体外切割

作品数：32被引量：71H指数：5
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LbCpf1基因的原核表达、纯化与体外切割检测
《中国生物工程杂志》2020年第8期41-48,共8页吕一凡 李更东 薛楠 吕国梁 时邵辉 王春生 
黑龙江省大学生创新创业训练计划(201910225232);黑龙江省自然科学基金(C2016012)资助项目。
目的:为获得具有体外切割活性的LbCpf1蛋白。方法:将毛螺菌科细菌ND2006(Lachnospiraceae bacterium ND2006)的LbCpf1基因编码区连接至pHis*6(IV),构建原核表达质粒CRISPR-LbCpf1-6*His。将该重组质粒转化BL21(DE3)感受态细胞,IPTG诱导...
关键词：LbCpf1蛋白 原核表达 镍柱纯化 体外切割检测 
10-23型脱氧核酶对HBV S、C基因体外切割作用研究
《蚌埠医学院学报》2017年第12期1573-1575,共3页江京娣 张晓洁 张爱霞 位春芳 徐茹 葛建顺 钱中清 吕静竹 
国家自然科学基金项目(81570011);安徽省重点研究和开发计划(对外科技合作项目)(1604b0602026);安徽省高等学校省级自然科学研究重点项目(KJ2014A164);国家级大学生创新创业训练计划项目(201510367011)
目的:探讨10-23脱氧核酶(10-23 DRz)对HBV S基因及C基因体外转录产物的特异性切割作用。方法:分别构建含有HBV S基因或C基因的重组质粒,以线性化的重组质粒为模板,体外转录获得相应HBV S基因RNA及C基因RNA。设计并合成针对HBV S基因的DR...
关键词：乙型肝炎病毒 脱氧核酶 基因治疗 
AIV PB2基因靶向性M1GS核酶的构建及其体外切割活性测定被引量：1
《广东药科大学学报》2017年第1期103-107,共5页李小英 伍婧茹 刘琳 张文军 
广东省自然科学基金项目(S2012010009471);病毒学国家重点实验室开放基金项目(2012008)
目的针对禽流感病毒(AIV)复制酶PB2亚基的基因构建具有靶向切割作用的M1GS核酶,为新型抗AIV反义药物的开发奠定基础。方法基于大肠埃希菌的核糖核酸酶P(RNase P),根据AIV PB2基因的序列特征,设计一小段与之互补的引导序列GS,通过PCR技...
关键词：M1GS核酶 禽流感病毒 PB2基因 抗病毒 
双极等离子体电外科系统与单极电外科系统体外切割前列腺组织汽化率的比较研究被引量：8
《东南大学学报（医学版）》2012年第6期696-698,共3页开凯 陈向东 王忠 杨鲲 郭一俊 
上海市卫生局申康医院发展中心项目资助(批准号:SHDCI2007313)
目的:比较双极等离子体电外科系统(ESSB)与单极电外科系统(ESSM)在前列腺大体标本体外切割实验中的前列腺组织汽化率。方法:本研究中良性前列腺增生症患者30例,年龄(75.4±5.5)岁,均接受耻骨上前列腺增生腺瘤剜除术,剜除腺瘤重(49.7±17...
关键词：良性前列腺增生症 前列腺组织汽化率 双极电外科系统 单极电外科系统 
二价核酶基因构建及对PLRV负链靶序列的体外切割研究被引量：1
《华北农学报》2012年第2期12-18,共7页张剑峰 张鹤龄 于嘉林 迟胜起 贺秀芳 郝文胜 杨静华 
国家科技支撑计划项目(2007BAD49B02-6);青岛农业大学人才基金(630915)
根据锤头状核酶的作用模式,设计、合成并克隆了特异性切割马铃薯卷叶病毒(Potato leaf roll virus,PLRV)中国分离株(PLRV-Ch)复制酶基因负链RNA的二价核酶序列。将该核酶基因克隆到pGEM-4Z中,构建成体外转录载体pGEM-4ZDR;同时将包含核...
关键词：二价核酶 马铃薯卷叶病毒 复制酶基因 体外切割 
体外切割损伤脊髓神经元对其Fos、ChAT及GAD表达的影响
《神经解剖学杂志》2010年第5期532-536,共5页刘勇 阙海萍 刘少君 
目的:研究切割损伤对体外培养脊髓神经元Fos、胆碱乙酰转移酶(ChAT)及谷氨酸脱羧酶(GAD)表达的影响。方法:脊髓神经元纯化培养后分别计数碘化丙啶(PI)阳性细胞数和微管相关蛋白2(MAP2)阳性细胞数,决定脊髓神经元纯度。根据本实验室已建...
关键词：脊髓神经元 体外损伤 FOS CHAT GAD 大鼠 
引导RNase P对HCMV UL54 mRNA片段体外切割的EGS构建
《生物学杂志》2009年第5期4-6,共3页吕静竹 李月琴 周天鸿 
国家自然科学基金(No.30370776);广东省自然科学基金重大项目(No.36703);广东省自然科学基金(No.021162;000718)
HCMV是一种广泛存在的疱疹病毒,在免疫抑制和免疫功能低下人群中,HCMV感染可引起严重疾病。RNase P是细胞内催化tRNA5′末端成熟的酶,当EGSs与靶mRNA互补结合并形成类似tNRA的复合物时,大肠杆菌RNase P催化亚基M1 RNA可具备对靶mRNA特...
关键词：RNASE P 外部引导序列 人巨细胞病毒 UL54基因 
HCV特异性M1GS核酶的构建及体外切割活性研究被引量：2
《中国生物工程杂志》2008年第9期99-103,共5页张文军 宁容 张欣 李红枝 
广州市科技局科技计划项目(2005J1-C0291);广东药学院博士科研启动基金(43543106)资助项目
针对HCV基因组中较为保守的区域—5′UTR,设计一段GS引导序列,并与大肠杆菌RNase P的催化亚基—M1RNA的3′末端共价结合,构建序列特异性M1GS核酶—M1GS-HCV/C20。体外实验证实,所构建的人工核酶对HCV5′UTR具有明显的靶向切割活性,且这...
关键词：核酶P 引导序列 丙型肝炎病毒 5’非编码区 
Bridge Sequence对M1GS核酶体外切割活性的影响被引量：5
《广东药学院学报》2006年第5期537-540,552,共5页张文军 李月琴 李泓剑 贾雪芳 张欣 周天鸿 
国家自然科学基金(30370776);广东省自然科学基金(36703;021162和000718)
目的探讨B ridge Sequence(桥序列)对M1GS核酶体外切割活性的影响,从而为人工M1GS核酶的优化设计提供一定的理论依据。方法以含大肠杆菌核酶P催化单位(M1 RNA)基因的pFL117质粒作为模板,通过巧妙设计不同的下游引物,经PCR扩增、扩增产...
关键词：桥序列 M1GS 体外切割 核酶P 
HCMV UL97 mRNA序列特异性M1GS的构建及其体外切割活性研究(英文)被引量：1
《Acta Genetica Sinica》2005年第11期1205-1212,共8页张文军 李弘剑 李月琴 何华坤 唐冬生 张欣 周天鸿 
国家自然科学基金(编号:30370776);广东省自然科学基金(编号:36703,021162和000718)~~
HCMVUL97基因编码一种蛋白激酶,该酶参与调控病毒DNA的复制和衣壳的形成,且序列异常保守,可作为抗HCMV治疗的重要靶位。基于HCMVUL97mRNAT3位点附近的序列,设计一段与该位点互补的引导序列(GuideSequence,GS),并将其与大肠杆菌核酶P催...
关键词：核酶P(RNase P) M1GS 人巨细胞病毒 UL97 
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