国家自然科学基金(31160501)

作品数:11被引量:18H指数:3
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犬新孢子虫NC-GFP株在4种细胞中培养的比较被引量:4
《中国兽医学报》2018年第9期1716-1719,共4页谢素珠 李航 张宁宁 陈健 杜秋明 贾立军 
国家自然科学基金资助项目(31160501,31360605);吉林省重点科技攻关基金资助项目(20140204078NY);吉林省自然科学基金资助项目(20160101201JC)
为筛选出犬新孢子虫的最佳培养细胞,本试验对利用非洲绿猴肾细胞(Vero)、人胚肾细胞(HEK-293)、人宫颈癌细胞(HeLa)和小鼠骨髓瘤细胞(SP2/0)培养犬新孢子虫NC-GFP株进行了比较研究,连续培养犬新孢子虫15d,观察Vero细胞、HEK-29...
关键词:NC-GFP Vero细胞 HEK-293细胞 HeLa细胞 小鼠骨髓瘤细胞 
延边黄牛胆绿素还原酶cDNA的克隆、表达及鉴定
《中国兽医学报》2017年第5期936-940,共5页汪雨婷 关立增 胡楠 蔡锦顺 
国家自然科学基金资助项目(31160501)
为了克隆延边黄牛胆绿素还原酶(Biliverdin reductase,BVR)的CDNA序列后在大肠杆菌中表达、纯化并进行鉴定。本试验根据黄牛、马和东北虎BVR基因的cDNA序列设计引物,通过3′和5′RACE方法获得延边黄牛BVR基因全长cDNA序列。之后构建pET-...
关键词:延边黄牛 胆绿素还原酶 克隆 RACE 
牛源犬新孢子虫NcGRA7基因的克隆及原核表达分析被引量:3
《中国预防兽医学报》2013年第9期773-775,共3页贾立军 张守发 李男礼 
国家自然科学基金(31160501);吉林省青年科研基金(201201076);吉林省自然科学基金(201115230);延边大学科技发展计划(延大科合字2011第37号)
为了解牛源犬新孢子虫NcGRA7基因的生物学特性,本实验采用PCR技术扩增牛源犬新孢子虫NcGRA7基因,并连接至pMD-18T载体中,构建重组质粒pMD18-NcGRA7,经PCR、酶切鉴定及测序分析,将NcGRA7基因连接到原核表达载体pGEX-4T-1中,构建重组表达...
关键词: 犬新孢子虫 NcGRA7 原核表达 
犬新孢子虫AMA1基因重组真核表达质粒的构建及其在Vero细胞中的表达被引量:1
《中国兽医科学》2013年第7期718-722,共5页郭焕平 贾立军 薛书江 钱年超 张守发 
国家自然科学基金资助项目(31160501);吉林省青年科研基金项目(201201076);吉林省自然科学基金项目(201115230);延边大学科技发展计划项目(延大科合字2011第37号);博士科研启动基金(延大校发[2012]173号)
为构建犬新孢子虫AMA1基因的重组真核表达质粒,了解其在Vero细胞中的表达情况,采用RT-PCR方法扩增牛源犬新孢子虫吉林株AMA1全长基因,构建了重组真核表达质粒pVAX1-NcAMA1;利用脂质体介导转染法将该重组质粒转染至Vero细胞,应用间接免...
关键词:犬新孢子虫 AMA1基因 真核表达 
犬新孢子虫Nc-GFP株对BALB/c小鼠的人工感染试验被引量:1
《畜牧与兽医》2013年第6期84-86,共3页贾立军 张守发 郭焕平 张坤 孙广庆 
国家自然科学基金(31160501);吉林省青年科研基金(201201076);吉林省自然科学基金(201115230);延边大学项目(延大科合字2011第37号;博士科研启动基金)
为了解犬新孢子虫Nc-GFP株的生物学特性,本试验采用Vero细胞培养的犬新孢子虫速殖子,腹腔接种BALB/c小鼠,观察小鼠的临床症状及发病情况,脱颈处死濒死期小鼠,无菌分离小鼠脑组织,接种Vero细胞进行连续培养,并提取脑组织DNA进行NcMAG1基...
关键词:Nc-GFP BALB C小鼠 脑组织 虫体分离 
牛源犬新孢子虫NcSRS2-NcGRA7融合基因的克隆与生物信息学分析
《畜牧与兽医》2013年第1期25-28,共4页贾立军 张守发 谷振甲 
国家自然科学基金(31160501);吉林省青年科研基金(201201076);延边大学基金(延大科合字2011第37号)
为了解牛源犬新孢子虫NcSRS2-NcGRA7融合基因的生物学特性,本试验提取牛源犬新孢子虫基因组DNA,应用PCR技术扩增犬新孢子虫表面蛋白基因NcSRS2和致密颗粒蛋白基因NcGRA7,SOE-PCR技术拼接NcSRS2和NcGRA7基因,构建NcSRS2-NcGRA7融合基因...
关键词: 犬新孢子虫 NcSRS2-NcGRA7 克隆 生物信息学 
牛源犬新孢子虫NcSAG1基因重组腺病毒株的构建及动物免疫试验被引量:1
《中国农业科学》2012年第22期4705-4712,共8页贾立军 张守发 
国家自然科学基金(31160501);吉林省青年科研基金(201201076);吉林省自然科学基金(201115230);延边大学科技发展计划(延大科合字2011第37号)
【目的】构建表达牛源犬新孢子虫NcSAG1基因的重组腺病毒株,并接种Balb/c小鼠,评价重组腺病毒株对Balb/c小鼠的体液免疫和细胞免疫应答水平。【方法】PCR扩增牛源犬新孢子虫NcSAG1基因,构建pMD18-T-NcSAG1克隆质粒和pCR259-NcSAG1重组...
关键词: 犬新孢子虫 NcSAG1 重组腺病毒 动物免疫 
犬新孢子虫不同靶基因PCR检测方法的比较被引量:3
《中国兽医科学》2012年第9期954-957,共4页郭焕平 贾立军 焦石 张守发 
国家自然科学基金资助项目(31160501);吉林省自然科学基金项目(201115230)
为筛选出检测犬新孢子虫更为特异、敏感的PCR方法,分别以MAG1、SAG1和Nc5为靶基因进行PCR检测,并从敏感性、特异性和临床样本检出率等方面进行了比较。结果显示,以Nc5为靶基因的PCR方法敏感性最高,最小检测DNA量为17.8fg/μL;以MAG1为...
关键词:犬新孢子虫 MAG1基因 SAG1基因 Nc5基因 PCR方法 
犬新孢子虫MAG1与IFN-γ融合基因重组真核质粒的真核共表达及免疫学评价
《中国预防兽医学报》2012年第8期662-666,共5页焦石 贾立军 张立霞 钱年超 刘明明 黄国明 张守发 
国家自然科学基金(31160501)
为对犬孢子虫MAG1与IFN-γ融合基因重组真核质粒进行免疫学评价,本实验以含有MAG1-IFN-γ基因片段的克隆质粒为模板,扩增MAG1-IFN-γ目的片段,构建pVAX-MAG1-IFN-γ重组真核表达质粒,将其转染Vero细胞,采用间接免疫荧光(IFA)和western b...
关键词:犬新孢子虫 MAG1-IFN-γ 真核共表达 
表达牛源犬新孢子虫NcSRS2基因重组腺病毒的构建及免疫原性分析被引量:6
《畜牧兽医学报》2012年第3期446-452,共7页贾立军 于龙政 张守发 
国家自然科学基金(31160501);吉林省自然科学基金(201115230);吉林省青年科研基金(201201076)
为构建牛源犬新孢子虫NcSRS2基因重组腺病毒,并分析其免疫原性,PCR扩增牛源犬新孢子虫Nc-SRS2基因,构建克隆质粒pMD18-T-NcSRS2、重组腺病毒穿梭质粒pCR259-NcSRS2及表达质粒Transpose-Ad-NcSRS2,脂质体介导转染QBI-HEK293细胞,包装重...
关键词: 犬新孢子虫 NCSRS2基因 重组腺病毒 免疫原性 
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