重组羧肽酶原B

作品数:6被引量:10H指数:2
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重组羧肽酶原B突变体C383A的纯化与性质研究被引量:1
《食品与药品》2010年第9期308-312,共5页张洛盛 吴珊 吴倩 李素霞 
目的纯化羧肽酶原B突变体C383A并研究其酶学性质。方法用DEAE-FF离子交换树脂纯化C383A,测定其动力学参数,温度对酶活性的影响、温度稳定性、最适pH以及pH稳定性等酶学性质,并与野生型比较。结果纯化后获得高纯度突变体C383A,与野生型相...
关键词:重组羧肽酶原B 定点突变 纯化 酶学性质 
重组羧肽酶原B甲醇酵母的构建与分泌表达
《食品与药品》2008年第6期5-7,共3页李素霞 袁勤生 
目的构建重组羧肽酶原B甲醇酵母工程菌株。方法将羧肽酶原B编码基因整合入酵母质粒,电转化至甲醇酵母中,His缺陷培养基和G418抗性筛选获得阳性克隆株。用大肠杆菌表达的羧肽酶原B免疫家兔制备羧肽酶原B兔抗血清;经发酵、甲醇诱导后,蛋...
关键词:羧肽酶原B 甲醇酵母 表达 多克隆抗体制备 蛋白质印迹 
重组羧肽酶原B在大肠杆菌中的可溶性表达及活性羧肽酶B的纯化被引量:5
《药物生物技术》2006年第2期83-86,106,共5页张映新 李素霞 杨梓 袁勤生 
上海市重点学科建设资助项目
实现羧肽酶原B表达质粒在大肠杆菌中的可溶性表达,并对表达产物进行激活和纯化,得到活性CPB。采用摇瓶发酵,对诱导温度,诱导时间,诱导剂IPTG的浓度进行优化,促成其可溶性表达;优化酶解激活条件,提高粗酶液比活。粗酶液用DEAE-FF离子交...
关键词:羧肽酶B 可溶性表达 激活 纯化 
重组羧肽酶原B的体外变复性研究被引量:5
《分子科学学报》2005年第4期51-57,共7页张晓彦 李素霞 顾俊杰 袁勤生 
上海市重点学科资助项目
重组羧肽酶原B在大肠杆菌中过量表达时形成包涵体,需要经过体 外变复性后才能获得生物活性.为了提高羧肽酶原B的复性效率,首先对包涵 体的溶解条件进行了优化.对比了极端pH条件、各种变性剂和一些表面活性剂 对包涵体的溶解效果;并且...
关键词:重组羧肽酶原B 变性 复性 
重组羧肽酶原B的复性方法研究
《微生物学通报》2005年第2期39-44,共6页张晓彦 刘海峰 袁勤生 
上海市重点学科资助项目
构建的羧肽酶原B表达质粒在大肠杆菌中获得高表达。但目的蛋白是以包涵体的形式存在。为了获得活性羧肽酶B,必须对其包涵体进行变复性。首先利用稀释复性确定了羧肽酶原B复性的最佳缓冲液;在凝胶过滤复性中,研究了柱长和洗脱流速对羧肽...
关键词:羧肽酶原B 包涵体 凝胶过滤 稀释 透析 Ni^2+亲合层析 
重组羧肽酶原B的复性及纯化被引量:2
《中国生物制品学杂志》2005年第2期146-148,共3页张晓彦 袁勤生 
目的 建立重组羧肽酶原B复性方法及活性羧肽酶B的纯化方法。方法 重组大肠杆菌发酵后 ,表达的羧肽酶原B包涵体经洗涤、变性 ,采用凝胶过滤的方法对其进行复性及纯化。所得的复性液经Trypsin酶解后 ,采用DEAE FF阴离子交换层析进行羧肽...
关键词:复性效率 纯化方法 羧肽酶B L-ARG 包涵体 凝胶过滤 活性 稀释复性 阴离子交换层析 变性 
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