国家高技术研究发展计划(2006AA03Z451)

作品数:16被引量:13H指数:3
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大腹园蛛主壶腹腺丝基因的筛选及序列分析被引量:1
《东华大学学报(自然科学版)》2015年第1期53-59,共7页张雪 陈格飞 孟清 
国家"八六三"高技术研究发展计划资助项目(2006AA03Z451);国家自然科学基金资助项目(31070698);上海市基础研究重点资助项目(10JCl400300);教育部高等学校博士学科点专项科研基金资助项目(20120075110007)
为研究蛛丝蛋白编码基因和蛋白的组成结构模式、进化,并为蛛丝仿生提供更多的基因资源,运用3D/PCR(three-dimensional polymerase chain reaction)技术对大腹园蛛(A.ventricosus)Fosmid基因组文库进行主壶腹腺丝(MaSp1)编码基因的筛选,...
关键词:大腹园蛛 主壶腹腺丝蛋白 3D/PCR技术 序列分析 
盐离子对次壶腹腺丝蛋白重组模块的影响被引量:1
《生物工程学报》2014年第8期1308-1317,共10页王佳 陈格飞 孟清 
国家自然科学基金(No.31070698);国家高技术研究发展计划(863计划)(No.2006AA03Z451);上海市科委基础研究重点项目(No.10JC1400300);教育部博士点基金项目(No.20120075110007)资助~~
为研究不同生理环境对蛛丝蛋白组装及成丝的影响,首次以MiSp序列为对象,研究其NTR1SR2CT重组模块在不同种类(浓度)盐离子条件下的聚集和成纤维特性及其在成纤维过程中二级结构的变化。基于大腹园蛛MiSp全长序列构建NTR1SR2CT模块,并在...
关键词:次壶腹腺丝蛋白 组装 盐离子 二级结构 丝纤维 
应用突变的断裂蛋白质内含子标记蛋白质N端被引量:1
《中国生物化学与分子生物学报》2014年第5期508-515,共8页戴旭东 李佳 刘相钦 孟清 
加拿大国家科学与工程研究委员会基金;国家高技术研究发展计划(863计划,No.2006AA03Z451);国家自然科学基金项目(No.31070698);上海市基础研究重点项目(No.10JC1400300);教育部博士点基金项目(No.20120075110007)资助~~
蛋白质的特异位点修饰可以帮助了解蛋白质的结构与功能.但是,现有的蛋白质特异位点标记方法种类有限,而且存在局限性,所以有必要开发新的蛋白质特异位点标记方法.以谷胱甘肽-S-转移酶(GST)为研究对象,借助蛋白质反式剪接技术,建立了利...
关键词:断裂蛋白质内含子 蛋白质剪接 N端标记 荧光基团 
次壶腹腺丝蛋白功能模块的研究被引量:3
《生命科学研究》2014年第1期28-32,49,共6页贾小娜 陈格飞 孟清 
国家自然科学基金资助项目(31070698);国家高技术研究发展计划项目(863计划)(2006AA03Z451);上海市科委基础研究重点项目(10JC1400300);教育部博士点基金资助项目(20120075110007);教育部直属高校外聘专家-特色项目
蜘蛛丝是天然的生物材料,具有潜在的巨大应用价值。研究蜘蛛丝蛋白质的结构与功能,有助于破解蜘蛛丝蛋白质的成丝机理,为制备优良材料学性能的仿生蜘蛛丝纤维提供理论依据。以MiSp蜘蛛丝的重复区和C端非重复区蛋白多肽为研究对象,在不...
关键词:次壶腹腺丝蛋白(MiSp) 重组模块 Α螺旋 纤维 
大腹园蛛次壶腹腺丝的表达被引量:3
《生物工程学报》2013年第9期1323-1331,共9页杨子江 陈格飞 孟清 
国家自然科学基金(No.31070698);国家高技术研究发展计划(863计划)(No.2006AA03Z451);上海市科委基础研究重点项目(No.10JC1400300);教育部博士点基金项目(No.20120075110007)资助~~
基于大腹园蛛次壶腹腺丝Minor Ampullate Spidroin全长编码基因最新报道,研究了该基因的表达。利用PCR扩增该基因重复区一段长1 348 bp的片段P1,融合his-tag标签,构建酵母表达载体,在毕赤酵母菌GS115进行表达。同时构建大肠杆菌表达载体...
关键词:次壶腹腺丝蛋白 毕赤酵母表达系统 大肠杆菌表达系统 
多种S1断裂内含肽间的体内交叉反应(英文)
《中国生物化学与分子生物学报》2013年第8期734-739,共6页宋慧玲 刘相钦 孟清 
Supported by National Science and Engineering Research Council grant of Canada;National High Technology Research and Development Program of China(863 Program,No.2006AA03Z451);National Natural Science Foundation of China(No.31070698);Shanghai Key Projects of Basic Research(No.10JC1400300);the Ph.D.Programs Foundation of Ministry of Education of China(No.20120075110007)~~
断裂内含肽含有两个独立分离的多肽片段(N端内含肽和C端内含肽),它催化蛋白质反式剪接反应,在蛋白质研究与蛋白质工程中已得到诸多实际应用.在蛋白质反式剪接过程中,内含肽的N端内含肽和C端内含肽通过结构互补特异性地非共价组合.然而,S...
关键词:断裂内含肽 蛋白质反式剪接 交叉反应 
悦目金蛛丝蛋白TuSp1重复模块特征被引量:2
《东华大学学报(自然科学版)》2013年第2期196-201,200-201,共6页王金雷 陈格飞 李佳 林瑛 孟清 
国家"八六三"高技术研究发展计划资助项目(2006AA03Z451);国家自然科学基金资助项目(31070698);上海市基础研究重点资助项目(10JC1400300);教育部高等学校博士学科点专项科研基金资助项目(20120075110007)
针对蜘蛛管状腺丝蛋白(TuSp)结构进行克隆和分析,基于悦目金蛛(Argiope amoena,A.amoena)管状腺总RNA,利用简并引物和巢式聚合酶链反应(PCR)技术克隆AaTuSp1编码基因序列1273bp,其包含3个重复单元,每个重复单元编码176个氨基酸,重复单...
关键词:悦目金蛛 管状腺丝蛋白 重复单元 巢式聚合酶链反应(PCR) 进化 
Euprosthenops australis牵引丝蛋白的原核表达被引量:1
《生命科学研究》2013年第1期14-19,62,共7页张秀丽 陈格飞 林瑛 李佳 孟清 
国家高技术研究发展计划(863计划)资助项目(2006AA03Z451);国家自然科学基金资助项目(31070698);教育部博士点基金资助项目(20120075110007)
参照GenBank收录的牵引丝蛋白编码序列,经过密码子优化,人工合成3段cDNA序列:NT、CT和4Rep,由Ⅰ型限制性内切酶BsaⅠ和BspMⅠ介导无缝拼接,分别构建4RepCT、NT4RepCT、NT8RepCT和NT12RepCT重组模块.通过改造表达载体和优化培养温度,成...
关键词:4Rep 基因克隆 融合蛋白 原核表达 
定向进化提高微小蛋白质内含子Ter DnaE-3剪接活性的研究
《中国生物工程杂志》2012年第5期79-84,共6页荀启静 林瑛 邱沛然 孟清 
国家"863"计划专题项目(2006AA03Z451);国家自然科学基金面上项目(31070698);国家自然科学基金委青年基金(30800186);教育部博士点新教师基金(200802551026)资助项目
目前,蛋白质内含子在蛋白质工程领域中得到越来越广泛的应用。为提高微小蛋白质内含子Ter DnaE-3(Trichodesmium erythraeum)在异源宿主中的剪接活性,采用易错PCR技术,通过改变反应体系中dNTP、Mg2+、Mn2+的浓度等手段,借助依赖卡那霉...
关键词:蛋白质内含子 卡那筛选系统 定向进化 蛋白质剪接 
新型T+1断裂蛋白质内含子的构建
《东华大学学报(自然科学版)》2012年第1期50-54,共5页王瑾 林瑛 郑言成 孟清 
国家"八六三"高技术研究发展计划资助项目(2006AA03Z451);国家自然科学基金资助项目(30800186);教育部高等学校博士学科点专项科学基金(新教师基金)资助项目(200802551026)
首次从天然C端外显子为苏氨酸(Thr)的标准蛋白质内含子(TerSnf2)构建出两类T+1型断裂蛋白质内含子:Snf-S0和Snf-S1,通过蛋白印迹法测定Snf-S0和Snf-S1介导的蛋白质反式剪接效率分别达到53.5%和33.3%;当这两类断裂蛋白质内含子C端外显子...
关键词:断裂蛋白质内含子 蛋白质反式剪接 TER Snf2 
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