中央级公益性科研院所基本科研业务费专项(0032007008)

作品数：16被引量：72H指数：5
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相关机构：中国农业科学院北京畜牧兽医研究所吉林大学兰州军区兰州总医院甘肃农业大学更多>>
相关期刊：《动物医学进展》《中国动物保健》《中国人兽共患病学报》《中国兽医科学》更多>>
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抗狂犬病病毒N蛋白单克隆抗体的制备与鉴定被引量：2
《中国人兽共患病学报》2011年第10期866-870,共5页曾妮 宫苗苗 程朝飞 黄华欣 郭李平 李刚 
国家高技术研究发展计划(863计划)(No.2008AA10Z411);北京市科委项目(Z07010501780701);国家公益行业项目(No.200830-14;200903037-2);中央级公益性科研院所基本科研业务费专项(0032007008)
目的制备抗狂犬病病毒N蛋白单克隆抗体,为建立快速准确的狂犬病病毒抗原检测方法奠定基础。方法将狂犬病病毒Flury LEP株N基因克隆至pGEX-6P-1表达载体中,将纯化后的pGEX-6P-1-RV-N蛋白免疫BALB/c小鼠3次。取小鼠脾脏细胞和SP2/0细胞融...
关键词：狂犬病病毒 N蛋白 表达 单克隆抗体 
狂犬病病毒糖蛋白在Bac-to-bac杆状病毒系统中的表达及应用被引量：2
《中国预防兽医学报》2011年第5期366-369,共4页范晓娟 李刚 李伟 曾妮 宫苗苗 
国家高技术研究发展计划(863)项目(2008AA10Z411);国家十一五科技支撑计划(2006BAD6A13-4);中央级公益性科研院所基本科研业务费专项(0032007008)
为表达狂犬病病毒(RV)糖蛋白(G),本研究通过RT-PCR方法克隆RVFluryLEP病毒株G基因,将其克隆至质粒pFastBacHTα中,重组质粒pFastBac-RV-G转化DH10Bac感受态细胞,经同源重组获得重组杆状病毒穿梭质粒Bacmid-RV-G,将其转染昆虫细胞sf21获...
关键词：狂犬病病毒 糖蛋白 杆状病毒表达系统 
减蛋综合征病毒环介导等温扩增检测方法的建立被引量：3
《甘肃农业大学学报》2011年第2期1-5,共5页董春娜 李刚 李伟 张坤 史利军 哈小琴 胡永浩 
国家"863"计划项目(2008AA10Z411);中央级公益性科研院所基本业务费专项(0032007008);北京市科委基金项目(Z07010501780701)
根据GenBank登录的减蛋综合征病毒(EDSV)六邻体基因的保守区,设计了3对环介导等温基因扩增(LAMP)引物,优化反应体系,并对其灵敏性、特异性进行验证.结果表明:LAMP优化后的反应体系为外引物浓度0.1μmol·L-1,内引物浓度0.8μmol·L-1,...
关键词：减蛋综合征病毒 环介导等温扩增 检测 
猪圆环病毒2型间接ELISA抗体检测试剂盒的研制及初步应用被引量：7
《中国畜牧兽医》2011年第3期120-123,共4页胡小华 李刚 史利军 张坤 贾凤芹 
国家高技术研究发展计划"863"计划(2008AA10Z411);国家"十一五"科技支撑计划(2006BAD6A13-4);中央级公益性科研院所基本科研业务费专项(0032007008)
以大肠杆菌原核表达系统表达的猪圆环病毒2型Cap蛋白为抗原,建立猪圆环病毒2型间接ELISA检测方法,优化ELISA反应条件,研制猪圆环病毒2型ELISA抗体检测试剂盒。与商品化试剂盒相比,该检测试剂盒敏感性、特异性和符合率分别为95.12%、92....
关键词：猪圆环病毒2型 CAP蛋白 间接ELISA 抗体检测试剂盒 
减蛋综合征病毒NE4株全基因组序列测定与分析
《甘肃农业大学学报》2010年第5期21-28,共8页董春娜 李刚 邱文英 张坤 哈小琴 
国家"863"计划(2008AA10Z411);中央级公益性科研院所基本业务费专项(0032007008);北京市科委基金项目(Z07010501780701)
根据减蛋综合征病毒(EDSV-76)AV-127株的全基因序列(序列号BK000404),用Premier5.0软件设计22对引物,利用PCR方法对EDSV-76病毒NE4株的全基因组进行了分段扩增、克隆和序列测定,并用DNAStar分析软件对各片段的测序结果进行拼接,将该序列...
关键词：减蛋综合征病毒 基因组 同源性 序列分析 
胶体金免疫层析检测犬、猫抗狂犬病病毒IgG抗体的研究被引量：6
《中国人兽共患病学报》2010年第8期753-757,共5页范晓娟 李刚 邱文英 赵刚 
国家高技术研究发展计划"863"计划(2008AA10Z411);"十一五"国家科技支撑计划(2006BAD6A13-4);中央级公益性科研院所基本科研业务费专项(0032007008);联合资助
目的建立检测犬、猫抗狂犬病病毒(RV)IgG抗体的胶体金免疫层析方法。方法采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金用以标记SPA,同时将重组RVN蛋白、抗SPA抗体分别包被至硝酸纤维素膜的检测线与质控线上,制备一种检测犬、猫抗RVIgG抗体的胶体金...
关键词：狂犬病 N蛋白 胶体金免疫层析 IGG抗体 SPA 
犬和猫狂犬病病毒抗体SPA-ELISA检测方法的建立被引量：4
《中国兽医科学》2010年第6期616-621,共6页范晓娟 曾妮 李刚 
国家高技术研究发展计划(863)项目(2008AA10Z411);国家"十一五"科技支撑计划项目(2006BAD6A13-4);中央级公益性科研院所基本科研业务费专项(0032007008)
采用RT-PCR方法扩增狂犬病病毒(RV)FluryLEP毒株N基因,将该片段克隆至原核表达载体pET-32a(+)中,测序验证后将阳性重组质粒转化至宿主菌E.coliBL21(DE3)中,经IPTG诱导表达,进行SDS-PAGE和Western-blot分析。结果显示,RVN蛋白以包涵体形...
关键词：狂犬病病毒 N蛋白 原核表达 酶联免疫吸附试验 SPA 抗体 
犬细小病毒环介导等温扩增快速检测方法的初步建立被引量：5
《中国预防兽医学报》2010年第4期263-266,共4页张坤 马丽娟 张乃生 李刚 邢国栋 史利军 李伟 
国家"863"计划(2008AA10Z411);中央级公益性科研院所基本业务费专项(0032007008);北京市科委基金项目(Z07010501780701)
为建立犬细小病毒(CPV)环介导等温扩增(LAMP)检测方法,实现CPV的早期快速诊断,本研究根据GenBank登录的CPV VP2基因序列,在其序列保守区域设计LAMP引物,利用CPV基因组DNA为模板进行扩增。结果表明:LAMP方法检测灵敏度达到10-1TCID50/mL...
关键词：犬细小病毒 环介导等温扩增 条件优化 
猪圆环病毒2型LAMP检测方法的建立与评价被引量：5
《中国兽医学报》2010年第2期174-176,共3页史利军 张锦秀 章金刚 李伟 范晓娟 李刚 
中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资助项目(0032007008)
根据猪圆环病毒2型(Porcine circovirus type 2,PCV2)Rep和Cap基因保守区设计2对引物,1对外引物和1对内引物;利用设计的4条引物,在Bst大片段聚合酶的作用下,对PCV2 DNA进行恒温扩增;扩增条件为63℃恒温反应1h;建立了PCV2环媒恒温扩增技...
关键词：猪圆环病毒2型 Rep基因 Cap基因 环媒恒温扩增技术 
狂犬病病毒P基因的原核表达及间接ELISA方法的应用被引量：4
《中国人兽共患病学报》2010年第2期163-167,共5页赵刚 李刚 陈铁桥 范晓娟 
国家高技术研究发展计划"863"计划(2008AA10Z411);中央级公益性科研院所基本业务费专项(0032007008);北京市科委基金项目(Z07010501780701);国家农业行业公益项目(2008-3);联合资助
目的以狂犬病病毒P蛋白作为检测抗原,用间接ELISA方法检测狂犬病病毒抗体。方法根据GenBank发表的狂犬病病毒(Rabies Virus,RV)LEP-Flury株的基因序列设计引物,通过RT-PCR扩增出P基因的全长序列,克隆于pGM-T载体中,获得重组质粒pGM-T-P...
关键词：狂犬病病毒LEP—Flury株 P基因 P蛋白 原核表达 间接ELISA 
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