广东省自然科学基金(5006678)

作品数:16被引量:74H指数:5
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相关作者:张桂红罗玉均孔留五何逸民廖明更多>>
相关机构:华南农业大学佛山科学技术学院哈尔滨维科生物技术开发公司中国农业科学院哈尔滨兽医研究所更多>>
相关期刊:《上海畜牧兽医通讯》《中国兽医杂志》《中国农业科学》《中国兽医科学》更多>>
相关主题:猪圆环病毒2型鸭肝炎病毒DNA病毒PCV-2全基因组更多>>
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高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒实时荧光定量RT-PCR鉴别诊断方法的建立
《广东畜牧兽医科技》2009年第6期25-29,共5页孔留五 张桂红 姜增固 康艳梅 秦宏阳 曹宗喜 张得玉 张翔峰 
广东省自然科学基金(5006678);广东省科技计划项目(2007A0203006)
根据GenBank收录的PRRSV基因序列,利用PRRSV经典变异株与缺失变异株NSP2基因序列特点,设计合成两对特异性引物,经RT-PCR扩增后,用T4连接酶将目的片段与pMD18-T载体连接,并转化到大肠杆菌DH-5a株感受态细胞。提取的质粒经PCR、酶切和测...
关键词:PRRSV 实时荧光定量 鉴别诊断 绝对含量 
猪圆环病毒2型环介导等温扩增(LAMP)检测方法的研究被引量:15
《中国兽医杂志》2009年第12期7-10,共4页何逸民 邹国秋 张得玉 罗玉均 曹宗喜 何冉娅 秦宏阳 孔留五 张桂红 
国家生猪现代农业产业技术体系基金(hycytx009);广东省自然科学基金(5006678);农业部制标项目
本研究介绍了一种便捷、灵敏而又特异的环介导逆转录等温扩增(LAMP)基因检测技术,该技术分别使用特异对应于靶序列中2对特殊引物,并在Bst DNA聚合酶的作用下对靶序列进行等温核酸扩增反应。本研究对LAMP反应体系和反应条件的优化,结果表...
关键词:猪圆环病毒2型(PCV-2) 环介导等温扩增(LAMP) 敏感性 特异性 快速检测 
猪生殖与呼吸综合征病毒RT-LAMP检测方法的建立被引量:5
《中国兽医科学》2009年第10期890-893,共4页张得玉 康艳梅 张翔峰 秦宏阳 孔留五 曹宗喜 张桂红 
国家生猪现代农业生产技术体系项目;广东省自然科学基金项目(5006678);广东省科技计划项目(2007A0203006);广东省农业厅广东省科技厅科技计划重大项目(2008A020100020)
针对美洲型猪生殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)保守的N蛋白基因设计了一套RT-LAMP的检测引物,通过优化反应条件,建立了一种检测PRRSV的RT-LAMP诊断方法。特异性和敏感性试验结果显示,该方法能够特异地检测美洲型PRRSV,其最低检测限为10个拷...
关键词:猪生殖与呼吸综合征病毒 逆转录环介导恒温核酸扩增 诊断 
2型猪圆环病毒感染对小鼠组织中Caspase3、Bak及Bcl-2基因表达的影响被引量:2
《中国预防兽医学报》2009年第5期342-345,共4页秦宏阳 罗玉均 张得玉 冯春复 何逸民 张桂红 
863计划(2006AA10A204);国家生猪现代农业产业技术体系科学家岗位,财政部、农业部项目(hycytxoo9);广东省自然科学基金(5006678);农业部制标项目
Caspase3、Bcl-2、Bak是细胞凋亡过程中3种重要的调节蛋白,为研究感染猪圆环2型病毒(PCV2)后体内细胞的凋亡情况,本实验以BALB/c小鼠为实验模型,建立了SYBR Green I实时定量PCR检测细胞凋亡的方法。结果表明实验组Caspase3的表达在各时...
关键词:PCV-2 细胞凋亡 CASPASE3 Bcl-2 BAK 
Ⅰ型鸭肝炎病毒VP1基因克隆及其原核表达被引量:2
《上海畜牧兽医通讯》2009年第2期8-10,共3页孔留五 康艳梅 何逸民 李小康 潘全会 张桂红 
广东省自然科学基金(5006678)
根据Genbank中的Ⅰ型鸭肝炎病毒全基因序列设计了扩增Ⅰ型鸭肝炎病毒VP1基因的包含有EcoRV和XhoⅠ酶切位点的引物,用该特异性引物从Ⅰ型鸭肝炎病毒cDNA模板中扩增得到目的基因VP1,以相同的限制性内切酶酶切目的基因和表达载体pET32a后...
关键词:Ⅰ型鸭病毒性肝炎病毒 VP1基因 诱导表达 
猪圆环病毒2型感染对小鼠脾脏中IFN-γ基因表达的影响被引量:2
《中国畜牧兽医》2009年第2期75-77,共3页何冉娅 孙伟 罗玉均 冯春复 何逸民 张得玉 孔留五 张桂红 
广东省自然科学基金(5006678);农业部制标项目资助
本研究对PCV-2感染对小鼠组织中IFN-γ基因表达的影响进行了分析。分别取各基因RT-PCR扩增的回收产物进行序列稀释(10-1-10-6),再进行实时荧光定量PCR扩增,扩增完毕后,进行熔解曲线分析,相对定量检测了PCV-2感染小鼠脾脏不同时段IFN-...
关键词:猪圆环病毒2型 小鼠 脾脏 IFN-Γ基因 
对Ⅰ型鸭肝炎病毒3D基因克隆及其原核表达的研究被引量:3
《四川畜牧兽医》2009年第2期25-27,共3页孔留五 康艳梅 何逸民 罗玉均 潘全会 张桂红 
广东省自然科学基金项目(5006678)
根据Genbank中的Ⅰ型鸭肝炎病毒全基因序列,应用Primer 5.0分析软件设计合成了扩增I型鸭肝炎病毒3D基因的一对引物,用该特异性表达引物体外克隆Ⅰ型鸭病毒性肝炎病毒3D基因,构建重组表达质粒pET32a-3D,将此重组质粒转化到受体菌Rosseta...
关键词:鸭病毒性肝炎病毒(DHV) 3D基因 诱导表达 
Molecular Characterization and SYBR Green I-Based Quantitative PCR for Duck Hepatitis Virus Type 1被引量:1
《Agricultural Sciences in China》2008年第9期1140-1146,共7页LUO Yu-jun ZHANG Gui-hong XU Xiao-qin CHEN Jian-hong LIAO Ming 
the Natural Science Foundation of Guangdong Province,China (5006678);the National Natural Science Foundation of China
To determine the genomic sequence of a duck hepatitis virus type 1 (DHV-1) strain, real-time quantitative polymerase chain reaction (RTQ-PCR) assay based on SYBR Green I technology was developed to target 3D gene ...
关键词:duck hepatitis virus type 1 complete genome real-time RT-PCR 
I型鸭肝炎病毒VP1、3D基因克隆及其在大肠杆菌中的表达被引量:8
《微生物学通报》2008年第7期1068-1071,共4页孔留五 罗玉均 张桂红 陈建红 徐小芹 廖明 康艳梅 何逸民 
广东省自然科学基金(No.5006678)
根据GenBank中的I型鸭肝炎病毒全基因序列设计了扩增I型鸭肝炎病毒VP1、3D基因的引物,用该特异性表达引物从I型鸭肝炎病毒cDNA模板中扩增得到目的基因VP1、3D,用相同的限制性内切酶酶切目的基因和表达载体pET32a后构建重组表达载体,转...
关键词:Ⅰ型鸭肝炎病毒 VP1基因 3D基因 克隆表达 
2株猪圆环病毒2型分离毒株全基因组的克隆及序列分析被引量:4
《华南农业大学学报》2008年第3期80-84,共5页何逸民 孔留五 罗玉均 潘全会 曹宗喜 张桂红 
国家生猪现代农业产业技术体系;广东省自然科学基金(5006678);农业部制标项目
参考GenBank发表的猪圆环病毒2型(PCV2)全基因组序列,设计2对引物,通过PCR技术扩增出2株PCV2流行株的全基因,并进行了序列测定分析.结果表明,2个分离株基因组全长分别为1767bp和1768bp,2个分离株之间的核苷酸相似性为97.3%,...
关键词:猪圆环病毒2型 克隆 序列分析 
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