国家自然科学基金(30270985)

作品数：11被引量：25H指数：3
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相关期刊：《动物医学进展》《中国人兽共患病学报》《中国兽医学报》《生物工程学报》更多>>
相关主题：志贺毒素H7O157肠出血性大肠杆菌O157:H7IPTG更多>>
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出血性大肠杆菌O157菌壳的制备研究被引量：3
《中国人兽共患病学报》2010年第7期672-675,679,共5页刘爽 刘军 周博 王文东 李鹏 祝令伟 纪雪 冯书章 
国家支撑计划(2007BAB55B05);国家自然科学基金(30270985)联合资助
目的利用温度控制噬菌体PhiX174裂解基因E的表达,制备出血性大肠杆菌O157∶H7菌壳,鉴定其裂解效率并观察其形态。方法利用PCR技术扩增得到噬菌体PhiX174裂解基因E并克隆到质粒pBV220中,将重组质粒导入出血性大肠杆菌O157∶H7。重组菌株O...
关键词：出血性大肠杆菌 O157∶H7 菌壳 
Stx1A-LHRH融合毒素基因的构建及高效表达
《中国兽医学报》2010年第5期620-623,共4页王文东 刘军 孙洋 祝令伟 郭学军 周博 冯书章 
国家自然科学基金资助项目(30270985)
通过PCR方法,从肠出血性大肠杆菌O157:H7的基因组DNA中扩增出Stx1A基因序列,并将之与编码LHRH的基因序列连接起来,构建编码Stx1A-LHRH的重组融合基因片段,并定向克隆到表达质粒pET28a的NcoⅠ和EcoRⅠ位点之间,构建重组表达质粒pET28a::s...
关键词：志贺毒素 LHRH 融合毒素 高效表达 
肠出血性大肠杆菌O157ler基因缺失突变株的构建及其特性被引量：2
《中国兽医学报》2008年第11期1269-1272,共4页孙洋 刘军 郭学军 张勇 祝令伟 周博 冯书章 
国家自然科学基金资助项目(30270985)
以肠出血性大肠杆菌O157∶H786～24为始发菌株,利用自杀性载体pCVD442,根据同源重组的原理敲除了染色体上的ler基因,构建了O157∶H7 ler基因缺失突变菌株,并对其生物学特性进行了初步研究。荧光定量PCR试验结果表明,始发菌株对HEp-2细...
关键词：肠出血性大肠杆菌O157:H7 ler基因 缺失突变 
出血性大肠杆菌O157基因缺失疫苗株的构建及其免疫被引量：2
《生物工程学报》2007年第2期211-217,共7页刘军 孙洋 冯书章 
国家自然科学基金资助(No.30270985)~~
出血性大肠杆菌O157感染是重要的新发食物源性传染病,主要致病特征之一是能引起人肠上皮细胞特征性的A/E损伤,A/E损伤主要是由LEE致病岛所编码的毒力因子所引起,ler是LEE致病岛毒力基因群的中心调节基因,对LEE致病岛所编码的毒力因子有...
关键词：出血性大肠杆菌O157 基因缺失突变 免疫接种 弱毒疫苗 
肠出血性大肠埃希菌O157疫苗研究进展被引量：2
《动物医学进展》2006年第10期6-10,共5页孙洋 冯书章 
国家自然科学基金项目(30270985)
肠出血性大肠埃希菌感染是重要的新发传染病,在世界范围内多次暴发流行。肠出血性大肠埃希菌O157能引起人的出血性结肠炎、溶血性尿路综合征和血栓性血小板紫癜等全身性并发症。控制该病暴发流行的最好措施是免疫预防,但目前还没有研制...
关键词：大肠埃希菌O157 疫苗 毒力 重组载体活菌苗 
肠出血性大肠杆菌O157∶H7主要保护性抗原单克隆抗体的研制及特性分析被引量：5
《中国兽医学报》2006年第3期275-277,共3页祝令伟 冯书章 刘军 陈萍 
国家自然科学基金资助项目(30270985)
以基因重组技术构建工程菌株表达肠出血性大肠杆菌(EHEC)O157∶H7主要保护性抗原紧密素和志贺毒素的融合蛋白。融合蛋白采用凝胶分离电洗脱法回收纯化,用纯化的蛋白抗原免疫BALB/c小鼠,细胞融合后获得的3株杂交瘤细胞株1G2、3C6、1B10,...
关键词：肠出血性大肠杆菌O157:H7 单克隆抗体 紧密素 志贺毒素 
出血性大肠杆菌O157 eae-stx1/2B融合基因的构建和表达被引量：3
《中国兽医学报》2005年第3期270-272,共3页陈萍 刘军 祝令伟 孙洋 郭学军 齐翀 冯书章 郑明光 
国家自然科学基金资助项目(30270985)
构建表达eae和stx1/2B的融合基因,克隆eae基因的C端280个氨基酸残基(Int280)基因部分,以正确地阅读框定向插入到含有stx1/2B融合基因的质粒,构建重组质粒,将其转化于BL21(DE3),用IPTG进行诱导表达,经SDS-PAGE电泳检测,该融合蛋白获得了...
关键词：大肠杆菌O157 融合基因 构建 出血性 融合蛋白 氨基酸残基 总蛋白含量 单克隆抗体 亚单位疫苗 重组质粒 诱导表达 IPTG 电泳检测 PAGE 高效表达 目的蛋白 薄层扫描 E基因 SDS 表达量 分析表 C端 
EHECO157∶H7stx基因缺失突变株的构建及其特性被引量：1
《中国兽医学报》2005年第2期166-169,共4页孙洋 刘军 郭学军 常国权 尹铁勇 冯书章 
国家自然科学基金资助项目(30270985)
针对肠出血性大肠杆菌 (EHEC) O1 5 7∶H7的 stx基因 ,通过 PCR扩增出缺失了 1 83bp的 stx基因片段 ,将其克隆到自杀性载体 p CVD4 4 2中 ,然后通过接合性转导将重组自杀性质粒 p CVD4 4 2∷Δstx从大肠杆菌 SM1 0转到 O1 5 7∶ H7中 ,...
关键词：肠出血性大肠杆菌 stx基因 基因缺失突变 致病性 自杀载体技术 表型 
O157∶H7原噬菌体消除菌株的鉴定与分析被引量：2
《中国人兽共患病杂志》2005年第1期45-48,51,共5页刘军 冯书章 孙洋 郭学军 常国权 尹铁勇 
国家自然科学基金资助项目 (No .3 0 2 70 985 )
目的　O15 7∶H7是一种重要的新发传染病病原 ,它主要引起出血性或非出血性腹泻 ,出血性结肠炎 (HC)或溶血性尿路综合征 (HUS)等。研究表明引起HC和HUS的主要毒力因子是由整合到O15 7基因组中的原噬菌体编码的志贺毒素(Stx) ,包括Stx1和...
关键词：O157:H7 原噬菌体 志贺毒素 
大肠杆菌志贺毒素stxB融合基因的构建及其高效表达被引量：3
《中国兽医学报》2005年第1期28-30,共3页刘军 冯书章 齐翀 孙洋 祝令伟 郭学军 尹铁勇 庄永菊 
国家自然科学基金资助项目 (3 0 2 70 985 )
利用 PCR方法 ,从肠出血性大肠杆菌 O15 7∶ H7的基因组 DNA中 ,分别扩增出 Stx1B和 Stx2 B亚基的结构基因片段 ,然后再通过 PCR将这 2个片段连接起来 ,并定向克隆到表达质粒 p ET2 8a的 Nco 和 Eco R 位点之间 ,构建了重组表达质粒 p ...
关键词：MB 表达量 蛋白S 融合基因 志贺毒素 再通 薄层扫描 诱导时间 位点 IPTG 
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