);天津市教委重点项目(项目编号:2008ZD01);天津医科大学科学基金(项目编号:2007ky03;2009xk09)
目的：研究人类Tudor-SN蛋白TSN结构域4个亚片段的功能，构建重组质粒pEGFP-C2-Tudor-SN-TSN（Ⅰ一Ⅳ）。方法：以重组质粒pSG5-Tudor-SN-flag为模板，聚合酶链反应（PCR）扩增出目的基因，将双酶切后带有粘性末端的目的片段和pEGFP-C2...
关键词：DNA结合蛋白质类 质粒 基因表达 转染 重组融合蛋白质类 人类Tudor-SN蛋白 
重组真核质粒pERFP-C1-hTudor-SN-SN(1～4)的构建和表达
《天津医药》2011年第2期97-100,共4页付晓 朱梦瑜 高星杰 钱宝鑫 王保亚 赵虹 葛林 杨洁 
国家科技部"863"项目(项目编号:2007AA02Z115);国家自然科学基金资助项目(项目编号:30670441;30970562;30670802;30811130394;30911130165;30970582);天津市科委国际合作项目(项目编号:07JCZDJC07300);国家自然科学重大研究计划培育项目(项目编号:90919032);国家教育部高等学校博士学科点专项科研基金(项目编号:20091202110001);天津市教委重点项目(项目编号:2008ZD01);天津医科大学科学基金(项目编号:2007ky03;2009xk09)
目的:将人类Tudor-SN蛋白SN(1～4)基因片段分别定向连入pERFP-C1质粒,使Tudor-SN蛋白SN各功能片段与红色荧光蛋白在HeLa细胞内融合表达。方法:以重组质粒pSG5-Tudor-SN-flag为模板,PCR法扩增出目的基因,利用EcoRⅠ和BamHⅠ双酶切法将目...
关键词：质粒 遗传载体 发光蛋白质类 重组融合蛋白质类 转染 HELA细胞 人类Tudor-SN蛋白 
Identification of p100 target promoters by chromatin immunoprecipitation-guided ligation and selection (ChIP-GLAS)被引量：3
《Cellular & Molecular Immunology》2011年第1期88-91,共4页Xin Liu Lijie Dong Xuejun Zhang Baoya Wang Xinting Wang Hu Li Jinyan He Lin Ge Xiang Jing Zhi Yao Jie Yang 
This work was supported by grants from the National Basic Research Program(973 Program,2009CB918903);863 Project of the Ministry of Science and Technology of China(2007AA02Z115);NSFC(90919032,30970562,30670441,30811130394 and 30870562);Tianjin Municipal Science and Technology Commission(08ZCGHHZ01900 and 08JCYBJC07700);Specialized Fund for the Doctoral Program of Higher Education(20091202110001);Tianjin Educational Committee Foundation(2008ZD01).
The multifunctional protein p100 is a vital transcriptional regulator that increases gene transcription by forming a physical bridge between promoter-specific transcription factors and the basal transcription machiner...
关键词：chromatin immunoprecipitation MICROARRAY p100 protein 
pEGFP-CI-G3BP转染Hela细胞及其在细胞中的表达
《天津医药》2008年第7期484-485,I0001,共3页葛林 步天栩 何津岩 邵洁 东莉洁 方建飞 李晓冬 孙晓明 杨洁 
"863"国家高技术研究发展计划(项目编号:2007AA02Z115);国家教育部新世纪人才支持计划(项目编号:NCET-04-0245);国家自然科学基金(项目编号:30670441;30300070);天津市科委应用基础研究重点项目(项目编号:07JCZDJC07300);天津市科委国际合作项目(项目编号:05YFGHHZ01300)
目的:了解G3BP蛋白在细胞中的表达及定位。方法:利用脂质体lipofectamine2000将提取的质粒pEGFP-CI-G3BP转染进入Hela细胞,培养24h后荧光倒置显微镜观察绿色荧光的表达情况及其在细胞中的定位。结果:pEGFP-CI-G3BP质粒被成功转入Hela细...
关键词：HELA细胞 脂质体 载体蛋白质类 转染 
基因转录与pre-mRNA剪接的偶联蛋白被引量：1
《医学分子生物学杂志》2008年第3期254-257,共4页步天栩 杨洁 姚智 
国家自然科学基金(No.30670441);国家高技术研究发展计划(863计划)(No.2007AA02Z115);天津市科委应用基础研究重点项目(No.07JCZDJC07300);高等学校博士学科点专项基金(No.20040062003)~~
真核基因的表达是一个复杂的过程,包括转录、pre-mRNA剪接、翻译等步骤。其中转录和pre-mRNA的剪接是基因表达中的两个重要环节,它们都要通过复杂的蛋白复合物来执行功能。目前研究发现这两个过程并不是绝对独立的,而是偶联在一起同时...
关键词：转录 剪接 RNA聚合酶 Ski相互作用蛋白 运动神经元生存蛋白 
人Prp8蛋白基因片段的克隆
《天津医药》2007年第11期801-803,I0001,共4页洪敬欣 步天栩 史雪彬 邵洁 姚智 杨洁 
国家自然科学基金资助项目(项目编号:30670441;30300070);天津市科委应用基础研究重点项目(项目编号:043802811);国家教育部新世纪人才支持计划(项目编号:NCET-04-0245);高等学校博士学科点专项基金(项目编号:20040062003)
目的:构建人Prp8基因全长真核表达质粒。方法:从HeLa细胞中提取总体RNA,两步法合成cDNA,利用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法,扩增出人Prp8基因的四段序列,首先克隆至pTZ57R/T载体,再定向克隆至真核表达载体pcDNA3.1(+),构建pcDNA3.1(+)-P...
关键词：抗体 单克隆 基因表达 遗传载体 质粒 真核细胞 逆转录聚合酶链反应 人类 
人类U5·116 ku蛋白基因片段的克隆
《天津医药》2007年第6期401-404,共4页洪敬欣 邵洁 史雪彬 姚智 杨洁 
国家自然科学基金资助项目(项目编号:30670441;30300070);天津市科委应用基础研究重点项目(项目编号:043802811);国家教育部新世纪人才支持计划(项目编号:NCET-04-0245);高等学校博士学科点专项基金(项目编号:20040062003)
目的:构建人类U5·116 ku基因全长真核表达质粒。方法:从HeLa细胞中提取总体RNA,一步法合成单链cDNA,利用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法,扩增出人类U5·116 ku基因两段连续的序列,首先分别克隆至pTZ57R/T载体,两段序列连接成全长后再定...
关键词：HELA细胞 基因表达 遗传载体 质粒 克隆 分子 逆转录聚合酶链反应 人类 U5·116ku蛋白 
Comparison of the unlabeled and labeled pre-mRNA splicing assays in vitro
《Journal of Microbiology and Immunology》2006年第4期313-317,共5页TIAN XU BU JING XIN HONG ZHI YAO JIE YANG 
We thank Hao Zhang for technical assistance, Dr. Robin Reed for providing AdML plasmids. The work was supported by grants from National Natural Science Foundation of China （30670441, 30300070）;Program for New Century Excellent Talents in University （NCET-04-0245）; Specialized Fund for the Doctoral Program of Higher Education （20040062003）;Tianjin Municipal Science and Technology Commission （043802811）.
Pre-mRNA splicing is a fundamental process required for the expression of most metazoan genes. It is carried out by the spliceosome that catalyzes the removal of non-coding intron sequences to ligate exons into mature...
关键词：Pre-mRNA splicing Spliceoseme Ethidiurn Bromide staining Autoradiography 
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