国家自然科学基金(31172342)

作品数：16被引量：53H指数：5
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相关作者：李刚金红岩隋修锟李文超梁琳更多>>
相关机构：中国农业科学院北京畜牧兽医研究所西藏职业技术学院河北北方学院四川农业大学更多>>
相关期刊：《中国兽医科学》《中国实验动物学报》《畜牧兽医学报》《中国人兽共患病学报》更多>>
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小反刍兽疫病毒受体细胞系的构建及应用被引量：2
《中国兽医科学》2017年第8期1022-1026,共5页金红岩 封家旺 梁琳 赵玲娜 隋修锟 史利军 侯绍华 李刚 
国家自然科学基金资助项目(31172342);国家科技支撑计划项目(2013BAD12B05);国际合作项目(D32025/17453)
为建立一株稳定表达山羊淋巴细胞活化分子(signaling lym phocyte activation molecule,SLA M)的细胞系,给研究小反刍兽疫病毒(peste des petits ruminants virus,PPRV)感染机制、病毒的分离和疫苗生产等奠定基础,本研究采用PCR扩增了S...
关键词：小反刍兽疫病毒 pDisplay载体 细胞系 
实时荧光定量RT-PCR检测小反刍兽疫病毒方法的建立被引量：6
《中国畜牧兽医》2016年第11期2844-2851,共8页赵玲娜 金红岩 梁琳 李刚 
国家自然科学基金项目(31172342);国家科技支撑计划(2013BAD12B05);转基因重大专项(2014ZX0801203B)
本试验旨在建立一种快速、灵敏的诊断小反刍兽疫的方法。本研究通过RT-PCR方法扩增小反刍兽疫病毒N基因,连接到pMD19-T克隆载体上,构建质粒标准品。根据GenBank中中国流行毒株及Nigeria 75/1疫苗株N基因保守序列设计引物,利用SYBR Gree...
关键词：小反刍兽疫病毒 普通RT-PCR 实时荧光定量RT-PCR SYBR GreenⅠ 
抗小反刍兽疫病毒P蛋白单链抗体的制备及鉴定被引量：1
《中国兽医科学》2016年第10期1226-1232,共7页金红岩 隋修锟 刘欢 李文超 梁琳 赵玲娜 温施慧 Zheney Makay 李刚 
国家自然科学基金资助项目(31172342)(31472203);国家科技支撑计划项目(2013BAD12B05)
为制备抗小反刍兽疫病毒(PPRV)Nigeria75/1株P蛋白的单克隆抗体并获得其单链抗体(ScFv)基因,利用纯化的PPRV和带有GST标签的重组P蛋白免疫BALB/c小鼠,制备抗PPRV P蛋白的单克隆抗体(m Ab),从分泌抗PPRV P单克隆抗体的杂交瘤细胞中提取总...
关键词：小反刍兽疫病毒 P蛋白 单链抗体 原核表达 
表达水泡性口炎病毒G蛋白的重组腺病毒的构建与鉴定被引量：1
《中国兽医科学》2015年第5期448-452,共5页薛晓娟 金红岩 隋修锟 李文超 李刚 
国家科技支撑计划项目(2013BAD12B05);国家自然科学基金项目(31172342);转基因重大专项(2014ZX0801203B);国际合作项目(D32025/17453);WSPA公益项目(2013-hx-04);创新团队基金项目(ASTIP-IAS15)
为了以复制缺陷型人5型腺病毒为表达载体,构建表达水泡性口炎病毒印第安纳型(VSV-IN)G蛋白的重组腺病毒,利用PCR扩增编码VSV-IN G蛋白的基因,并将其克隆至腺病毒穿梭载体pacAd-CMV K-NpA中;再将含有目的基因的重组穿梭质粒与腺病毒骨架...
关键词：水泡性口炎病毒 G蛋白 重组腺病毒 
小反刍兽疫病毒H基因DNA疫苗的构建及对小鼠的免疫原性
《畜牧兽医学报》2014年第7期1142-1147,共6页李文超 隋修锟 金红岩 梁琳 王文泉 李刚 
国家自然科学基金项目(31172342);国家科技支撑计划(2013BAD12B05);中央级公益性科研院所基本科研业务费(2014ywf-yb-06);FAO/IA-EA国际合作项目(CRP17453/D32030)
旨在构建表达小反刍兽疫病毒(PPRV)H蛋白的核酸疫苗,并评价其对小鼠的免疫原性。利用RT-PCR扩增了PPRV的H基因并将其克隆到pcDNA3.1(+)载体中,构建真核表达质粒pcDNA3.1-H,然后转染鸡胚成纤维(CEF)细胞,采用间接免疫荧光和Western blot...
关键词：小反刍兽疫病毒 DNA疫苗 H基因 免疫原性 
小反刍兽疫病毒H基因在杆状病毒中的表达及其免疫原性研究被引量：5
《畜牧兽医学报》2014年第6期974-980,共7页隋修锟 金红岩 李文超 史利军 赵占中 梁琳 李刚 
国家自然科学基金(31172342);国家科技支撑计划(2013BAD12B05);国际合作项目(D32025/17453);国家公益行业项目(200903037-2);中央级公益性科研院所基本科研业务费专项基金(2014ywf-yb-6)
为表达小反刍兽疫病毒(PPRV)H蛋白,并探讨其免疫原性,通过RT-PCR克隆PPRV Nigeria75/1毒株H基因,将其克隆至供体质粒pFB-LIC-Bse中,测序验证后将重组质粒pFB-LIC-Bse-PPRV-H转化至DH10Bac感受态细胞中,经同源重组获得重组杆状病毒穿梭质...
关键词：小反刍兽疫病毒 H蛋白 杆状病毒表达系统 免疫性检测 
小反刍兽疫病毒抗体间接ELISA检测方法的建立被引量：1
《中国兽医科学》2014年第6期569-575,共7页隋修锟 金红岩 李文超 梁琳 李刚 
国家自然科学基金项目(31172342);国家科技支撑计划项目(2013BAD12B05);国际合作项目(D32025/17453);国家公益行业项目(200903037-2)
为建立一种能快速、特异、敏感地检测血清中小反刍兽疫病毒(PPRV)抗体的方法,通过RT-PCR方法扩增出1 830bp的小反刍兽疫病毒的H基因,并将其克隆至原核表达载体pET-22b(+)中,进行H基因的重组表达。采用SDS-PAGE和Western-blot对重组蛋白...
关键词：小反刍兽疫病毒 H蛋白 间接酶联免疫吸附试验 
间接ELISA和竞争ELISA检测小反刍兽疫病毒抗体的比较被引量：5
《畜牧兽医学报》2014年第2期333-336,共4页王净 李刚 史利军 
国家自然科学基金(31172342);国家科技支撑计划(2013BAD12B05);国际合作项目(D32025/17453);国家公益性行业科研专项(200903037)
旨在比较检测小反刍兽疫抗体的间接ELISA和竞争ELISA方法,通过诱导表达小反刍兽疫病毒(PPRV)N蛋白,并以此作为包被抗原,检测94份绵羊和25份山羊血清样本。结果显示间接ELISA与标准竞争ELISA试剂盒的符合率为74.8%,竞争ELISA与标准竞争EL...
关键词：小反刍兽疫病毒 N蛋白 间接ELISA 竞争ELISA 
小反刍兽疫病毒Nigeria75/1株磷蛋白的表达及磷酸化位点的预测被引量：3
《中国兽医科学》2013年第12期1252-1256,共5页金红岩 封家旺 李文超 程朝飞 隋修锟 黄华欣 李刚 
国家自然科学基金资助项目(31172342);国家公益性行业科研专项(200903037)
为深入研究小反刍兽疫病毒(peste des petits ruminants virus,PPRV)P蛋白对病毒复制的影响,以小反刍兽疫病毒Nigeria75/1株为研究对象,通过RT-PCR法扩增P基因,将扩增出的P基因克隆到pGEX-6P-1原核表达载体中,成功构建pGEX-6P-1-PPRV-P...
关键词：P蛋白 小反刍兽疫病毒 原核表达 磷酸化位点 
狂犬病病毒N、G两种蛋白在间接ELISA方法中的应用比较
《中国人兽共患病学报》2013年第6期601-604,共4页王净 史利军 李刚 孙全文 吴淑琴 
国家科技支撑计划(No.2013BAD12B05);国际合作项目(No.D32025/17453);国家自然科学基金(No.31172342);国家公益性行业科研专项(No.200903037);河北省畜牧兽医局科技项目(No.2012-3-03)联合资助~~
目的比较狂犬病N、G两种蛋白检测抗体效果。方法本研究先通过比较pET-32a(+)和pGEX-6P-1两种载体表达的狂犬病病毒G蛋白和N蛋白,采用碳酸盐纯化表达量高的两种蛋白,再以纯化的抗原用于检测93份免疫犬血清。结果 (1)以pGEX-6P-1为载体的N...
关键词：狂犬病 N蛋白 G蛋白 pET-32a(+) pGEX-6P-1 蛋白纯化 抗体检测 
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